具有改良的蛋白质分解安定性的新颖多肽，以及制备与使用该新颖多肽的方法技术

本发明专利技术包括改良多肽的蛋白分解安定性的方法，该方法包含将选自由N‑终端氨基、N‑终端第1个内酰氨键的NH基、多肽内的另一个一级氨基、硫醇基及硫醚基所成群组的至少一者烷基化。本发明专利技术进一步包括并入该些化学修饰的多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有改良的蛋白质分解安定性的新颖多肽，以及制备与使用该新颖多肽的方法相关申请案的交互参考本申请案主张下述2015年10月28日提出申请的美国专利临时申请案号：62/247,493的优先权，其全部内容以参考方式并入本文。
技术介绍
多肽作为治疗剂已吸引许多关注。多肽提供生物活性、对于其生物标靶具有非常高的亲和性与强烈特异性，且可使用重组技术或化学合成以大规模制备。然而，以多肽为主的疗法面临许多重大风险，如不佳的活体内安定性及对的活体内半衰期。多肽为数种活体内的肽酶受质，如二肽基蛋白酶4(DPP4)及内肽酶，内肽酶裂解多肽链为通常显现减弱活性的片段。再者，多肽可于体内经化学修饰、标示其用以排出及/或降解。尝试最小化多肽朝向蛋白水解的不安定性仅获得有限的成功。多肽的N-终端氨基的酰基化具有降低蛋白水解率的通常效果，但于生物活性有加重的损失。再者，N-乙烯基与安定仍相距甚远，于活体内进行水解。对抗如DPP4酵素的安定性可通过置换目标裂解位点的氨基酸达成，但此修饰在多数情况中也造成相伴而来的生物活性损失。肽作为可开发的疗法的缺点，特别是短的血浆半衰期时间，已由靶定的化学修饰解决。举例而言，肽链中非天本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种经化学修饰的多肽、或其盐或其水合物，其中，该多肽具有下述化学修饰的至少一者：(i)选自该多肽的N‑终端氨基、N‑终端第一个内酰氨键的NH、其他游离一级氨基、硫醇基及硫醚基所成群组的至少一者独立地以任选经取代的C1‑C16烷基、任选经取代的C3‑C16环烷基、任选经取代的C3‑C16芳基、任选经取代的C2‑C16烯基或任选经取代的C2‑C16炔基予以衍生；及(ii)选自N‑终端氨基及N‑终端第一个内酰氨键所成群组的至少一者的NH基以X予以衍生，其中各X独立地选自下述所成群组：任选经取代的苯基、任选经取代的苄基、任选经取代的‑(CR2)1‑6‑苯基、→O、‑OH、‑OR、烷氧基、NH2、任...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.28 US 62/247,4931.一种经化学修饰的多肽、或其盐或其水合物，其中，该多肽具有下述化学修饰的至少一者：(i)选自该多肽的N-终端氨基、N-终端第一个内酰氨键的NH、其他游离一级氨基、硫醇基及硫醚基所成群组的至少一者独立地以任选经取代的C1-C16烷基、任选经取代的C3-C16环烷基、任选经取代的C3-C16芳基、任选经取代的C2-C16烯基或任选经取代的C2-C16炔基予以衍生；及(ii)选自N-终端氨基及N-终端第一个内酰氨键所成群组的至少一者的NH基以X予以衍生，其中各X独立地选自下述所成群组：任选经取代的苯基、任选经取代的苄基、任选经取代的-(CR2)1-6-苯基、→O、-OH、-OR、烷氧基、NH2、任选经取代的NH(C1-C16烷基)及任选经取代的N(C1-C16烷基)(C1-C16烷基)，其中R于各次出现时独立地选自氢或任选经取代的C1-C16烷基；其中该经化学修饰的多肽相较于对应的无化学修饰的多肽，具有本质上相同的生物活性及/或对于蛋白酶降解更为阻抗。2.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，该蛋白分解由选自下述所成群组的至少一者催化：酰基肽水解酶、DPP4、DPP2、DPP8、DPP9、纤维母细胞活化蛋白(FAP)、S9B家族寡丙基肽酶及对于DPP4及/或DPP2具有≥50％同源性的蛋白酶。