本发明专利技术的目的在于针对现有技术，提供一种针对大孔树脂用于银杏叶提取性能如何的检测方法，本发明专利技术的目的是为在利用大孔树脂进行银杏叶有效成分提取时给出何种树脂更加好用的参数建议。本发明专利技术方法可以针对所有吸附用大孔树脂进行检测，主要包括树脂的预处理、银杏提取物滤液配制、有效成分的预测定、吸附、后测定、数据整理与对比步骤。
Method for testing performance of macroporous resin for extracting gingko leaf
The aim of the invention is based on the existing technology, provide a kind of macroporous resin for Ginkgo biloba extract for detection performance, the purpose of the invention is as effective components of Ginkgo biloba leaves extract are more easy to use what kind of resin parameters in using macroporous resin. The method of the invention can detect the resin for all adsorption with macroporous resin, including pretreatment, Ginkgo biloba extract filtrate preparation, prediction of effective components, after adsorption, determination, data collation and comparison steps.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及银杏叶有效成分提取领域，具体涉及一种用于银杏叶提取的大孔树脂性能检测方法。
技术介绍
银杏叶复合制剂有许多种类，其特点是都含有一定含量的黄酮类物质，多种黄酮类物质，都对人体有积极作用，银杏黄酮能够提升脑血管的流量，增加脑血管循环使得冠状动脉扩张。银杏黄酮不止具有以上的功能，它对冠心病、心绞痛、脑动脉硬化、老年性痴呆、高血压病人也有一定效益。葛根所含的黄酮多为异黄酮，其含量甚至高达10%之多。而异黄酮也是非常具有药用价值的一种物质，它能够补充女性雌激素，对于女性的发育或孕育前后阶段都有较好的作用。银杏叶中的萜内酯类化合物根据温普红的说法来的，这类物质是独有的化合物，它能够抑制血小板活化因子受体。另外白果内酯还具有抗神经末梢衰老的作用。银杏中酚酸类化合物含量较多，有多种银杏酸（白果酸），这些物质大部分在银杏果实中含量较多。早期银杏酸还被称为漆酚酸。银杏酸摄入过多会产生不良反应，例如：面色潮红、汗出，口唇麻木、头晕等，在本专利技术中主要通过调节了pH值的大孔树脂吸附以去除银杏酸类物质。银杏叶中含有多种成分，目前确定的有效成分就有多达十几种，如聚异戊烯、6-羟基犬尿喹啉酸、莽草酸、亚麻酸、α-己烯醛、β-谷甾醇、芝麻素及原花色素类等。此外还含有蜡质（0.7%-1.0%）、多种微量元素和氨基酸。银杏叶中黄酮类成分的提取主要采用有机溶剂浸提法，而有机溶剂浸提法又可分为一般的有机溶剂浸提法、醇(酮)提-铅化物沉淀法、醇(酮)提-铅化物沉淀法和醇(酮)浸提-酮/铵盐萃取法四种方法。这些不同的浸提方法从银杏叶中提取出了黄酮类成分，效果显著。本篇论文我们着重介绍一般的有机溶剂浸提法的实验条件。其最佳实验提取条件为：银杏叶干燥后粉碎至50-60目,以70%乙醇按照液固比6∶1的比例,于80℃条件下提取2次,1h/次,银杏叶总黄酮提取率可达87.6%。众所周知银杏酸会对人体产生不良反应，引发肌肉抽搐，瞳孔放大。孕妇与儿童更要谨慎。本实验是要制备银杏叶复合制剂，避免此不良反应，首先必须去除银杏叶中银杏酸成分。但是由于目前分离银杏酸的方法有很多，也各有利弊，例如铅盐沉淀法有效成分的损失较大且含有铅残留，硅胶柱法的损失同样很大，液液萃取法得率低等因素，本实验选择采用大孔树脂吸附法来进行分离。大孔树脂能够快速有效的除去银杏酸中所残留的杂质且大孔树脂具有优良的物理化学稳定性，比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和，在除去杂质的同时又不会损耗过多有效物质。通过实验发现，大孔树脂同样适用于葛根中不良酸性物质的除去，由此产生了本专利技术的部分技术方案。但是在现有技术中，实际选用大孔树脂，必须满足对银杏酸去除吸附效果好，以及对银杏黄酮吸附少，留存量多的双重条件，才能作为一种好的吸附用大孔树脂以应用。