一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法技术

为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题，本发明专利技术提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，包括如下步骤：步骤S1，收集重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对细胞裂解液进行澄清获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对病毒样颗粒初提液进行离子交换层析获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。

* a method for isolation and purification of porcine circovirus type 2 virus like particles

【技术实现步骤摘要】
一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法
本专利技术属于生物
，涉及病毒样颗粒的分离纯化方法，具体涉及一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法。
技术介绍
猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2,PCV2)是属于圆环病毒科(Circoviridae)、圆环病毒属(Circovirus)的DNA病毒，其核酸分子为单股、首尾闭合的环状结构，无囊膜。PCV2本身不致死猪，但可造成免疫抑制。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原，当与其它病原混合感染时，可加重病猪的死亡，给养殖业带来巨大的损失。PCV2已成为危害养猪业的主要疫病之一，在猪群中感染率较高，疫苗是防控PCV2的有效工具，免疫接种可以减少PCV2对免疫猪的危害程度及其组织病毒载量，也为猪场进行PCV2的净化提供了基础条件。目前市场上的PCV2商品化疫苗主要有全病毒灭活苗和亚单位疫苗两种：全病毒灭活苗方面，由于病毒自身特点和生产工艺的弊端，经常出现病毒滴度难以提高等技术问题，且其有效抗原纯度较低，免疫接种后经常出现不同程度的不良反应。猪圆环病毒亚单位疫苗主要是使用真核或原核表达系统高本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，用于从重组酵母细胞裂解液中分离纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，收集表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒的重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对所述细胞裂解液进行澄清，获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对所述病毒样颗粒初提液进行离子交换层析，获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对所述病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩3～5倍，获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对所述病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的所述离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液...

【技术特征摘要】
1.一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，用于从重组酵母细胞裂解液中分离纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，收集表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒的重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对所述细胞裂解液进行澄清，获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对所述病毒样颗粒初提液进行离子交换层析，获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对所述病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩3～5倍，获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对所述病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的所述离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，其特征在于：其中，步骤S3中，所述吸附过程所采用的缓冲液为含50～150mMNaCl、0.01％Tween80的50mM磷酸盐缓冲液，所述洗脱过程中所采用的缓冲液为含1MNaCl、0.01％Tween80的50mM磷酸盐缓冲液。3.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，其特征在于：其中，步骤S1中，所述破碎采用机械碾磨破碎、超声波破碎或高压均质破碎中的任意一种或多种联用。4.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕红，周峻岗，段进坤，杨德强，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31