一种达比加群酯杂质及其制备、检测方法技术

本发明专利技术公开了一种达比加群酯杂质如式I所示化合物及杂质制备、检测方法，所述制备方法包括以下步骤：以达比加群酯、正己醇为原料，以包括有机溶剂和缓冲液的混合物为体系溶剂，反应，后将反应液调节至pH＝7.8～8.2，优选为8.0，即得；所述检测方法采用高效液相色谱进行检测，对杂质进行定性或定量，检测条件包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱，检测波长：210～400nm，流动相包括流动相A、流动相B，流动相A：含缓冲液的水相，pH为4.25～4.40，进一步为4.3；流动相B:主要包括甲醇或乙腈；流动相采用梯度洗脱法洗脱。本发明专利技术的方法提高达比加群酯的杂质控制，进而控制达比加群酯的产品质量，更好满足达比加群酯一致性评价要求。

A dabigatran ester impurity and its preparation and detection method

The invention discloses a method for preparation and detection of compounds and impurities shown by the dabigan group of ester impurities, such as I, and the preparation method comprises the following steps: using dabiga group ester and hexanol as raw material, the mixture of organic solvent and buffer solution is a system solvent, and then the reaction liquid is adjusted to pH = 7.8 to 8.2. The test method was selected as 8, that is, the detection method was detected by high performance liquid chromatography to determine the impurity. The detection conditions include: chromatographic column: Eighteen alkyl silane bonded silica gel column, detection wavelength 210 ~ 400nm, mobile phase including mobile phase A, mobile phase B, flow phase A: water phase containing buffer solution, pH 4.25 ~ 4.40, further 4.3; mobile phase B: mainly consisted of methanol or acetonitrile; the mobile phase was eluted by gradient elution. The method of the invention improves the impurity control of dabiga group, and then controls the product quality of dabiga group ester, so as to better meet the requirement of dababa group ester consistency evaluation.

