一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体是一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌1.5‑3.5份、枯草芽孢杆菌5.6‑7.8份、短小芽孢杆菌4.1‑6.3份、洋葱伯克霍尔德氏菌2.5‑5.7份及蒸馏水15.0‑20.0份。本发明专利技术还涉及一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(2)室温下，然后依次按配比添加地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及洋葱伯克霍尔德氏菌，震荡均匀，即可。通过本发明专利技术的促生制剂，银杏叶中总黄酮含量由原来的0.85％提升到0.98％左右，极大地提高了经济价值和药用价值。

A growth promoting preparation for improving the content of total flavonoids in Ginkgo Leaves

The invention relates to the field of biotechnology, in particular to a growth-promoting preparation for increasing the content of total flavonoids in Ginkgo biloba leaves, which is composed of the following weight components: Bacillus licheniformis 1.5_3.5, Bacillus subtilis 5.6_7.8, Bacillus pumilus 4.1_6.3, Burkholderia cepacia 2.5_5.7 and distilled water 15.0_20.0. Copy. The invention also relates to a method for preparing a growth-promoting preparation for increasing the content of total flavonoids in Ginkgo biloba leaves, which comprises the following steps: (1) adding distilled water to the container according to the proportion and sealing it at room temperature for a period of time; (2) adding Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus and onion in turn according to the proportion at room temperature. Burke Holder's bacteria, shock evenly, then. The content of total flavonoids in Ginkgo biloba leaves is increased from 0.85% to 0.98% by the growth promoting agent of the invention, which greatly improves the economic value and medicinal value.

【技术实现步骤摘要】
一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂
本专利技术涉及生物
，具体是一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂。本专利技术还涉及一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂的制备方法及应用。
技术介绍
银杏黄酮即银杏叶提取物，它能够增加脑血管血液流量，改善脑血管血液循环功能，保护脑细胞，扩张冠状动脉，预防心绞痛及心肌梗塞，预防血栓形成，提高机体免疫能力，对冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压病人均十分有益，具有很高的药用价值。因此，如何提升银杏叶中总黄酮含量是我们急需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供了一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂。为解决以上技术问题，本专利技术现提出以下技术方案：一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌1.5-3.5份、枯草芽孢杆菌5.6-7.8份、短小芽孢杆菌4.1-6.3份、洋葱伯克霍尔德氏菌2.5-5.7份及蒸馏水15.0-20.0份。进一步的，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌2.5份、枯草芽孢杆菌6.6份、短小芽孢杆菌5.2份、洋葱伯克霍尔德氏菌4.1份及蒸馏水18份。进一步的，所述地衣芽孢杆菌菌落边缘不整齐，表面粗糙，呈乳白色；菌体短杆状，呈堆排列，芽孢中生。该菌用来分离甘草黄酮素，所述地衣芽孢杆菌的制备方法为：8％接种所述地衣芽孢杆菌于液体培养基中，边加边搅拌，添加结束后，控制一定的搅拌转速，好氧培养，保持一定温度，发酵过程pH值不低于6.5。进一步的，所述液体培养基成分为：淀粉0.5重量％，尿素0.5重量％，豆粕粉1重量％，磷酸氢二钾0.6重量％，磷酸二氢钾0.3重量％，酵母膏0.05重量％，硫酸镁0.1重量％，硫酸锰0.02重量％。进一步的，所述枯草芽孢杆菌菌落边缘整齐，表面光滑，隆起，呈乳白色，菌体短杆状，呈堆排列，中生芽孢。用于分离甘草黄酮素及类似代谢物，所述枯草芽孢杆菌的制备方法为：包括以下步骤：(1))将枯草芽孢杆菌菌种接种于斜面培养基上，进行斜面培养；(2)斜面培养后的枯草芽孢杆菌接种于种子培养基上，进行种子培养；(3)将经种子培养的种子液接种于发酵培养基上，进行发酵培养，从发酵开始到5～6小时不控制pH值，在5～6小时到8小时之间pH值控制在6.0-6.5之间，8小时后pH控制在7.0-7.5之间至发酵结束，得到枯草芽孢杆菌产品，枯草芽孢杆菌产品中活菌数200-400cfu/ml，芽孢形成率87～92％。进一步的，所述的斜面培养基包括以下组分：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，葡萄糖5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L。进一步的，所述短小芽孢杆菌菌落边缘波状，表面光滑，中凹台状，呈乳白色，半透明；菌体细杆状，栅栏式排列。该菌用来分离甘草黄酮素，所述短小芽孢杆菌的制备方法为：包括以下步骤：(1)菌种活化，短小芽孢杆菌保存菌划线于平板培养基上，37℃培养24h；(2)菌种发酵培养，将活化后的菌种转接入10ml种子发酵培养基中，37℃培养48h；(3)将发酵培养好的菌种接种于1000ml三角瓶，37℃培养48h；(4)将在三角瓶培养好的菌种接种于10L种子发酵罐，37℃培养44h，转速为150r/min，通气量为0.4vvm。进一步的，所述步骤(1)中平板培养基是由5g蛋白胨，1g酵母膏，0.1g磷酸高铁，20g琼脂，适量海水经121℃灭菌30min配置而成，pH7.6。进一步的，所述洋葱伯克霍尔德氏菌菌落边缘整齐，表面光滑，隆起，呈乳白色，菌体短杆状，呈堆排列，中生芽孢。该菌用来分离甘草黄酮素，初次分离得到次级代谢产物。本专利技术的另一目的是还提供了一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(2)室温下，然后依次按配比添加地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及洋葱伯克霍尔德氏菌，震荡均匀，即可。本专利技术的再一目的是促生制剂在提升银杏叶中总黄酮含量中的应用。与现有技术相比较，本专利技术的有益效果在于：1、通过本专利技术的促生制剂，在银杏育苗或栽培的过程中施加到根部或叶片上，促使银杏叶中的总黄酮含量增加银杏叶中总黄酮含量由原来的0.85％提升到0.98％，极大地提高了经济价值和药用价值；2、本专利技术的促生制剂制作方法简单，实用性强。具体实施方式为使对本专利技术的结构特征及所达成的功效有更进一步的了解和认识，用以较佳的实施例详细的说明，具体说明如下：实施例1一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌1.5份、枯草芽孢杆菌5.6份、短小芽孢杆菌4.1份、洋葱伯克霍尔德氏菌2.5份及蒸馏水15.0份。实施例2一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌2.5份、枯草芽孢杆菌6.6份、短小芽孢杆菌5.2份、洋葱伯克霍尔德氏菌4.1份及蒸馏水18份。实施例3一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌3.5份、枯草芽孢杆菌7.8份、短小芽孢杆菌6.3份、洋葱伯克霍尔德氏菌5.7份及蒸馏水20.0份。实施例4一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(2)室温下，然后依次按配比添加地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及洋葱伯克霍尔德氏菌，震荡均匀，即可。实施例5枯草芽孢杆菌的制备方法为：包括以下步骤：(1))将枯草芽孢杆菌菌种接种于斜面培养基上，进行斜面培养；(2)斜面培养后的枯草芽孢杆菌接种于种子培养基上，进行种子培养；(3)将经种子培养的种子液接种于发酵培养基上，进行发酵培养，从发酵开始到6小时不控制pH值，在6小时到8小时之间pH值控制在6.3之间，8小时后pH控制在7.2之间至发酵结束，得到枯草芽孢杆菌产品，枯草芽孢杆菌产品中活菌数300cfu/ml，芽孢形成率90％。进一步的，本实施例中，斜面培养基包括以下组分：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，葡萄糖5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L。实施例6短小芽孢杆菌的制备方法为：包括以下步骤：(1)菌种活化，短小芽孢杆菌保存菌划线于平板培养基上，37℃培养24h；(2)菌种发酵培养，将活化后的菌种转接入10ml种子发酵培养基中，37℃培养48h；(3)将发酵培养好的菌种接种于1000ml三角瓶，37℃培养48h；(4)将在三角瓶培养好的菌种接种于10L种子发酵罐，37℃培养44h，转速为150r/min，通气量为0.4vvm。进一步的，本实施例中，平板培养基是由5g蛋白胨，1g酵母膏，0.1g磷酸高铁，20g琼脂，适量海水经121℃灭菌30min配置而成，pH7.6。试验例通过试验例可以看出，本专利技术的促生制剂的每种成分均对总黄酮含量有促进作用，但是组合在一起组成本专利技术的促进制剂后效果更好，而且可以得出实施例2的各成分的配比促进作用最好，总黄酮含量可以达到0.98％。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本专利技术的技术方案，而非用以对其限制；尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，本领域的技术人员应当理解，其依然可以对前述实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌1.5‑3.5份、枯草芽孢杆菌5.6‑7.8份、短小芽孢杆菌4.1‑6.3份、洋葱伯克霍尔德氏菌2.5‑5.7份及蒸馏水15.0‑20.0份。

