抗氧化性多肽GTMGAVGPRG及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG及其制备方法，该抗氧化性多肽GTMGAVGPRG结构如式(I)所示，该制备方法采用固相合成抗氧化肽GTMGAVGPRG，该制备方法具有操作简单和产率高的优点；同时该抗氧化肽GTMGAVGPRG对自由基具有优异的清除效果。

Antioxidant peptide GTMGAVGPRG and its preparation methods

The invention discloses an antioxidant polypeptide GTMGAVGPRG and its preparation method. The antioxidant polypeptide GTMGAVGPRG structure (I) shows that the preparation method adopts the solid phase synthesis of antioxidant peptide GTMGAVGPRG, which has the advantages of simple operation and high yield; at the same time, the antioxidant peptide GTMGAVGPRG has excellent free radical. Scavenging effect.

【技术实现步骤摘要】
抗氧化性多肽GTMGAVGPRG及其制备方法
本专利技术涉及抗氧化性多肽，具体地，涉及一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG及其制备方法。
技术介绍
生物分子氧化是一个自由基介导的过程，它对加工类食品和生物系统造成很大的伤害。抗氧化肽对抑制、延缓脂质氧化，保护人体组织器官免受自由基侵害的有特定作用，具有较强抑制生物大分子过氧化和清除体内自由基的功能。抗氧化肽的作用机理是直接作用在自由基，或是间接消耗掉容易生成自由基的物质，防止发生进一步反应。自由基是高度不稳定的分子，除了体内正常反应外，环境因素也可以产生自由基。当体内的自由基超过了身体对其的抵抗力时，则会出现氧化性应激，氧化性应激会造成失明、关节炎、阿尔兹海默症、心血管疾病等。目前研究证实氧化性应激与大约200种疾病的产生有关。身体有抵抗自由基的系统，主要有两个防御系统：储存的抗氧化剂和抗氧化酶。如果这些防御系统供应不足，或者自由基过量，或者如果体内的修复系统不能完全修复损伤，健康就会出现问题。目前，国内外专利对于抗氧化肽的研究层出不穷：专利文献CN104356203A提供了一种抗氧化肽及制备方法与应用，该多肽序列为YTIQY；专利文献CN103880933A提供了酶解小藻球蛋白，得到一种新型抗氧化肽，其氨基酸序列为AETIGLAP；专利文献CN103739693A提供了一种具有抗氧化活性的合浦珠母贝肉抗氧化肽序列，其氨基酸序列为GAGLPGKRER；专利文献CN105566446A公开了一种来源于蒲公英籽的抗氧化肽的氨基酸序列、制备方法及其应用，其氨基酸序列为VF。就目前看来，多肽大多还是从微生物中进行提取，而微生物中提取多肽的技术操作复杂且多肽得率低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG及其制备方法，该制备方法采用固相合成抗氧化肽GTMGAVGPRG，该制备方法具有操作简单和产率高的优点；同时该抗氧化肽GTMGAVGPRG对自由基具有优异的清除效果。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG，其中，该抗氧化性多肽GTMGAVGPRG结构如式(I)所示，本专利技术还提供了一种如上述的抗氧化性多肽GTMGAVGPRG的制备方法，包括：1)将基体树脂浸泡于溶剂中，接着加入N,N-二异丙基乙胺DIEA、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH进行接触反应，然后洗涤、封头处理、脱保护，最后洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到二级树脂；2)将二级树脂依次与多种氨基酸进行多次改性处理得到三级树脂；每次改性处理为：将二级树脂与氨基酸在1-羟基苯并三氮唑HoBt、N,N-二异丙基碳二亚胺DIC的存在下进行接触反应，然后经过脱保护、洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到三级树脂；单次改性处理中的化合物依次独立为N-芴甲氧羰基精氨酸Fmoc-Arg-OH、N-芴甲氧羰基脯氨酸Fmoc-Pro-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基缬氨酸Fmoc-Val-OH、N-芴甲氧羰基丙氨酸Fmoc-Ala-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基甲硫氨酸Fmoc-Met-OH、N-芴甲氧羰基苏氨酸Fmoc-Thr-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH；3)将三级树脂洗涤，然后与切割液进行切割反应以制得抗氧化性多肽GTMGAVGPRG。通过上述技术方案，结合图1可知，本专利技术以基体树脂为载体，在树脂上合成多(甘氨酸—苏氨酸—甲硫氨酸—甘氨酸—丙氨酸—缬氨酸—甘氨酸—脯氨酸—精氨酸—甘氨酸)肽，最后用含有三氟乙酸的切割液将此序列多肽从树脂上切割下来，用乙醚沉析法拿到粗品，用HPLC纯化得到纯品。该抗氧化肽具有较强的抗氧化性能，对DPPH、ABTS自由基都有强清除作用，表明其在抗氧化活性开发和应用方面有重要价值。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。附图说明附图是用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本专利技术，但并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1是本专利技术的一种优选实施方式的制备路线图；图2是检测例1中的液相质谱图；图3是检测例1中的红外光谱图图4是实施例1制得的GRPGVAGMTG清除DPPH自由基的“量-效”关系曲线图；图5是实施例1制得的抗氧化肽GRPGVAGMTG清除ABTS自由基的“量-效”关系曲线图。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本专利技术提供了一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG，其中，该抗氧化性多肽GTMGAVGPRG结构如式(I)所示，本专利技术还提供了一种如上述的抗氧化性多肽GTMGAVGPRG的制备方法，包括：1)将基体树脂浸泡于溶剂中，接着加入N,N-二异丙基乙胺DIEA、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH进行接触反应，然后洗涤、封头处理、脱保护，最后洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到二级树脂；2)将二级树脂依次与多种氨基酸进行多次改性处理得到三级树脂；每次改性处理为：将二级树脂与氨基酸在1-羟基苯并三氮唑HoBt、N,N-二异丙基碳二亚胺DIC的存在下进行接触反应，然后经过脱保护、洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到三级树脂；单次改性处理中的化合物依次独立为N-芴甲氧羰基精氨酸Fmoc-Arg-OH、N-芴甲氧羰基脯氨酸Fmoc-Pro-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基缬氨酸Fmoc-Val-OH、N-芴甲氧羰基丙氨酸Fmoc-Ala-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基甲硫氨酸Fmoc-Met-OH、N-芴甲氧羰基苏氨酸Fmoc-Thr-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH；3)将三级树脂洗涤，然后与切割液进行切割反应以制得抗氧化性多肽GTMGAVGPRG。在本专利技术的步骤1)中，浸泡的条件可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高浸泡效果，优选地，在步骤1)中，浸泡至少满足以下条件：浸泡温度为20-25℃，浸泡时间为20-40min。在本专利技术的步骤1)中，接触反应的条件可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高产率以及反应速率，优选地，在步骤1)中，接触反应至少满足以下条件：反应温度为20-25℃，反应时间为1-2h。在本专利技术的步骤1)中，物料的用量可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高产率，优选地，在步骤1)中，相对于0.5g的基体树脂，当取代度为0.5时，DIEA的用量为1-1.5mL，Fmoc-Gly-OH的用量为0.2-0.4g，溶剂的用量为10-15mL。在本专利技术的步骤1)中，封头处理的条件可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高产率，优选地，在步骤1)中，封头处理采用二氯甲烷DCM、甲醇和DIEA加入体系中进行。在本专利技术的步骤1)中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG，其特征在于，所述抗氧化性多肽GTMGAVGPRG结构如式(I)所示，

