【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于从微生物中提取脱氧核糖核酸和/或核糖核酸的珠粒撞击管和方法本申请要求2016年1月30日提交的欧洲专利申请号EP16153540的优先权利益，其内容通过引用整体并入本文。背景感染性疾病的遗传测试与诊断于临床微生物学的领域中扮演重要角色。为克服基于培养的方法学固有的偏差与限制，遗传测试越来越多地被用于检测样本中所含的微生物。为了使如此遗传测试可被执行，细胞必须被裂解以允许以尽可能高的浓度自微生物提取DNA和/或RNA。ZhongtangYu等人，2004,“ImprovedextractionofPCR-qualitycommunityDNAfromdigestaandfecalsamples,”BioTechniques,Vol.36(5)：808-812描述用于自消化物和粪样本分离DNA的方法。于该方法中，0.25g的取自母牛的胃肠系统的样本液(其被假定为含有微生物(即细菌))首先与1mL的含有500mM氯化钠、pH8.0的50mMTris盐酸盐、50mM乙二胺四乙酸和4％十二烷基硫酸钠的缓冲液混合。此外，0.4g无菌氧化锆珠粒被导入该样本液中。所获得的混合物随后于样本管中以Mini-BeadBeaterTM振荡三分钟，使得珠粒破坏微生物的细胞壁。于此程序中，细胞中所含的DNA被释放。该缓冲液亦可用于保护DNA免于被样本液中所含的DNA酶降解。于执行该珠粒撞击后，杂质是通过以醋酸铵沉淀来自样本移除。核酸是通过以异丙醇沉淀来获得。于进一步方法步骤中，DNA是依序以RNA酶与蛋白酶K消化并随后以管柱纯化。该方法有以下缺陷：其是相对复杂的。因为样本液由于该缓...
【技术保护点】
1.一种用于自液体样本中所含的细胞产生裂解产物的方法，其包括在裂解缓冲液不存在下和在一种或多种封阻剂存在下在足以裂解所述细胞的条件下搅动珠粒撞击系统内的所述液体样本，所述珠粒撞击系统包含珠粒撞击管与珠粒。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.30 EP EP16153540.61.一种用于自液体样本中所含的细胞产生裂解产物的方法，其包括在裂解缓冲液不存在下和在一种或多种封阻剂存在下在足以裂解所述细胞的条件下搅动珠粒撞击系统内的所述液体样本，所述珠粒撞击系统包含珠粒撞击管与珠粒。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述液体样本含有内源性封阻剂。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述搅动是在添加剂不存在下实现。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种封阻剂对所述液体样本而言是外源性。5.根据权利要求2或4所述的方法，其中所述珠粒：a)是适用于裂解细菌、酵母、丝状真菌、孢子、植物细胞或动物细胞；b)包含：i.矿物质珠粒、陶瓷珠粒、玻璃珠粒、金属珠粒或其组合；ii.锆珠粒、锆石珠粒、氧化锆珠粒、石英珠粒、氧化铝珠粒、碳化硅珠粒、陶瓷珠粒、二氧化硅玻璃珠粒、不锈钢珠粒、铬钢珠粒或其组合；c)具有范围在50μm至3mm的直径；或d)a)-c)的任何组合。6.根据权利要求1至5中的任一项所述的方法，其进一步包括于搅动所述液体样本前将所述液体样本放置在样本管内的步骤。7.根据权利要求1至6中的任一项所述的方法，其中所述搅动包含使所述珠粒撞击系统经受振荡运动。8.根据权利要求1至7中的任一项所述的方法，其中所述样本是生物样本、环境样本或食物产品。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述样本是选自以下的生物样本：血液、血清、唾液、尿液、胃液、消化液、眼泪、粪便、精液、阴道分泌物、组织间隙液、源自肿瘤性组织的液体、眼液、汗液、黏液、耳垢、油、腺体分泌物、呼吸、脊髓液、毛发、指甲、皮肤细胞、血浆、自鼻拭子获得的液体、自鼻咽洗液获得的液体、脑脊液、组织样本、自喉拭子获得的液体或组织、自创伤拭子获得的液体或组织、活检组织、胎盘液、羊水、腹膜透析液、脐带血、淋巴液、腔液、痰、脓、微生物群、胎粪、母乳或将以上的任一项处理、提取或分离的样本。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述生物样本是：a)尿液、痰或将尿液处理、提取或分离的样本；b)痰或将痰处理、提取或分离的样本；c)创伤拭子或将创伤拭子处理、提取或分离的样本；d)血液或将血液处理、提取或分离的样本；或e)腹膜透析液或将腹膜透析液处理、提取或分离的样本。11.根据权利要求8所述的方法，其中所述样本是选自以下的环境样本：土壤、地下水、地表水、废水或将以上的任一项处理、提取或分离的样本。12.根据权利要求1至11中的任一项所述的方法，其中所述细胞包含一种或多种病原体。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述一种或多种病原体包括：a)一种或多种细菌病原体、病毒病原体、真菌病原体或其组合；或b)结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、鸟分枝杆菌副结核亚种(Mycobacteriumaviumsubspparatuberculosis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、二甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA)、酿脓链球菌(Streptococcuspyogeues)、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)、无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)、流行性感冒嗜血杆菌(Haemophilusinfluenzae)、副流感嗜血杆菌(Haemophilusparainfuluezae)、卡他摩氏菌(Moraxellacatarrhalis)、肺炎克留氏菌(Klebsiellapneumoniae)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)、不动杆菌属(Acinetobacter)物种、百日咳博德氏杆菌(Bordetellapertussis)、脑膜炎双球菌(Neisseriameningitidis)、炭疽杆菌(Bacillusanthracis)、奴卡氏菌属(Nocardia)物种、放线菌属(Actinomyces)物种、肺炎霉浆菌(Mycoplasmapneumoniae)、肺炎披衣菌(Chlamydiapneumonia)、退伍军人杆菌属(Legionella)物种、杰氏肺囊虫(Pneumocystisjiroveci)、A型流行性感冒病毒、细胞巨大病毒、鼻病毒、屎肠球菌(Enterococcusfaecium)、鲍氏不动杆菌(Acinetobacterbaumannii)、无霉菌酸棒状杆菌(Corynebacteriumamycolatum)、产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)CI4413、萎垂沙雷氏菌(Serratiamarcescens)、马链球菌(Streptococcusequi)和白色念珠菌(Candidaalbicans)的一种或多种。14.根据权利要求12所述的方法，其中所述样本是痰或将痰处理、提取或分离的样本并且所述一种或多种病原体包括以下的一种或多种：结核分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、二甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌(MRSA)、酿脓链球菌、肺炎链球菌、无乳链球菌、流行性感冒嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、卡他摩氏菌、肺炎克留氏菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌属物种、百日咳博德氏杆菌、脑膜炎双球菌、炭疽杆菌、奴卡氏菌属物种...
【专利技术属性】
技术研发人员：H·克洛夫特，N·斯密特，
申请(专利权)人：保障生物系统控股有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB
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