2-叔丁基-4-甲氧基苯酚制备新方法及其新晶型技术

本发明专利技术涉及2‑叔丁基‑4‑甲氧基苯酚稳定晶型A晶型、2‑叔丁基‑4‑甲氧基苯酚制备新方法；以及2‑叔丁基‑4‑甲氧基苯酚及其稳定晶型A晶型在制备抗肿瘤药物或者免疫调节剂药物中的用途。所述稳定晶型A晶型，使用Cu‑Kα辐射，以2θ角度表示的粉末X—射线衍射图谱，具有至少3个选自以下位置的吸收峰：6.27±0.10，6.94±0.10，12.27±0.10，13.36±0.10，14.01±0.10，14.79±0.10，15.31±0.10，17.05±0.10，18.30±0.10，19.00±0.10，20.47±0.10，20.98±0.10，22.37±0.10，23.68±0.10，24.55±0.10，25.37±0.10，30.83±0.10，33.12±0.10，40.50±0.10，42.81±0.10。

A New Method for the Preparation of 2-tert-butyl-4-methoxyphenol and Its New Crystal Form

The present invention relates to a new method for preparing 2 tert-butyl 4 METHOXYPHENOL stable crystal A, 2 tert-butyl 4 methoxyphenol, and the use of 2 tert-butyl 4 METHOXYPHENOL and its stable crystal A in the preparation of antineoplastic drugs or immunomodulator drugs. The stable crystal form A has at least three absorption peaks selected from the following positions: 6.27 (+0.10), 6.94 (+0.10), 12.27 (+0.10), 13.36 (+0.10), 14.01 (+0.10), 14.79 (+0.10), 15.31 (+0.10), 17.05 (+0.10), 18.30 (+0.10), 19.00 (+0.10), 20.47 (+0.10). 10, 20.98 (+0.10), 22.37 (+0.10), 23.68 (+0.10), 24.55 (+0.10), 25.37 (+0.10), 30.83 (+0.10), 33.12 (+0.10), 40.50 (+0.10), 42.81 (+0.10).

