一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法技术

本发明专利技术涉及寡核苷酸探针制备，具体涉及一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法。采用平末端内切酶和切刻内切酶同时切割含有多个重复单元DNA双链的质粒，而后利用lambda外切酶的作用原理进行特异性切割，切割后通过电泳分离即得到含有多个重复单元的目的单链DNA。本发明专利技术方法适用于制备所有序列成分的DNA探针，尤其是针对难以进行PCR扩增的序列，如含有多个重复单元的，且所制备的探针长度可达800nt，解决了多重复单元DNA长探针制备的技术问题。

【技术实现步骤摘要】
一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法
本专利技术涉及寡核苷酸探针制备，具体涉及一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法。
技术介绍
Lambda核酸外切酶是一个高度持续性从双链DNA5′-3′端选择性切割磷酸化单链的核酸外切酶。Lambda核酸外切酶的最适底物是5′磷酸化的平末端双链DNA，它以3′端核酸链为模板，从DNA的5′末端开始按顺序进行切割，在两端中央位置形成单链【1】。Lambda核酸外切酶的另一特点是不能从nick(切刻)位点及gap位点的5′端开始切割【2】。分支DNA信号放大技术(branched-DNA,bDNA)是Chiron公司推出的一种的核酸杂交信号放大技术，该检测方法具有高灵敏度，非扩增等特点【3】。目前主要应用于HPV,HBV,HCV,HIV等病毒的检测，基因表达分析以及肿瘤基因分析等方面。分支DNA信号放大技术在杂交检测过程中主要用到以下这几种探针：CP(captμreprobe)-固定在微孔板上，用于捕获目的序列；CE(captμreextender)-一端与CP所捕获的目标序列结合，另一端与preamplifier结合；preamplifi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法，其特征在于：采用平末端内切酶和切刻内切酶同时切割含有多个重复单元DNA双链的质粒，而后利用lambda外切酶的作用原理进行特异性切割，切割后通过电泳分离即得到含有多个重复单元的目的单链DNA。

【技术特征摘要】
1.一种制备含有多个重复单元DNA长探针的方法，其特征在于：采用平末端内切酶和切刻内切酶同时切割含有多个重复单元DNA双链的质粒，而后利用lambda外切酶的作用原理进行特异性切割，切割后通过电泳分离即得到含有多个重复单元的目的单链DNA。2.权利要求1所述的制备含有多个重复单元DNA长探针的方法，其特征在于：所述含有多个重复单元DNA双链的质粒中，目的DNA序列两端分别含有平末端内切酶酶切位点和切刻内切酶酶切位...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭海燕，黄妙玲，王伟伟，
申请(专利权)人：胤安国际辽宁基因科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁,21