一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗SLE疗效的用途和试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的用途和试剂盒，所述的HSP90B1基因多态性位点为rs12426382和/或rs10778306，试剂盒的成分包括：检测HSP90B1基因多态性位点基因型的引物，PCR扩增酶及相应缓冲液，PCR产物纯化酶，dNTP，单碱基延伸反应酶及相应缓冲液，单碱基延伸产物纯化酶。当HSP90B1基因rs12426382多态性位点基因型为CT和/或TT时，预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮的疗效好；HSP90B1基因rs10778306多态性位点基因型为AG和/或GG时，预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮的疗效好。本发明专利技术为指导系统性红斑狼疮患者的合理用药及个体化治疗提供了新的思路和方法。

Use of HSP90B1 gene polymorphism locus genotype to predict therapeutic effect of glucocorticoid on SLE and kit

The invention relates to a method to predict the effect of glucocorticoids in the treatment of systemic lupus erythematosus HSP90B1 gene polymorphism genotype based on the use and kit, HSP90B1 gene polymorphisms in the rs12426382 and / or rs10778306 kit comprises the following components: the detection of HSP90B1 gene polymorphism genotype, PCR amplification the enzyme and the corresponding buffer, PCR purified enzyme, dNTP enzyme, single base extension and the corresponding buffer, single base extension products were purified enzyme. When the HSP90B1 gene rs12426382 polymorphism genotype CT and / or TT, to predict the effect of glucocorticoid in the treatment of systemic lupus erythematosus; HSP90B1 gene rs10778306 genotype AG and / or GG, prediction of glucocorticoid in the treatment of systemic lupus erythematosus good curative effect. The present invention provides a new idea and method for guiding rational use of drugs and individualized treatment for patients with systemic lupus erythematosus.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗SLE疗效的用途和试剂盒，属于医药卫生