【技术特征摘要】
1.一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌1.5-3.5份、枯草芽孢杆菌5.6-7.8份、短小芽孢杆菌4.1-6.3份、洋葱伯克霍尔德氏菌2.5-5.7份及蒸馏水15.0-20.0份。2.根据权利要求1所述的一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：地衣芽孢杆菌2.5份、枯草芽孢杆菌6.6份、短小芽孢杆菌5.2份、洋葱伯克霍尔德氏菌4.1份及蒸馏水18份。3.根据权利要求1所述的一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌的制备方法为：8％接种所述地衣芽孢杆菌于液体培养基中，边加边搅拌，添加结束后，控制一定的搅拌转速，好氧培养，保持一定温度，发酵过程pH值不低于6.5。4.根据权利要求3所述的一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，所述液体培养基成分为：淀粉0.5重量％，尿素0.5重量％，豆粕粉1重量％，磷酸氢二钾0.6重量％，磷酸二氢钾0.3重量％，酵母膏0.05重量％，硫酸镁0.1重量％，硫酸锰0.02重量％。5.根据权利要求1所述的一种提升银杏叶中总黄酮含量的促生制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的制备方法为：包括以下步骤：(1))将枯草芽孢杆菌菌种接种于斜面培养基上，进行斜面培养；(2)斜面培养后的枯草芽孢杆菌接种于种子培养基上，进行种子培养；(3)将经种子培养的种子液接种于发酵培养基上，进行发酵培养，从发酵开始到5～6小时不控制pH值，在5～6小时到8小时之间pH值控制在6.0-...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁志辉，何福林，张斌，刘小文，张祖姣，赵子豪，蒲兴锚，
申请(专利权)人：湖南科技学院，
类型：发明
国别省市：湖南,43