【技术实现步骤摘要】
2-叔丁基-4-甲氧基苯酚制备新方法及其新晶型
本专利技术涉及2-叔丁基-4-甲氧基苯酚稳定晶型A晶型、2-叔丁基-4-甲氧基苯酚制备新方法；以及2-叔丁基-4-甲氧基苯酚及其稳定晶型A晶型在制备抗肿瘤药物或者免疫调节剂药物中的用途。
技术介绍
最近研究表明2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(BHA)，Apocynin,TEMPO和NAC等抗氧剂可以通过抑制活性氧自由基ROS的产生，从而抑制单核细胞向M2巨噬细胞的分化，进而抑制K-rasLA2模型小鼠肺癌的发生(CellResearch2013,23:898-914.)但是，也有不少研究表明抗氧剂会加速肿瘤的生长，这与2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的体内抗肿瘤活性不相符，因此，抑制ROS的产生是2-叔丁基-4-甲氧基苯酚抑制TAMs的M2极化一个因素，而不是全部，BHA抑制TAMs的M2极化，进而抑制肿瘤发生、发展还存在其他机制(CancerRes.1986,46,165-168；CancerRes.,1985，45:1-8.)。然而，与此相矛盾的是，在早期的研究中，有证据表明2-叔丁基-4-甲氧基苯酚具有致癌作用(ArchivesofBiochemistryandBiophysics449(2006)171–177；RegulatoryToxicologyandPharmacology47(2007)68–77；FoodandChemicalToxicology38(2000)1075±1084)。因此，需要进一步研究评估2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的肿瘤治疗作用。专利技术人首先验证了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(BHA)抑制巨噬细胞M2极化的作用，并在肺癌、乳腺癌小鼠模型上证实了2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的抗肿瘤增殖与转移作用(CN201610037849.5)；同时，通过药物代谢试验发现BHA在体内的半衰期很短只有30-60分钟，此外，我们进行毒理学实验，发现小鼠600mg/kg给药，仅见部分“宿醉”状的中枢作用，半小时后可以恢复，1100mg/kg半数小鼠致死，存活的小鼠在30-60分钟后，毒性反应症状消失；低剂量小鼠长期给药2年未见毒性作用；因此，结合文献2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的代谢产物(具有DNA损伤作用，FoodandChemicalToxicology1999，37:1027-1038)研究结果，可以推断2-叔丁基-4-甲氧基苯酚本身具有抗肿瘤作用，其代谢产物tert-butylhydroquinone(TBHQ)与DNA的作用可能是其副作用产生的原因。BHA具有开发成为药物的潜力。然而，现有商业化的BHA产品均为2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)和3-叔丁基-4-甲氧基苯酚(3-BHA)的混合物，二者含量的比值约为9:1-50:1。专利技术人分别对比研究2-叔丁基-4-甲氧基苯酚和3-叔丁基-4-甲氧基苯酚的抗氧化活性和巨噬细胞极化调节活性，结果显示，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的抗氧化能力是3-叔丁基-4-甲氧基苯酚的2-3倍，巨噬细胞极化调节能力是3-叔丁基-4-甲氧基苯酚的5-100倍，因此，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚作为药品开发还需要提高纯度。2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的合成方法主要是以对甲氧基苯酚为原料，与叔丁醇，叔丁醇甲醚或者异丁烯在质子酸，离子交换树脂，烷氧基铝，或三氧化二铝等的催化下合成制备BHA，该方法制备的产品为2-BHA和3-BHA的混合物，也是目前商品化的BHA的主要制备方法(四川化工，1989，2，55)。最近韩国专利专利技术的一种BHA合成新方法是2-叔丁基对苯二酚为原料，在水/正己烷两相反应体系中，碱催化下与硫酸二甲酯反应，合成BHA，粗品收率96％，纯度89％，重结晶后收率84％，纯度99％，未有异构体含量的报道(KR2013051653)。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种高纯度的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)的制备方法。本专利技术所提供的高纯度2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)其纯度在99％以上，异构体3-叔丁基-4-甲氧基苯酚(3-BHA)含量小于1％。本专利技术所提供的高纯度2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)其纯度在99.0％以上，异构体3-叔丁基-4-甲氧基苯酚(3-BHA)含量小于等于0.5％。本专利技术所提供的高纯度2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)其纯度在99.0％以上，异构体3-叔丁基-4-甲氧基苯酚(3-BHA)含量小于等于0.2％。本专利技术所提供的高纯度的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)的制备方法为，利用空间位阻原理在具有空间位阻的碱(stericbase)的作用下，在非质子性溶媒中选择性活化2-叔丁基对苯二酚的4-位羟基，然后使其进一步与甲基化试剂发生SN1取代反应，最后对反应产物进行重结晶，得到高纯度的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)。其反应式如附图1所示。上述方法中，经过精密计算叔丁基氢原子对邻位羟基空间距离、催化反应常用碱的原子半径或者空间体积，所需的具有空间位阻的碱可为但不限于氢化钠、氢化钾、氢化钙、叔丁醇钾、氢氧化钠、氢氧化钾和二异丙基乙胺中的一种或多种，不选用氢化锂，氢氧化锂，碳酸锂，吡啶等空间位阻不合乎要求的碱。上述方法中，所述非质子性溶媒可为但不限于四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、丙酮、乙二醇二甲醚、二氧六环、甲苯、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或多种。本专利技术选用的溶剂(非质子性溶媒)有利于2-叔丁基对苯二酚的4-位羟基和空间位阻的碱形成盐，并有利于该盐进一步与甲基化试剂发生SN1取代反应。如果该碱和2-叔丁基对苯二酚反应有水生成，需要先除去生成的水。所述甲基化试剂可为但不限于碘甲烷、硫酸二甲酯、碳酸二甲酯和溴甲烷中的一种或多种。上述方法选择性活化中，所述具有空间位阻的碱与2-叔丁基对苯二酚的配比为：0.8-1.1：1。所述选择性活化在冰盐浴条件下进行，所述选择性活化的时间为0.1-2.0小时。上述方法SN1取代反应中，2-叔丁基对苯二酚与甲基化试剂中的反应性甲基的摩尔比为1：0.7-1.1。所述SN1取代反应在冰盐浴条件下进行，所述SN1取代反应的时间为0.5-24小时。上述方法所述重结晶采用石油醚或含石油醚大于80％的复合溶剂为溶剂进行重结晶。所述重结晶所用溶剂的量可为2-叔丁基-4-甲氧基苯酚粗品的体积的1-10倍。本专利技术的另一目的是提供一种2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)的稳定晶型(以下简称2-BHAA晶型)。本专利技术所提供的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚(2-BHA)的稳定晶型A晶型，使用Cu-Kα辐射，以2θ角度表示的粉末X—射线衍射图谱，具有至少3个选自以下位置的吸收峰：6.27±0.10，6.94±0.10，12.27±0.10，13.36±0.10，14.01±0.10，14.79±0.10，15.31±0.10，17.05±0.10，18.30±0.10，19.00±0.10，20.47±0.10，20.98±0.10，22.37±0.10，23.68±0.10，24.55±0.10，25.37±0.10，30.83±0.10，33.12±0.10，40.50±0.10，42.81±0.10。上述2-叔丁基-4-甲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.2‑叔丁基‑4‑甲氧基苯酚的稳定晶型A晶型，其特征在于：使用Cu‑Kα辐射，以2θ角度表示的粉末X—射线衍射图谱，具有至少3个选自以下位置的吸收峰：6.27±0.10，6.94±0.10，12.27±0.10，13.36±0.10，14.01±0.10，14.79±0.10，15.31±0.10，17.05±0.10，18.30±0.10，19.00±0.10，20.47±0.10，20.98±0.10，22.37±0.10，23.68±0.10，24.55±0.10，25.37±0.10，30.83±0.10，33.12±0.10，40.50±0.10，42.81±0.10。

【技术特征摘要】
1.2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的稳定晶型A晶型，其特征在于：使用Cu-Kα辐射，以2θ角度表示的粉末X—射线衍射图谱，具有至少3个选自以下位置的吸收峰：6.27±0.10，6.94±0.10，12.27±0.10，13.36±0.10，14.01±0.10，14.79±0.10，15.31±0.10，17.05±0.10，18.30±0.10，19.00±0.10，20.47±0.10，20.98±0.10，22.37±0.10，23.68±0.10，24.55±0.10，25.37±0.10，30.83±0.10，33.12±0.10，40.50±0.10，42.81±0.10。2.根据权利要求1所述的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的稳定晶型A晶型，其特征在于：在所述稳定晶型中，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的化学纯度大于等于98.0％，异构体3-叔丁基-4-甲氧基苯酚含量小于2.0％。3.根据权利要求1所述的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的稳定晶型A晶型，其特征在于：在所述稳定晶型中，2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的化学纯度大于等于99.0％，异构体3-叔丁基-4-甲氧基苯酚含量小于等于1.0％。4.权利要求1-3中任一项所述的2-叔丁基-4-甲氧基苯酚的稳定晶型A晶型的制备方法，包括：采用石油醚或含石油醚大于80％的复合溶剂对2-叔丁基-4-甲氧基苯酚粗品重结...

【专利技术属性】
技术研发人员：张学敏，何新华，周涛，刘正刚，李涛，吴胜明，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院生物医学分析中心，
类型：发明
国别省市：北京,11