3.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，该未经化学修饰的多肽包含肠促胰液素。4.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，相较于未经化学修饰的多肽，其具有较大的血清安定性。5.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，相较于未经化学修饰的多肽，其具有较长的活体内半衰期。6.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，相较于未经化学修饰的多肽，其具有较大的血脑屏障渗透性或较大的口腔生物可利用性。7.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，(i)中该多肽以至少一未经取代的C1-C6烷基、未经取代的C3-C16环烷基、未经取代的C2-C16烯基、未经取代的芳基或未经取代的C2-C16炔基予以衍生。8.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，(i)中该多肽的N-终端氨基、其他游离氨基及/或硫醇基的一者或多者，独立地为以独立地选自下述所成群组的第一取代基及第二取代基予以衍生：任选经取代的C1-C16烷基、任选经取代的C3-C16环烷基、任选经取代的C2-C16烯基及任选经取代的C2-C16炔基，其中该第一取代基及该第二取代基独立地为相同或不相同。9.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，(i)中该N-终端氨基以独立地选自下述所成群组的第一取代基及第二取代基予以衍生：任选经取代的C1-C16烷基、任选经取代的C3-C16环烷基、任选经取代的C2-C16烯基及任选经取代的C2-C16炔基，其中该第一取代基及该第二取代基独立地为相同或不相同。10.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，(i)中该烷基、环烷基、烯基或炔基独立地以独立地选自下述所成群组的至少一者予以取代：C1-C16烷基、C3-C16环烷基、C2-C16烯基、C2-C16炔基、杂芳基、杂环基、C1-C6烷氧基、叠氮基、二氮杂环丙烯基、-CHO、1，3-二氧杂环戊烯-2-基、卤基、卤烷基、卤烷氧基、氰基、硝基、三氟甲磺酰基、甲磺酰基、对甲苯磺酰基、杂环基、芳基、杂芳基、-SR、-S(＝O)(C1-C6烷基)、-S(＝O)2(C1-C6烷基)、-S(＝O)2NRR、-C(＝O)R、-OC(＝O)R、-C(＝O)OR、-OC(＝O)O(C1-C6烷基)、-NRR、-C(＝O)NRR、-N(R)C(＝O)R、-C(＝NR)NRR、及-P(＝O)(OR)2，其中R的各次出现独立地为H或C1-C16烷基。11.如权利要求10所述的经化学修饰的多肽，其中，该烷基为经卤化的C1-C16烷基。12.如权利要求11所述的经化学修饰的多肽，其中，该烷基为2，2，2，-三氟乙基。13.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，该至少一烷基、环烷基、烯基、芳基或炔基选自下述所成群组：其中，n为范围1至6的整数，以及R为氢或任选经取代的烷基或芳基。14.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，至少一烷基、环烷基、烯基或炔基选自下述所成群组：2，2，2-三氟-1-乙基、2，2，3，3，3-五氟-1-丙基、2，2，3，3，4，4，4-七氟-1-丁基、乙基、异丙基、苄基、经取代苄基、金刚烷-1-基-甲基、喹啉-4-基-甲基、2-氨基-1-丙基、4-苯基-苄基、1H-咪唑-4-基-甲基、4-羟基-苄基、4-[3-(三氟甲基)-3H-二氮杂环丙烯]-苄基、及(8R，9R，13S，14R)-3，17-二基-13-甲基-7，8，9，11，12，13，14，15，16，17-十氢-6H-环戊并[a]菲-17-基-乙炔基-甲基。