依诺肝素钠中氯化苄残留的HPLC检测方法技术

本发明专利技术公开了一种依诺肝素钠中氯化苄残留的检测方法，它包括样品制备，对氯化苄标准溶液、系统适用性溶液及待测样品溶液分别进行HPLC检测，检测条件为：十八烷基键合硅胶填充的色谱柱，柱温：20～40℃，流动相：A：纯化水；B：有机溶剂，流速：0.5～1.0ml/min，检测波长：215～225nm，梯度洗脱。本发明专利技术可准确有效的对氯化苄残留进行定量，与气相色谱检测氯化苄比较，本发明专利技术检出限更低，样品检测时间短，检测更为灵敏。与气相‑质谱联用检测比较，本发明专利技术操作简便，检测成本低，灵敏度高，精确度高，准确可靠，氯化苄检出限为0.007ppm，定量限为0.02ppm，远低于氯化苄限度37.5ppm。检测结果能够满足检测质量结果判定，适用于实验室检测和企业产品质量控制，可用于多糖类生化药物中氯化苄残留检测的产品。

Determination of benzyl chloride in enoxaparin sodium by HPLC

The invention discloses a detection method for benzyl chloride residue in enoxaparin sodium, which includes sample preparation, determination of benzyl chloride standard solution, system applicability solution and sample solution by HPLC respectively. The detection conditions are as follows: a chromatographic column filled with Octadecyl bonded silica gel, column temperature: 20-40 C, mobile phase: A:pure; Chemical water; B: organic solvent, flow rate: 0.5 ~ 1.0ml/min, detection wavelength: 215 ~ 225nm, gradient elution. The invention can accurately and effectively quantify the residue of benzyl chloride. Compared with the detection of benzyl chloride by gas chromatography, the detection limit of the invention is lower, the sample detection time is shorter, and the detection is more sensitive. Compared with gas phase mass spectrometry, the method has the advantages of simple operation, low detection cost, high sensitivity, high accuracy and reliability. The detection limit of benzyl chloride is 0.007 ppm and the quantitative limit is 0.02 ppm, which is much lower than the benzyl chloride limit of 37.5 ppm. The test results can satisfy the determination of test quality results, and can be used for laboratory testing and product quality control of enterprises. It can also be used for the detection of benzyl chloride residues in polysaccharide biochemical drugs.

【技术实现步骤摘要】
依诺肝素钠中氯化苄残留的HPLC检测方法
本专利技术涉及氯化苄残留的检测方法。
技术介绍
肝素是从猪小肠粘膜中提取的一种生化药物，是一种结构复杂的糖胺聚糖类药物，临床上主要用于抗凝血和防治血栓栓塞性并发症的首选药物。低分子肝素是以肝素为原料，采用不同降解工艺生产的产品。其抗血栓作用优于肝素，可有效预防静脉血栓栓塞症和肺栓塞症，可用于矫形外科、神经外科术前和术后血栓形成，可大大降低患中风的风险，能更有效减少不稳定性冠状动脉综合症患者的死亡、心力衰竭、复发性心绞痛等，并可降低高甘油三脂血症，能有效解决普通未分级肝素及其衍生物长期使用后的出血、骨质疏松、诱导血小板减少等副作用。由于在依诺肝素钠生产工艺过程中，其中间体肝素苄基酯的制备步骤使用到了氯化苄，而氯化苄是潜在的遗传毒杂质，氯化苄的残留会对人体造成危害，故需对依诺肝素钠成品中的氯化苄残留进行控制。依据《ICHM7基因毒性杂质评估和控制》中的相关规定，推算依诺肝素钠中允许氯化苄的最大残留量为不超过37.5ppm，公式如下：氯化苄浓度限度式中：TTC：1.5μg/天；日服用量：40mg依诺肝素钠为多糖类生化药物，在水中溶解度良好，而氯化苄本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.依诺肝素钠中氯化苄残留的HPLC检测方法，其特征在于包括以下步骤：a. 样品制备：对照品溶液制备：将氯化苄加入有机溶剂制得浓度为1.8～2.3μg /ml的氯化苄对照品溶液备用；系统适用性溶液制备：将依诺肝素钠加2倍水量溶解后，加入氯化苄制得含氯化苄1.8～2.3μg /ml的溶液，然后滴加有机溶剂定容至10倍量，充分混匀后，上清液过滤，取续滤液作为系统适用性溶液备用；待测样品溶液制备：将依诺肝素钠加2倍水量溶解后，滴加有机溶剂定容至10倍量，充分混匀后，上清液过滤，取续滤液作为待测样品溶液备用；检出限溶液和定量限溶液制备：将上述对照品溶液逐级稀释后进行液相检测，将氯化苄的信噪大于3时的溶...

【技术特征摘要】
1.依诺肝素钠中氯化苄残留的HPLC检测方法，其特征在于包括以下步骤：a.样品制备：对照品溶液制备：将氯化苄加入有机溶剂制得浓度为1.8～2.3μg/ml的氯化苄对照品溶液备用；系统适用性溶液制备：将依诺肝素钠加2倍水量溶解后，加入氯化苄制得含氯化苄1.8～2.3μg/ml的溶液，然后滴加有机溶剂定容至10倍量，充分混匀后，上清液过滤，取续滤液作为系统适用性溶液备用；待测样品溶液制备：将依诺肝素钠加2倍水量溶解后，滴加有机溶剂定容至10倍量，充分混匀后，上清液过滤，取续滤液作为待测样品溶液备用；检出限溶液和定量限溶液制备：将上述对照品溶液逐级稀释后进行液相检测，将氯化苄的信噪大于3时的溶液作为检出限溶液，氯化苄信噪比大于10时的溶液作为定量限溶液；b.对上述氯化苄标准溶液、系统适用性溶液及待测样品溶液分别进行HPLC检测，检测条件为：色谱柱：十八烷基键合硅胶填充的色谱柱；柱温：20～40℃；流动相：...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏微，马志华，陈静，王凌雪，戚亦宁，白文举，
申请(专利权)人：河北常山生化药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13