现有技术中应用某种大孔树脂，往往是经验性的，或者是随机选取一种，经过一些经验实验，认为大致可用，如此而已，对于何种大孔树脂适合于银杏叶有效成分的提取，某种具体大孔树脂提取性能如何，没有一种确实的检验方法，这是现有技术的缺陷。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术，提供一种针对大孔树脂用于银杏叶提取性能如何的检测方法，本专利技术的另一个目的是为在利用大孔树脂进行银杏叶有效成分提取时给出何种树脂更加好用的参数建议。本专利技术方法可以针对所有吸附用大孔树脂进行检测，如大孔弱酸性阳离子交换树脂、D301R大孔弱碱性阴离子交换树脂、D201大孔强碱性阴离子交换树脂、D296大孔强碱性阴离子交换树脂、D401大孔螯合性树脂、以及X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NKA-9、NK-9、D3520、D101、D101-1、WLD、DA201、DM301、DM130、H103、HPD类大孔吸附树脂，为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种用于银杏叶提取的大孔树脂性能检测方法，其特征在于，由以下步骤组成：1）树脂的预处理：选取某种大孔树脂，使用蒸馏水将树脂中的杂质和破碎树脂洗去，然后用95%乙醇浸泡20-28h后洗涤至洗涤液加水稀释不浑浊，水洗至无醇味，然后用5%HCl溶液浸泡5h后水洗至中性，再用2%NaOH溶液浸泡5h后水洗至中性，用蒸馏水浸泡，作为已处理好的树脂备用；取含固态物0.5-1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱；2）银杏提取物滤液的配制：取烘干好的1重量份银杏叶放入粉碎研磨机中研磨1-5min后以1：10的比例加入70%乙醇10重量份，搅拌均匀并70℃水浴加热5-8h；将水浴加热好的银杏叶乙醇液进行抽滤，取滤液，调整生药材质量/溶液体积在1-5g/ml之间，作为提取好的滤液备用；3）银杏有效成分的预测定：取步骤2的所得滤液100ml，于500ml容量瓶中摇匀，定容至500ml，静置15-30min；从500ml容量瓶中取样，加取样等体积的0.1mol/l的三氯化铝，经水浴加热10min，于400-410nm处测定吸光度值A；从500ml容量瓶中取样，于242nm或310nm处测定吸光度值B；4）吸附：取含固态物0.5-1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱；将步骤2的所得滤液100ml装入柱中，让其自然流下，收集洗脱液；将洗脱液装入蒸馏烧瓶中用旋转蒸发仪把其中的乙醇回收并提纯洗脱液，在旋转蒸发过程中用抽滤机保持压强差，取得旋蒸后的银杏液；5）银杏有效成分的后测定：将旋蒸后的银杏液倒入500ml容量瓶，摇匀，定容至500ml，静置15-30min；从500ml容量瓶中取样，加取样等体积的0.1mol/l的三氯化铝，经水浴加热10min，于400-410nm处测定吸光度值C；需要说明的是，对银杏黄酮的紫外吸光度测定，依据处理方法不同，测定的波长位置，峰强度等都有不同。本专利技术这里采用的是使得黄酮类物质吸光度出峰位置较为固定的三氯化铝法，这样操作后黄酮类物质的紫外吸光度峰基本上在400-410nm范围内出现强峰，便于识别和测量；从500ml容量瓶中取样，于242nm或310nm处测定吸光度值D；检测条件可以是：流动相组成为甲醇3%、HAc溶液（92:8，V/V）；色谱柱：InertsilODS-2（250mm*4.6mm，5um），紫外检测波长242nm或310nm，流速1.0ml/min，柱温40摄氏度；一般而言，银杏酸的紫外吸收光谱有3个比较容易用于测定的特征峰，最大吸收波长分别为220、242和310nm。其中242和310nm的峰最为显著。在实际操作中，由于本专利技术的方法是要在与黄酮类物质共存的情况下测定，在实际操作中可以某些位置要受到其他物质吸收峰的影响，要根据实际情况选择合适的吸收峰；需要指出的是，银杏酸并非一种，但是含量最多的五种银杏酸均是水杨酸的衍生物，均是水杨酸连接一烷基而成，不同之处只在于碳链数和双键数，这是其为何不是同种物质，紫外吸光度峰位置却基本相同的原因，摩尔吸光系数非常接近；6）数据整理与对比：根据该单次吸光度比值C/A以及吸光度比值B/D的数值情况，初步判断该大孔树脂吸附过程中银杏黄酮留存的情况以及银杏酸去除的情况；用与步骤（1）同种的大孔树脂制取20-100份吸附用树脂样品，重复步骤（1）至（5）本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于银杏叶提取的大孔树脂性能检测方法，其特征在于，由以下步骤组成： 