高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1及提取方法技术

本发明专利技术公开了一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1及提取方法，属于生物技术领域。发明专利技术内容具体包括：利用含PEG8000的SDS提取缓冲液裂解植物细胞，使染色体离析，蛋白质变性，释放出核酸，在加入乙酸钾去除大部分蛋白质和多糖后，采用PEG8000/高盐溶液和乙醇/高盐溶液连续两次沉淀DNA，以去除多糖类、多酚类等杂质，得到大量高纯度的DNA。采用本方法可从多种植物的幼叶或成熟叶片中提取出大量高纯度的基因组DNA，对操作者无毒，环境污染小，成本低，时间短，可广泛应用于植物的DNA提取。

Highly effective extraction of GNR.1 from plant genomic DNA and extraction method

The invention discloses a non-toxic extract combination GNR.1 for efficiently extracting plant genomic DNA and an extraction method thereof, belonging to the field of biotechnology. The invention includes: using the SDS extracting buffer containing PEG8000 to lyse plant cells, making chromosome segregation, protein denaturation, and releasing nucleic acid, adding potassium acetate to remove most of the protein and polysaccharide, using PEG8000 / high salt solution and ethanol / high salt solution to precipitate DNA twice in succession to remove polysaccharides and polyphenols. A large number of high purity DNA can be obtained. A large amount of genomic DNA with high purity can be extracted from the young or mature leaves of many plants by this method, which is nontoxic to operators, less environmental pollution, low cost and short time. It can be widely used in plant DNA extraction.

【技术实现步骤摘要】
高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1及提取方法
本专利技术属于生物
，涉及植物DNA的提取方法，具体涉及一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1及提取方法。
技术介绍
分离出符合研究目标和要求的DNA是开展现代分子生物学研究的第一步。与动物相比，植物细胞除有细胞壁外，不仅含有多糖、多酚等多种不易与DNA分离的次生代谢物，而且用于DNA提取的组织(如叶片)的成熟度也常常难以控制，因此，植物DNA提取的成功率低，难度较大。依据提取缓冲液中选用的表面活性剂和最后纯化、回收DNA方法的不同，从植物组织中分离DNA的方法通常有4种(见表1)，即：常规CTAB法、常规SDS法、SDS吸附法和CTAB吸附法。通常，采用前两种方法可从几乎所有植物较为幼嫩的叶片中提取到满足实验要求的足量DNA且费用低廉。其中，常规CTAB法在细胞膜裂解和除多糖方面的表现要优于常规SDS法，因而其适用性更加广泛，使用频率也最高。但这两种方法也存在不足，一是提取时间长，二是在绝大多数情况下要使用剧毒的氯仿/苯酚进行抽提。各种试剂盒多采用后两种方法，但费用远高于前两种方法。相比较而言，SD本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1，其特征在于，组成如下：GNR.1A：2.2‑3.3％PEG8000，0.54M NaCl，0.11M Tris‑HCl，0.054M EDTA，0.11‑0.33％Vc临用前加入，余量为双蒸水；GNR.1D：18‑20％PEG8000，3.5‑3.8M NaCl，余量为双蒸水；GNR.1E：20mM Tris‑HCl，2mM EDTA，2.5M NaCl，余量为双蒸水；还包括：20％SDS，使用时单独加入；5M乙酸钾溶液，使用时单独加入。

【技术特征摘要】
2018.05.31 CN 20181054887151.一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1，其特征在于，组成如下：GNR.1A：2.2-3.3％PEG8000，0.54MNaCl，0.11MTris-HCl，0.054MEDTA，0.11-0.33％Vc临用前加入，余量为双蒸水；GNR.1D：18-20％PEG8000，3.5-3.8MNaCl，余量为双蒸水；GNR.1E：20mMTris-HCl，2mMEDTA，2.5MNaCl，余量为双蒸水；还包括：20％SDS，使用时单独加入；5M乙酸钾溶液，使用时单独加入。2.如权利要求1所述的一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1，其特征在于：所述Tris-HCl的pH为8.0。3.如权利要求1所述的一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GNR.1，其特征在于：所述EDTA的pH为8.0。4.权利要求1或2或3所述的无毒提取液组合GNR.1应用于提取植物基因组DNA的用途。5.一种基于权利要求1或2或3所述的无毒提取液组合GNR.1提取植物基因组DNA的方法，其特征在于：利用溶液GNR.1A与SDS抽提缓冲液在65℃条件下裂解植物细胞，使染色体离析，蛋白质变性，释放出核酸；之后向上述体系中加入乙酸钾去除大部分蛋白质和多糖后，采用溶液GNR.1D和乙醇/溶液GNR.1E连续两次沉淀DNA，以去除多糖类、多酚类等杂质，得到高纯度的DNA。6.如权利要求4所述的提取植物基因组DNA的方法，其特征在于，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：桂枝，高建明，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津,12