技术介绍
系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus，SLE)是一种累及多系统、多器官、临床表现复杂、病程迁延反复的自身免疫性疾病。证据显示SLE好发于女性(男女患病率比约为1:9)，尤其是15～45岁中青年女性，且妊娠会诱发或加重狼疮。SLE的发生发展与遗传因素、环境因素以及机体免疫系统紊乱有关，其中遗传因素扮演着至关重要的角色。受种族、人群、地区、时间、诊断标准等因素的影响，SLE在世界不同地区的流行情况报道结果存在较大差异，多数证据显示我国SLE患病率高于西方发达国家和亚洲其它国家，约为70/10万人，妇女的患病率高达113/10万人。近年随着医疗水平的不断提升，SLE患者生存率也不断提高，我国SLE患者5年生存率约为95％，10年生存率约为90％。SLE是最主要的致残性和致死性自身免疫性疾病，给患者本人和其家庭及社会造成了极大的经济负担，已经成为危害人民生命健康尤其是青中年女性生命健康的重要公共卫生学问题之一。糖皮质激素(glucocorticoids，GC)是治疗SLE的基础药物，但其治疗疗效存在极大的个体化差异。规范GC在SLE患者中的应用，实现SLE患者的个体化用药，使患者获益最大，仍是当前SLE治疗中的最大挑战。大量研究证据显示GC治疗SLE就像一把“双刃剑”，一方面GC有快速抗炎和免疫抑制作用，另一方面GC也会导致很多的副作用，包括诱发或加重感染、引起物质代谢和水盐代谢紊乱、心血管和消化系统并发症、白内障和青光眼、骨质疏松以及神经精神异常等；同时，临床实践中一部分SLE患者对GC治疗反应敏感，而另一部分患者对治疗反应不敏感，使得患者病情反复，影响预后。因此，SLE治疗必须遵循个体化用药原则。目前，临床上缺乏能够真正指导SLE患者个体化治疗的具体方法，风湿科医生只能凭借的个人经验进行尝试性治疗，这严重阻碍了SLE患者的个体化治疗的实现。药物基因组学(pharmacogenomics)是功能基因组学研究的一个分支，它是研究基因遗传变异(如单核苷酸多态性singleneucleotidepolymorphism，SNP)如何影响药物在人体内的吸收、代谢、疗效及不良反应发生，从而指导合理用药的一门学科。已有证据表明它是研究高效、靶向药物的重要途径，通过它为患者或者特定患者寻找最合适的药物。药物基因组学强调用药个体化，它的出现对于实现个体化用药具有重要的理论意义和广阔的应用前景。近年来，多篇有关药物基因组学的研究已经在国际权威杂志上发表的，表明药物基因组学的研究成果能够迅速应用到临床治疗中，尤其是在肿瘤药物研发和应用中。虽然目前仍缺乏指导SLE个体化治疗行之有效的方法，但随着药物基因组学的不断发展，我们有理由相信，在不久的将来，能指导SLE治疗临床实践而又实用的个体化治疗基因芯片检测盒将进入实用阶段。到那时，临床医师就能够依据个体化基因芯片检测盒结果，对SLE患者进行最优化的治疗。这对SLE个体化治疗来说是一个很远大的前景，具有极其积极而深远的意义。基因调控途径是GC发挥效应的主要作用机制，GC与细胞浆内的GR相结合，形成GC-GR复合物，随后转入细胞核，从而通过直接和间接基因调控机制发挥效应。热休克蛋白是一类高度保守蛋白质，广泛存在于微生物和动植物体内，对维持生命正常体征具有重要意义。它们作为许多结构和功能蛋白质的“分子伴侣”蛋白，能够促进新生多肽链的正确折叠、运转和组装，以及变性蛋白质的修复和清除；同时它们在基因转录、细胞生长发育、代谢分化、维持组织细胞的稳定以及环境适应性方面也起着重要的作用。热休克蛋白90(heatshockprotein90，HSP90)是热休克蛋白家族中重要一员，它是GC-GR效应中的重要“分子伴侣”蛋白，大量证据显示它在决定GR与GC结合力上发挥着重要作用，其结构和功能的任何变化都会影响GC正常发挥其生物学效应。大量证据表明HSP90的异常表达在SLE的发生发展中具有重要作用，而且HSP90在GC-GR信号通路中发挥着重要作用，其表达异常也可影响GC的疗效。HSP90表达受基因调控，HSP90B1基因变异可能是GC治疗SLE疗效和不良反应存在个体化差异的重要原因之一，到目前为止，多个HSP90B1基因多态性位点已被发现。当前本领域缺乏基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测GC治疗SLE疗效的方法和试剂盒。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗SLE疗效的用途和试剂盒，为实现SLE患者的个体化治疗提供新的思路和方法。本专利技术技术方案是通过以下实现的：一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的用途，所述的HSP90B1基因多态性位点为rs12426382和/或rs10778306。优选地，所述的糖皮质激素包括泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、强的松、强的松龙、氢化可的松、可的松、曲安西龙、地塞米松、倍他米松、甲强龙、甲基泼尼松中的至少一种。一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的试剂盒，包含有下述试剂成分：(1)检测HSP90B1基因多态性位点基因型的引物；(2)PCR扩增酶及相应缓冲液；(3)PCR产物纯化酶；(4)dNTP；(5)单碱基延伸反应酶及相应缓冲液；(6)单碱基延伸产物纯化酶。优选地，所述的检测HSP90B1基因多态性位点基因型的引物包括扩增多态性位点的引物和单碱基延伸多态性位点的引物，所述的扩增rs12426382多态性位点的引物：5’-TTGGTTTCCAGAACACACCATTTTT-3’5’-TTTCATGTTTTACGGGTTTTGTGGT-3’。优选地，所述的扩增rs10778306多态性位点的引物：5’-TGTTGAAGAGTTTGCCCGTGTT-3’5’-TGCTCCACAGTGAGGACTTCAAAA-3’。优选地，所述的单碱基延伸rs12426382多态性位点的引物：5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATGGCTGTTTAAACACAATTGGTTTC-3’。优选地，所述的单碱基延伸rs10778306多态性位点的引物：5’-TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAAAATGGGATTTCTGTCAGTTGAACA-3’。本专利技术还提供了一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗SLE疗效的方法，具体步骤包括：第一步、DNA提取；第二步、PCR扩增反应；第三步、PCR产物纯化；第四步、单碱基延伸反应；第五步、延伸产物纯化；第六步、对HSP90B1基因多态性位点进行分型；第七步、预测糖皮质激素治疗SLE疗效。所述PCR扩增反应包含rs12426382和rs10778306两对扩增多态性位点的引物。所述单碱基延伸反应包含rs12426382和rs10778306两条单碱基延伸多态性位点的引物。所述的HSP90B1基因多态性位点分型包含rs12426382和rs107本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的用途，其特征在于：所述的HSP90B1基因多态性位点为rs12426382和/或rs10778306。

【技术特征摘要】
1.一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的用途，其特征在于：所述的HSP90B1基因多态性位点为rs12426382和/或rs10778306。2.根据权利要求1所述的一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的用途，其特征在于：所述的糖皮质激素包括泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、强的松、强的松龙、氢化可的松、可的松、曲安西龙、地塞米松、倍他米松、甲强龙、甲基泼尼松中的至少一种。3.一种权利要求1或2所述的基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的试剂盒，其特征在于，包含有下述试剂成分：(1)检测HSP90B1基因多态性位点基因型的引物；(2)PCR扩增酶及相应缓冲液；(3)PCR产物纯化酶；(4)dNTP；(5)单碱基延伸反应酶及相应缓冲液；(6)单碱基延伸产物纯化酶。4.根据权利要求3所述的一种基于HSP90B1基因多态性位点基因型预测糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮疗效的试剂盒，其特征在于，所述的检测HSP90B1基因多态性位点基因型的引物包括扩增多态性位点的引物和单碱基延伸多态性位点的引物，所述的扩增rs12426382多态性位点的引物：5’-TTGGTTTCCAGAACAC...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹延峰，叶冬青，徐建华，孙秀秀，谷园园，李苏苏，
申请(专利权)人：安徽医科大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34