1）树脂的预处理： 选取某种大孔树脂，使用蒸馏水将树脂中的杂质和破碎树脂洗去，然后用95%乙醇浸泡20‑28h后洗涤至洗涤液加水稀释不浑浊，水洗至无醇味，然后用5%HCl溶液浸泡5h后水洗至中性，再用2%NaOH溶液浸泡5h后水洗至中性，用蒸馏水浸泡，作为已处理好的树脂备用； 取含固态物0.5‑1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱； 2）银杏提取物滤液的配制： 取烘干好的1重量份银杏叶放入粉碎研磨机中研磨1‑5min后以1：10的比例加入70%乙醇10重量份，搅拌均匀并70℃水浴加热5‑8h；将水浴加热好的银杏叶乙醇液进行抽滤，取滤液，调整生药材质量/溶液体积在1‑5g/ml之间，作为提取好的滤液备用； 3）银杏有效成分的预测定： 取步骤2的所得滤液100ml，于500ml容量瓶中摇匀，定容至500ml，静置15‑30min； 从500ml容量瓶中取样，加取样等体积的0.1mol/l的三氯化铝，经水浴加热10min，于400‑410nm处测定吸光度值A； 从500 ml容量瓶中取样，于242nm或310nm处测定吸光度值B； 4）吸附： 取含固态物0.5‑1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱；将步骤2的所得滤液100ml装入柱中，让其自然流下，收集洗脱液； 将洗脱液装入蒸馏烧瓶中用旋转蒸发仪把其中的乙醇回收并提纯洗脱液，在旋转蒸发过程中用抽滤机保持压强差，取得旋蒸后的银杏液；5）银杏有效成分的后测定： 将旋蒸后的银杏液倒入500ml容量瓶，摇匀，定容至500ml，静置15‑30min； 从500ml容量瓶中取样，加取样等体积的0.1mol/l的三氯化铝，经水浴加热10min，于400‑410nm处测定吸光度值C； 从500 ml容量瓶中取样，于242nm或310nm处测定吸光度值D；6）数据整理与对比： 根据该单次吸光度比值C/A以及吸光度比值B/D的数值情况，初步判断该大孔树脂吸附过程中银杏黄酮留存的情况以及银杏酸去除的情况； 用与步骤（1）同种的大孔树脂制取20‑100份吸附用树脂样品，重复步骤（1）至（5），获取吸光度比值C/A以及吸光度比值B/D的数值情况的20‑100份数值，在去掉个别差异较大数值的情况下，求取其平均值； 将该单次吸光度比值C/A以及吸光度比值B/D的数值情况，以及前述平均值输入计算机程序，与实验或生成所需的银杏黄酮留存比率条件以及银杏酸去除比率条件相比较，自动生成检测报告。...
【技术特征摘要】
1.一种用于银杏叶提取的大孔树脂性能检测方法，其特征在于，由以下步骤组成：1）树脂的预处理：选取某种大孔树脂，使用蒸馏水将树脂中的杂质和破碎树脂洗去，然后用95%乙醇浸泡20-28h后洗涤至洗涤液加水稀释不浑浊，水洗至无醇味，然后用5%HCl溶液浸泡5h后水洗至中性，再用2%NaOH溶液浸泡5h后水洗至中性，用蒸馏水浸泡，作为已处理好的树脂备用；取含固态物0.5-1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱；2）银杏提取物滤液的配制：取烘干好的1重量份银杏叶放入粉碎研磨机中研磨1-5min后以1：10的比例加入70%乙醇10重量份，搅拌均匀并70℃水浴加热5-8h；将水浴加热好的银杏叶乙醇液进行抽滤，取滤液，调整生药材质量/溶液体积在1-5g/ml之间，作为提取好的滤液备用；3）银杏有效成分的预测定：取步骤2的所得滤液100ml，于500ml容量瓶中摇匀，定容至500ml，静置15-30min；从500ml容量瓶中取样，加取样等体积的0.1mol/l的三氯化铝，经水浴加热10min，于400-410nm处测定吸光度值A；从500ml容量瓶中取样，于242nm或310nm处测定吸光度值B；4）吸附：取含固态物0.5-1.5重量份的已处理好的树脂，抽滤并晾干其表面水分，在80℃干燥至恒重装柱；将步骤2的所得滤液100ml装入柱中，让其自然流下，收集洗脱液；将洗脱液装入蒸馏烧瓶中用旋转蒸发仪把其中的乙醇回收并提纯洗脱液，在旋转蒸发过程中用抽滤机保持压强差，取得旋蒸后的银杏液；5）银杏有效成分的后测定：将旋蒸后的银杏液倒入500ml容量瓶，摇匀，定容至500ml，静置15-30min；从500ml容量瓶中取样...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄霄，张奎华，孙艳侠，孙晴，
申请(专利权)人：临沂大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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