The invention relates to a method for differentiation of pluripotent stem cells. Specifically, the present invention relates to methods and compositions for differentiating pluripotent stem cells into cells expressing characteristic markers of stereotyped endodermal lineages. The present invention also provides a method for producing and purifying reagents that enable pluripotent stem cells to differentiate into cells expressing characteristic markers of stereotyped endodermal lineages.
【技术实现步骤摘要】
多能干细胞的分化本申请是与母案专利技术名称相同的分案申请,其母案的中国申请号是200980134985.4,国际申请号号是PCT/US2009/049049,申请日是2009年6月29日。本专利技术要求于2008年6月30日提交的申请系列号61/076,889的优先权。
本专利技术涉及使多能干细胞分化的方法。具体来讲,本专利技术涉及使多能干细胞分化成表达定形内胚层谱系特征性标志物的细胞的方法和组合物。本专利技术还提供了产生和纯化能使多能干细胞分化成表达定形内胚层谱系特征性标志物的细胞的试剂的方法。
技术介绍
用于I型糖尿病的细胞替代疗法的进展以及可移植胰岛的缺乏已使得注意力集中在开发适于移植物移入的胰岛素生成细胞或β细胞的来源上。一种方法是从多能干细胞,例如胚胎干细胞产生功能性β细胞。在脊椎动物的胚胎发育中,多能干细胞可在称为原肠胚形成的过程中产生包括三个胚层(外胚层、中胚层和内胚层)的细胞群体。诸如甲状腺、胸腺、胰腺、肠和肝脏之类的组织将从内胚层,经由中间阶段发育而来。该过程中的中间阶段是形成定形内胚层。定形内胚层细胞表达多种标志物,例如,HNF-3β、GATA4、MIXL1、CXCR4和SOX17。定形内胚层分化成胰腺内胚层导致形成胰腺。胰腺内胚层细胞表达胰-十二指肠同源盒基因Pdx1。在不存在Pdx1时,胰腺形成腹胰芽和背胰芽后不再发育。因而,Pdx1表达标志着胰腺器官发生中的一个关键步骤。除了其他细胞类型,成熟的胰腺还包括外分泌组织和内分泌组织。外分泌和内分泌组织来自胰腺内胚层的分化。据报道,从小鼠的胚胎细胞衍生了带有胰岛细胞特征的细胞。例如,Lu ...
【技术保护点】
1.分离的肽,其包含具有至少一个点突变的激活素A的氨基酸序列,其中所述肽适用于将多能干细胞分化成表达定形内胚层谱系特征性标志物的细胞的方法中,其中分离的肽包含SEQ ID No:3‑95的氨基酸序列,或其中至少一个点突变是激活素A氨基酸序列中的至少一个选自如下的氨基酸残基:10I、16F、18V、19S、20F、37A、38N、39Y、41E、43E、74F、75A、76N、77L、78K、79S、82V、107N、109I、110V和116S。
【技术特征摘要】
2008.06.30 US 61/0768891.分离的肽,其包含具有至少一个点突变的激活素A的氨基酸序列,其中所述肽适用于将多能干细胞分化成表达定形内胚层谱系特征性标志物的细胞的方法中,其中分离的肽包含SEQIDNo:3-95的氨基酸序列,或其中至少一个点突变是激活素A氨基酸序列中的至少一个选自如下的氨基酸残基:10I、16F、18V、19S、20F、37A、38N、39Y、41E、43E、74F、75A、76N、77L、78K、79S、82V、107N、109I、110V和116S。2.根据权利要求1的分离的肽,其中所述多能干细胞是胚胎干细胞。3.根据权利要求1的分离的肽,其中所述至少一个点突变是激活素A氨基酸序列中的至少一个选自如下的氨基酸残基:10I、16F、18V、19S、20F、37A、38N、39Y、41E、43E、74F、75A、76N、77L、78K、79S、82V、107N、109I、110V和116S。4.权利要求3的分离的肽,其中所述至少一个点突变是缺失、插入或置换。5.权利要求1或3的分离的肽,其中激活素A具有SEQIDNO:2的氨基酸序列。6.权利要求1的分离的肽,其中分离的肽包含SEQI...
【专利技术属性】
技术研发人员:J戴维斯,J刘,G拉胡纳桑,MJ亨特,JR帕迪纳斯,JA康诺尔,RV斯万森,E基,
申请(专利权)人:詹森生物科技公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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