三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法技术

本发明专利技术属于分析化学技术领域，具体涉及一种三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法。本发明专利技术是以羟基磷灰石功能化整体柱作为在线固相萃取整体柱，结合在线固相萃取‑高效液相色谱联用系统，建立三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测新方法。本发明专利技术利用整体柱中羟基磷灰石颗粒与磷酸基团之间的静电相互作用实现对三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线富集与净化。本发明专利技术方法简单，工艺巧妙，所需仪器普及度较高，易于推广，可实现三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的高效富集和净化，并满足三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的高灵敏检测要求。

Online solid phase extraction method for detection of adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites

The invention belongs to the technical field of analytical chemistry, in particular to an on-line solid phase extraction detection method for adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites. The present invention uses hydroxyapatite functionalized monolithic column as on-line solid phase extraction monolithic column, and establishes a new on-line solid phase extraction detection method for adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites combined with on-line solid phase extraction and high performance liquid chromatography. The invention realizes on-line enrichment and purification of adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites by electrostatic interaction between hydroxyapatite particles and phosphoric acid groups in a monolithic column. The method has the advantages of simple method, ingenious technology, high popularity of the required instrument and easy popularization, and can realize the efficient enrichment and purification of adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites, and meet the high sensitive detection requirements of adenosine triphosphate and its phosphorylated metabolites.

【技术实现步骤摘要】
三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法
本专利技术属于分析化学
，具体涉及一种三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法。
技术介绍
三磷酸腺苷(AdenosineTriphosphate，ATP)是一切生物体新陈代谢的能量源泉，普遍存在于一切生物细胞体内，为细胞内各种需能过程提供能量，是细胞生存的必须因素。当生命体存活时，其可通过氧化体内各种有机化合物来补充能量，因此其ATP含量相对稳定。当生命体死亡后，由于其体内氧的来源中断，ATP的来源则通过磷酸肌酸以及酶解等方式进行补充；当这些物质也耗尽时，ATP的含量就开始下降。其后ATP的降解顺序为；ATP-ADP(二磷酸腺苷)-AMP(单磷酸腺苷)-IMP(单磷酸肌苷)-HxR(肌苷)-Hx(次黄嘌呤)。通过评价生鲜食品中ATP及其降解过程中的这些代谢产物含量变化，可以从一个侧面实现相关产品新鲜度的评价。目前，三磷酸腺苷及其代谢产物的常见的的检测方法主要有液相色谱法、电泳法、层析法等，但现有方法大都存在着操作时间长或精度低等问题。在线固相萃取（Onlinesolidphaseextraction,OnlineS本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法，其特征在于：所述的检测方法是以羟基磷灰石功能化整体柱作为在线固相萃取整体柱，结合在线固相萃取‑高效液相色谱联用系统，建立三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法；所述三磷酸腺苷的磷酸化代谢产物为二磷酸腺苷、单磷酸腺苷和单磷酸肌苷；所述的羟基磷灰石功能化整体柱是以将羟基磷灰石纳米颗粒、尿素水溶液、甲醛水溶液、聚乙二醇、催化剂混合，通过一步原位脱水缩聚制得；按质量百分数之和为100%计，各组分占整体柱制备配方组成总质量的百分比为：羟基磷灰石纳米颗粒1.7~5%、聚乙二醇3.5~13.4%、尿素溶液33~35%、甲醛溶液41~44...

【技术特征摘要】
1.一种三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法，其特征在于：所述的检测方法是以羟基磷灰石功能化整体柱作为在线固相萃取整体柱，结合在线固相萃取-高效液相色谱联用系统，建立三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法；所述三磷酸腺苷的磷酸化代谢产物为二磷酸腺苷、单磷酸腺苷和单磷酸肌苷；所述的羟基磷灰石功能化整体柱是以将羟基磷灰石纳米颗粒、尿素水溶液、甲醛水溶液、聚乙二醇、催化剂混合，通过一步原位脱水缩聚制得；按质量百分数之和为100%计，各组分占整体柱制备配方组成总质量的百分比为：羟基磷灰石纳米颗粒1.7~5%、聚乙二醇3.5~13.4%、尿素溶液33~35%、甲醛溶液41~44%、催化剂8.3~9.1%；所述尿素水溶液，其浓度为1g/mL；所述甲醛水溶液，其中甲醛的质量浓度为33%~37%；所述催化剂为磷酸水溶液，其浓度为1.8mol/L；所述聚乙二醇的平均分子量为6000；所述羟基磷灰石纳米颗粒粒径为200nm。2.根据权利要求1所述的一种三磷酸腺苷及其磷酸化代谢产物的在线固相萃取检测方法，其特征在于：所述在线固相萃取-高效液相色谱联用系统为：包括十通阀、六通阀、固相萃取柱、液相色谱输液泵A、液相色谱输液泵B、定量环A、定量环B、液相色谱分析柱以及检测器，所述六通阀的端口2与液相色谱输液泵A的输出端相连，六通阀的端口1和端口4分别与定量环A的两端相连，六通阀的端口3和十通阀的端口1相连，所述十通阀的端口2和端口7分别与固相萃取柱的两端相连，十通阀的端口4与液相色谱输液泵B的输出端相连，十通阀的端口5和端口8分别与定量环B的两端相连，十通阀的端口9与液相色谱分析柱的输入端相连，所述液相色谱分析柱的输出端与检测器相连；所述六通阀的端口5和端口6以及十通阀的端口6分别外接流出的废液管；所述十通阀的端口3和端口10通过管...

【专利技术属性】
技术研发人员：张其清，王家斌，李文邦，姜楠，肖剑华，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35