【技术实现步骤摘要】
一种达比加群酯杂质及其制备、检测方法
本专利技术涉及制药领域，特别是涉及一种达比加群酯杂质及其制备、检测方法。
技术介绍
达比加群酯(dabigatranetexilate)商品名pradaxa，由德国勃林格殷格翰公司开发。于2008年4月在德国和英国率先上市，2010年10月，FDA批准达比加群酯用于患者中风和AF疾病的预防，2014年4月批准其用于DVT和PE的治疗，以及减少复发性DVT和PE患者的风险，2015年批准其用于髋关节置换患者DVT和PE的预防。该品种是继华法林之后50年来首个被FDA批准的新型口服抗凝药物，凭借其可口服、强效、无需特殊用药监测、药物互相作用较少等特点，成为了抗凝领域的一项重大突破，具有里程碑意义。由于其良好的市场前景，受到了众多制药公司的青睐。2015年7月22日后国务院明确指出加快仿制药一致性评价后，CFDA随即出台一系列配套政策，2018年底前要完成289个品种的一致性评价，没有通过的将注销药品批准文号，产品将面临下架，轻则丢失市场，重则影响生存。挑战与机遇并存，谁能在同类品种中首先通过一致性评价，谁就会取得先发优势，抢占市场先机。2016年5月，国家食药监总局发布了关于落实《国务院办公厅关于开展仿制药质量和疗效一致性评价的意见》有关事项的公告，即国家要求仿制药品要与原研药品质量和疗效一致。具体来讲，要求杂质谱一致、稳定性一致、体内外溶出规律一致，为了满足对药物质量越来越高的要求，需要秉承质量源于设计(QbD)理念，从源头进行原料药合成设计和控制，而实现从源头进行原料药合成设计和控制首先需要控制一个重要指标——杂质。尤其是达比加群酯结构含有两个酰胺和酯键，分子结构不太稳定，生产过程中易产生较多未知杂质，影响最终产品质量。如果能够分离制备出达比加群酯工艺过程中产生的未知杂质，进行结构确认，从而根据杂质结构进一步了解反应的机理，从达比加群酯中将杂质检测出来，从而根据杂质检测结果调整方法控制其含量，从源头对工艺有效控制，将大大提高达比加群酯的杂质控制，满足达比加群酯一致性评价要求。为从源头上控制达比加群酯有效提高终产品的质量，使其满足达比加群酯一致性评价要求，提高企业竞争力，本专利技术研究了一种达比加群酯的杂质及其制备方法。
技术实现思路
达比加群酯结构不稳定的特性，在制备过程中，容易产生较多的杂质，如果不对其中产生的杂质进行结构确定，将会给成品的质量控制带来较大的风险；只有通过确定杂质化学结构，了解杂质产生机理，进而对该步反应操作进行有效的控制，才能确保达比加群酯成品符合质量要求。基于对达比加群酯的结构，多篇文献(CN105348262、WO2013/144903、JournalofChemicalResearch,2016,40(8),461、WO2013/24384、WO2016/27077、Heterocycles,2013,87(8),1699、WO2014/167577)采取了如下合成路线：化合物1在碱性条件下与氯甲酸正己酯发生反应，制备达比加群酯。多篇文献报道的达比加群酯的合成路线然而，专利技术人在进行该步骤工艺研究中，偶然发现制备得到的达比甲群酯将会产生一个未知杂质，且该未知杂质一旦产生，其含量就会超过鉴定阈值0.1％，更加复杂的是达比加群酯纯化工艺很难将其有效去除。药品注册技术要求国际协调会议组织(ICH)在Q3A《新原料药中的杂质》中明确指出，研究者应对在原料药中实际存在的表观量大于或者等于0.1％的杂质结构特征进行描述；对多批次反复出现的大于或者等于0.1％的杂质应予界定。申请人偶然发现了该未知杂质的产生规律并进行有效分离，进一步，通过LC-MS、NMR等表征手段对该杂质进行了结构确定，指导了申请人对该步骤操作工艺优化的实施，通过对反应参数的控制可有效控制该未知杂质的产生，从而控制达比加群酯的质量。具体的，专利技术人检测到了达比加群酯中含有式I所示化合物的未知杂质，但是，目前并未报道式I化合物的存在，更没有人发现式I化合物存在于达比加群酯中。在发现化合物后的进一步研究中，得知产生机理如下：化合物1在碱性条件下，首先酯水解生成中间态1，然后与氯甲酸正己酯反应形成不稳定的活性酯中间态2，最后此活性酯中间态再与正己醇发生醇解反应，得到目标产物。达比加群酯杂质产生机理进一步，专利技术人尝试传统制备正己酯的方法如酰氯法、缩合法，制备该杂质,但由于达比加群酯结构含有易发生水解结构，使用传统酰氯的方法得到的体系杂质较多，无法纯化。使用传统的酯交换的方法，由于正己基空间位阻等原因，反应转化率极低，几乎无新产物出现。专利技术人无意中发现使用达比甲群酯成品在含缓冲液溶剂中与正己醇混合，进行室温放置会产生该杂质，从而得到了制备该杂质较为简易的合成办法。具体的，式I化合物制备方法，所述制备方法包括以下步骤：以达比加群酯、正己醇为原料，进行如下操作：以包括有机溶剂和缓冲液的混合物为体系溶剂，反应，后将反应液调节至pH＝7.8～8.2，优选为8.0，即得。进一步地，所述达比加群酯、正己醇物质的量比为1:3～5，优选为1:3、1:4或1:5，在本专利技术的一个实施例中，物质的量比为1:5。进一步地，所述混合物中有机溶剂和缓冲液的体积比为3～5:10，优选为3:10、4:10或5:10，进一步优选为4:10。进一步地，所述缓冲液pH＝4.6～4.8；优选为pH＝4.8。进一步地，所述缓冲液为醋酸盐-醋酸缓冲液；所述醋酸盐选自醋酸钠、醋酸铵中的一种或两种的混合物，优选为醋酸铵，进一步地，所述醋酸铵浓度为0.2wt％～0.5wt％，优选为0.2wt％。进一步地，所述有机溶剂选自乙腈、丙酮或乙醇中的一种或多种的混合物。进一步地，所述制备方法包括以下(1)～(4)中的一项或多项：(1)所述有机溶剂为乙腈；(2)所述反应液采用10％碳酸氢钠水溶液调节pH；(3)所述反应的时间为36h；(4)所述反应温度为0～30℃。进一步地，所述制备方法还包括以下步骤：萃取，柱层析；所述萃取使用的溶剂为二氯甲烷，所述柱层析使用的洗脱剂为DCM、MeOH的混合物，DCM、MeOH的体积比为30:1，进一步地，所述柱层析为硅胶柱层析。在提供杂质制备方法的基础上，本专利技术还提供了一种达比加群酯中杂质的检测方法，所述杂质为式I所述化合物，所述检测方法采用高效液相色谱进行检测，对杂质进行定性或定量，检测条件包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱，检测波长：210～400nm，流动相包括流动相A、流动相B，流动相A：含缓冲液的水相，pH为4.25～4.40，进一步为4.3；流动相B:主要包括甲醇或乙腈；流动相采用梯度洗脱法洗脱，洗脱程序如下：本专利技术检测波长，可以在前述公开的范围内通过常规手段进行调节选择。在寻找最佳检测波长时，可以使用紫外分光光度法、HPLC配套使用的全波段扫描等方式进行，再配合HPLC检测器的检测效果(如避免溶剂干扰等)，采用常规技术授权找到适宜的检测波长。本专利技术一个具体实施方式中，检测波长选自210～400nm，例如在242nm、310nm或/和340nm。检测步骤包括：(1)制备供试品溶液、对照品溶液；(2)分别将供试品溶液、对照品溶液进样检测。所述供试品为待检测的达比加群酯。本专利技术中定性检测，可以使用常规方法进行，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.如式I所示化合物：

【技术特征摘要】
1.如式I所示化合物：2.一种权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：以达比加群酯、正己醇为原料，以包括有机溶剂和缓冲液的混合物为体系溶剂，反应，后将反应液调节至pH＝7.8～8.2，优选为8.0，即得。3.根据权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述达比加群酯、正己醇物质的量比为1:3～5，优选为1:3、1:4或1:5，进一步优选为1:5。4.根据权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述混合物中有机溶剂和缓冲液的体积比为3～5:10，优选为3:10、4:10或5:10，进一步优选为4:10。5.根据权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述缓冲液pH＝4.6～4.8，优选为pH＝4.8。6.根据权利要求2、4或5任意一项所述化合物的制备方法，其特征在于，所述缓冲液为醋酸盐-醋酸缓冲液，所述醋酸盐选自醋酸钠、醋酸铵中的一种或两种的混合物，优选为醋酸铵，进一步地，所述醋酸铵浓度为0.2wt％～0.5wt％，优选为0.2wt％。7.根据权利要求2、4或5任意一项所述化合物的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂选自乙腈、丙酮或乙醇中的一种或多种的混合物，优选为乙腈。8.根据权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤还包括萃取，柱层析；进一步地，所述萃取使用...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜振军，王全刚，郭培良，陈翠翠，葛志乐，罗鸣，黄浩喜，李英富，苏忠海，
申请(专利权)人：成都倍特药业有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51