PCR纯化试剂及使用该试剂纯化PCR产物的方法技术

技术编号:19159363 阅读:42 留言:0更新日期:2018-10-13 12:32
本发明专利技术公开了一种PCR纯化试剂及使用该试剂纯化PCR产物的方法,PCR纯化试剂,包括DNA结合液和洗涤液,所述DNA结合液的配方为:3mol/L氯化钠、体积浓度为30%的乙醇;洗涤液的配方为:10mmol/L Tris.HCl、100mmol/L NaCl、1mmol/L EDTA、体积浓度80%乙醇,Tris.HCl的pH值为8.0。本发明专利技术的PCR纯化试剂可以成功用于DNA的纯化而不影响DNA纯化的产量。本发明专利技术的PCR纯化试剂与再生硅柱一起使用,可以减少一次性商业试剂盒的使用数量,减少实验室垃圾的产生,保护环境,节约社会资源和使用费用。

【技术实现步骤摘要】
PCR纯化试剂及使用该试剂纯化PCR产物的方法
本专利技术属于生物试剂领域,具体涉及一种PCR纯化试剂及使用该试剂纯化PCR产物的方法。
技术介绍
基因克隆是二十世纪最伟大的专利技术之一,广泛应用于许多研究领域包括生物,医学,农业,生物制药等。基因克隆是利用具有复制能力的载体或质粒将获得的目的基因或DNA(脱氧核糖核酸)片段与载体在体外进行连接形成重组载体并将之转化宿主细菌进行复制,通过菌体培养、繁殖和提取质粒等步骤获得大量重组DNA的过程。基因克隆包含一系列实验步骤,包括目的基因的扩增与纯化,限制性酶酶切反应与琼脂糖凝胶电泳,DNA胶抽提与连接反应,细菌的转化、培养和质粒提取等步骤。目前,研究者通常采用两种主要的方法完成基因克隆,即采用纯手工方法或者采用商业试剂盒与手工相结合的方法。纯手工方法费时费力,实验进展慢;而采用商业试剂盒与手工结合的方法,可加速实验的进程。在基因克隆过程中PCR(PolymeraseChainReaction-聚合酶链式反应)纯化试剂盒常用于PCR产物纯化。经PCR纯化的DNA不仅纯度高,而且增加随后的酶切反应的效率,因此,使用PCR试剂盒具有省时、省力,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PCR纯化试剂,其特征在于,它包括DNA结合液和洗涤液,所述DNA结合液的配方为:3mol/L氯化钠、体积浓度为30%乙醇;所述洗涤液的配方为:10mmol/L Tris.HCl、100mmol/L NaCl、1mmol/L EDTA、体积浓度80%乙醇,Tris.HCl的pH值为8.0。

【技术特征摘要】
1.PCR纯化试剂,其特征在于,它包括DNA结合液和洗涤液,所述DNA结合液的配方为:3mol/L氯化钠、体积浓度为30%乙醇;所述洗涤液的配方为:10mmol/LTris.HCl、100mmol/LNaCl、1mmol/LEDTA、体积浓度80%乙醇,Tris.HCl的pH值为8.0。2.PCR产物纯化的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将PCR产物转移至无菌离心管中,向离心管加入5倍体积的权利要求1所述的DNA结合液并用移液枪将PCR产物与DNA结合液彻底匀;(2)将PCR产物混合液转移至PCR产物纯化用的硅柱中,置于离心机中以12000rpm速度离心1分钟,弃收集管中废液;(3)向硅柱中加权利要求1所述的洗涤液,置于离心机中以12000rpm速度离心1分钟,弃收集管中废液;将硅柱重置...

【专利技术属性】
技术研发人员:邓文生王娟赵沙沙
申请(专利权)人:武汉科技大学
类型:发明
国别省市:湖北,42

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