【技术实现步骤摘要】
一种毛干样本裂解和DNA提取纯化方法及系统
本专利技术涉及一种提取纯化DNA的方法,特别涉及一种快速便捷高效的毛干样本快速裂解和DNA提取纯化方法,以及相应的系统,属于DNA提取
技术介绍
随着法医检测技术的不断进步,犯罪现场的DNA生物物证已经成为案件侦破的利器,但近几年犯罪嫌疑人的反侦察意识逐步提高,一些常见的生物物证如血液、血斑、唾液等常常被犯罪嫌人清理消除,而一些微量生物物证如毛干样本,由于其易遗留、体积小、不易被发现等特点往往被犯罪嫌疑人忽略而遗留在犯罪现场,如果能成功从毛干样本中提取到DNA并加以分析利用,就能为案件的侦破提供关键线索。但毛干样本中的DNA属于极微量生物物证,对于这类生物物证检验的难点主要在于两方面,一方面样本在化学试剂中反应时间过长极易导致DNA的降解;另一方面在实验操作过程中样本极易被外源性DNA污染或发生样本间的交叉污染,因此这就要求实验员在实验过程必须尽量缩短样本在化学试剂中的反应时间,同时操作时必须仔细谨慎防止污染。毛干样本用于法医DNA分型主要分为四个步骤:1.毛干样本的裂解;2.DNA的提取纯化;3.DNA的扩增 ...
【技术保护点】
1.一种毛干样本裂解和DNA提取纯化方法,其特征在于包括:提供毛干样品;使所述毛干样品于液氮环境中静置,之后加入裂解液对所述毛干样本进行裂解处理,获得毛干样品裂解液;其中,所述裂解液包含:缓冲液、十二烷基硫酸钠、蛋白酶K和二硫苏糖醇溶液,所述裂解处理的温度为50~60℃,时间在60min以下;将所述毛干样品裂解液与异硫氰酸胍溶液混合均匀,形成混合液,使所述混合液进入至少一密闭的反应腔室中,并在负压作用下,使所述反应腔室中的液体从反应腔室中被抽吸除去,之后在密封状态下,使冲洗液进入所述反应腔室进行冲洗,之后使冲洗液从反应腔室中被抽吸除去;以及,在密封状态下,使洗脱液进入所述反 ...
【技术特征摘要】
1.一种毛干样本裂解和DNA提取纯化方法,其特征在于包括:提供毛干样品;使所述毛干样品于液氮环境中静置,之后加入裂解液对所述毛干样本进行裂解处理,获得毛干样品裂解液;其中,所述裂解液包含:缓冲液、十二烷基硫酸钠、蛋白酶K和二硫苏糖醇溶液,所述裂解处理的温度为50~60℃,时间在60min以下;将所述毛干样品裂解液与异硫氰酸胍溶液混合均匀,形成混合液,使所述混合液进入至少一密闭的反应腔室中,并在负压作用下,使所述反应腔室中的液体从反应腔室中被抽吸除去,之后在密封状态下,使冲洗液进入所述反应腔室进行冲洗,之后使冲洗液从反应腔室中被抽吸除去;以及,在密封状态下,使洗脱液进入所述反应腔室进行洗脱,之后使洗脱液从反应腔室中被抽吸并收集,获得毛干样本的DNA分子。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于还包括:对所述毛干样品进行预处理;优选的,所述预处理包括:将所述毛干样品洗净,并剪成长度为1~10cm的毛干样本片段。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于具体包括:将所述毛干样品加入液氮中静置5~10min,之后加入裂解液,并置于超声波震荡仪或细胞破碎匀质仪中震荡20~40s,之后,再置于震荡金属浴上加热至50~60℃,使所述毛干样本完全消化;和/或,所述裂解液中蛋白酶K的浓度为10~20mg/mL;和/或,所述裂解液中二硫苏糖醇溶液的浓度为0.5~2mol/L;和/或,所述缓冲液包括三羟甲基氨基甲烷;优选的,所述缓冲液的pH值为7.0~9.0。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述反应腔室内设置有能够吸附DNA分子的吸附机构;优选的,所述吸附机构包括硅胶膜。5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴渊虬,张惠丹,李倩倩,赵洪玉,
申请(专利权)人:苏州博睿义达生物科技有限公司,苏州绘真生物科技有限公司,苏州工业园区龙兆生物科技研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。