【技术特征摘要】
1.一种抗氧化性多肽GTMGAVGPRG，其特征在于，所述抗氧化性多肽GTMGAVGPRG结构如式(I)所示，2.一种如权利要求1所述的抗氧化性多肽GTMGAVGPRG的制备方法，其特征在于，包括：1)将基体树脂浸泡于溶剂中，接着加入N,N-二异丙基乙胺DIEA、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH进行接触反应，然后洗涤、封头处理、脱保护，最后洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到二级树脂；2)将所述二级树脂依次与多种氨基酸进行多次改性处理得到三级树脂；每次所述改性处理为：将二级树脂与所述氨基酸在1-羟基苯并三氮唑HoBt、N,N-二异丙基碳二亚胺DIC的存在下进行接触反应，然后经过脱保护、洗涤直至茚三酮检测为蓝色以得到三级树脂；单次改性处理中的化合物依次独立为N-芴甲氧羰基精氨酸Fmoc-Arg-OH、N-芴甲氧羰基脯氨酸Fmoc-Pro-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基缬氨酸Fmoc-Val-OH、N-芴甲氧羰基丙氨酸Fmoc-Ala-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH、N-芴甲氧羰基甲硫氨酸Fmoc-Met-OH、N-芴甲氧羰基苏氨酸Fmoc-Thr-OH、N-芴甲氧羰基甘氨酸Fmoc-Gly-OH；3)将所述三级树脂洗涤，然后与切割液进行切割反应以制得所述抗氧化性多肽GTMGAVGPRG。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤1)中，所述浸泡至少满足以下条件：浸泡温度为20-25℃，浸泡时间为20-40min；优选地，在步骤1)中，所述接触反应至少满足以下条件：反应温度为20-25℃，反应时间为1-2h。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，在步骤1)中，相对于0.5g的所述基体树脂，当取代度为0.5时，所述DIEA的用量为1-1.5mL，所述Fmoc-Gly-OH的用量为0.2-0.4g，所述溶剂的用量为10-15mL；优选地，在步骤1)中，所述封头处理采用二氯甲烷DCM、甲醇和DIEA加入体系中进行；更优选地，相对于0.5g的所述基体树脂，所述DCM的用量为10-15mL，所述甲醇的用量为1-1.5mL，所述DIEA的用量为1-1.5mL；进一步优选地，所述溶剂选自DCM、DMF、DMSO和HEMPA中的至少一者，所述基体树脂选自2-氯三苯甲基氯树脂、Wang树脂、MBHA树脂中的至少一者。5.根据权利要求2所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶玉贵，杜雾晨，葛飞，朱龙宝，张旭光，孙良玉，宋平，李婉珍，
申请(专利权)人：安徽工程大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34