15.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，该多肽经以占有体积等于或小于约的基团化学修饰。16.如权利要求15所述的经化学修饰的多肽，其中，该多肽于N-终端氨基经以占有体积等于或小于约的基团化学修饰。17.如权利要求1的经化学修饰的多肽，其中，该多肽包含约3至约100个氨基酸。18.如权利要求1的经化学修饰的多肽，其中，该多肽包含约3至约49个氨基酸。19.如权利要求1的经化学修饰的多肽，其中，该多肽包含约80至约100个氨基酸。20.如权利要求1的经化学修饰的多肽，其中，至少该N-终端氨基以任选经取代的C1-C16烷基、任选经取代的C3-C16环烷基、任选经取代的C2-C16烯基或任选经取代的C2-C16炔基予以衍生。21.如权利要求1的经化学修饰的多肽，其包含选自下述所成群组的至少一氨基酸残基：。22.如权利要求1所述的经化学修饰的多肽，其中，该多肽选自下述所成群组：GLP-1(H*AEGTFTS*DVS*S*YLEGQAAK*EFIAWLVK*GR)；艾塞那肽(H*GEGT*FT*S*DLS*KQM*EEEAVRLFIEWLK*NGGPS*S*GAPPPS*-NH2)；利拉鲁肽(H*AEGT*FT*S*DVS*S*Y*LEGQAA-(N6-棕榈酰基麸氨酰基)K*EFIAWLVRGRG)；司马鲁肽(H*AibEGT*FT*S*DVS*S*Y*LEGQAA-(X)K*EFIAWLVRGRG)，其中X附接于离氨酸的ε-氨基：他司鲁肽(H*AibEGT*FT*S*DVS*S*YLEGQAAK*EFIAWLVK*AibR-NH2)；利西拉肽(H*GEGT*FT*S*DLS*K*QM*EEEAVRLFIEWLK*NGGPS*S*GAPPS*K*K*K*K*K*K*-NH2)；三激动剂(H*AibQGT*FT*S*D-(γ-E-C16酰基)KS*K*YLDERAAQDFVQWLLDGGPS*S*GAPPPS*-NH2)；艾塞汀(H*GEGTFTS*DLS*KQMEEEAVRLFIEWLK*NGGPS*S*GAPPPS)；VIP(H*S*DAVFTDNYTRLRK*QMAVK*K*YLNS*ILN)；PACAP(H*S*DGIFTDS*YS*RYRK*QMAVK*K*YLAAVLGK*RYKQRVK*NK*)；GIP(Y*AEGTFIS*DYS*IAMDK*IHQQDFVNWLLAQK*GK*K*NDWK*HNITQ)；Met-脑啡肽(Y*GGFM)；BNP(Y*PSKPDNPGEDAPAEDMARYYS*ALRHYINLITRQRY)；物质P(R*PK*PQQFFGLM)；Tyr-MIF-1(Y*LG)；Tyr-W-MIF-1(Y*PWG)；升糖素(h*sqgtftsdyskyldsrraqdfvqwlmnt)；生长激素释放激素(ghrh)；脑垂体腺苷酸环化酶活性多肽(PACAP)ADCYAP1；升糖素(GCG)；胃抑肽(GIP)；促胰泌素(SCT)；血管活性肠肽(VIP)；OXM(调酸素)；PTH(副甲状腺素)；肽YY3-36及肽YY1-36(PYY)；NPY(神经肽Y)；VIP肽(血管活性肠肽)；对于险自下述所成群组的至少一者的双激动剂：GLP-1+GIP；GLP-1+淀粉素；GLP-1+胃泌素；GLP-1+雌激素；GLP-1+PYY，GLP-1+胆囊收缩素激素(CCK)；对于GLP-1R+升糖素受体的双激动剂；混合的激动剂；阿必鲁肽；度拉鲁肽；其他GLP-1R激动剂；淀粉素；DPP4、DPP2的其他受质及/或对于DPP4及/或DPP2具有≥...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·库马尔，V·蒙塔纳里，M·贝因玻恩，V·拉曼，
申请(专利权)人：塔夫茨大学，塔夫茨医学中心，
类型：发明
国别省市：美国,US