一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法技术

本发明专利技术公开了一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法，涉及核酸提取技术领域。包括(1)配制裂解液；(2)组织裂解；(3)初步分离；(4)核酸沉淀；(5)核酸提纯。本发明专利技术通过改进核酸提取过程中使用的裂解液，大大简化了核酸提取的方法，操作简便安全，成本低廉，解决了现有核酸提取方法不适应室外环境，检测时间较长以及所用提取试剂含有有毒有害物质存在安全隐患的问题；通过调整裂解液的PH值可实现分别对DNA和RNA的提取，解决了现有试剂盒等方法只能提取单一核酸的问题。

A rapid extraction method for nucleic acids from animal tissue diseases

The invention discloses a rapid extraction method for nucleic acid of animal tissue disease material, which relates to the technical field of nucleic acid extraction. It includes: (1) preparation of lysate; (2) tissue lysis; (3) initial separation; (4) nucleic acid precipitation; (5) purification of nucleic acids. By improving the cracking fluid used in the process of nucleic acid extraction, the method of nucleic acid extraction is greatly simplified, the operation is simple, safe and the cost is low, and the problems of inadaptability of the existing methods of nucleic acid extraction to outdoor environment, long detection time and hidden danger of toxic and harmful substances contained in the extracted reagents are solved. By adjusting the PH value of the lysate, DNA and RNA can be extracted separately, which solves the problem that only single nucleic acid can be extracted by existing kits.

【技术实现步骤摘要】
一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法
本专利技术属于核酸提取
，特别是涉及一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法。
技术介绍
核酸(包括DNA和RNA)提取纯化是分子生物学中的一项基本操作，分子生物学技术以其快速、敏感、特异等优点而在动物疫病的检测，确诊工作中得到越来越多的应用，目前核酸的提取包括酚抽提法、盐洗法、TRIZOL法、磁珠法以及试剂盒法等，但传统的检测方法对仪器和环境要求较高，无法满足室外作业，为进一步提高口岸动物检疫的水平，专利技术一种新的既能满足口岸快速检测技术又能满足实验室精准检测技术要求的方法尤为重要；专利申请201010621890公开了一种用于生物样品中核酸提取纯化的细胞裂解试剂，该试剂溶液呈碱性并含有胍盐、铵根离子及表面活性剂成分，在碱性液相环境下能更充分裂解生物样品中的细胞，并能促进释放到细胞外的核酸(DNA/RNA)与固相材料的结合吸附，最后通过洗脱步骤将核酸从固相材料上分离下来。该专利申请中虽然公开了pH8～13的碱性裂解条件，但通过添加铵根离子仅能使裂解液的pH达到9左右。而通入氨气虽然能达到更高的碱性条件，但氨气易挥发，不便于长期稳定保存，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制裂解液；所述裂解液包括胍盐、缓冲剂、表面活性剂和PH调节剂；(2)组织裂解：将裂解液加入组织样本中，还用匀浆仪匀浆至无可见组织块；(3)初步分离：放置15分钟，13000g离心5分钟，分离上清液；(4)核酸沉淀：向上清液中加入若干体积的异丙醇，10000g离心10分钟，弃除上清液，得核酸沉淀；(5)核酸提纯：使用浓度为75％的乙醇洗涤沉淀物，进行提纯，得所要提取的核酸。

【技术特征摘要】
1.一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制裂解液；所述裂解液包括胍盐、缓冲剂、表面活性剂和PH调节剂；(2)组织裂解：将裂解液加入组织样本中，还用匀浆仪匀浆至无可见组织块；(3)初步分离：放置15分钟，13000g离心5分钟，分离上清液；(4)核酸沉淀：向上清液中加入若干体积的异丙醇，10000g离心10分钟，弃除上清液，得核酸沉淀；(5)核酸提纯：使用浓度为75％的乙醇洗涤沉淀物，进行提纯，得所要提取的核酸。2.根据权利要求1所述的用于动物组织病料核酸的快速提取方法，其特征在于，所述胍盐为异硫氰酸胍；所述缓冲剂为柠檬酸钠；所述表面活性剂为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李林红，
申请(专利权)人：芜湖帮许来诺医疗设备科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34