用于确定废物中抗生素的测定制造技术

本发明专利技术涉及一种用于快速确定废物，例如来自工厂的液体或固体废物流中抗生素存在的简单且易于使用的方法。本发明专利技术还涉及包含用于快速确定废物中抗生素存在的测定和手册的试剂盒。

Determination of the determination of antibiotics in waste

The present invention relates to a simple and easy-to-use method for rapidly determining the presence of antibiotics in waste, such as liquid or solid waste streams from factories. The invention also relates to a kit containing a determination and a handbook for quickly determining the presence of antibiotics in waste.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定废物中抗生素的测定
本专利技术涉及一种用于快速确定废物中，例如来自工厂的液体或固体废物流中抗生素存在的简单且易于使用的方法。本专利技术还涉及包含用于快速确定废物中抗生素存在的测定和手册的试剂盒。
技术介绍
抗微生物抗性是全球性重要问题之一，其不再是对未来的预测，而是正在世界各地发生，并有可能影响任何国家的任何年龄的任何人。抗微生物抗性-当细菌改变时，抗生素不再对需要其来治疗感染的人起作用-现在已成为公共健康的主要威胁。越来越多的公众呼吁采取全球性集体行动来应对这一威胁，包括关于抗微生物抗性国际条约的提案。世界各地的抗生素抗性并没有得到很好的映射，但受影响最大的国家是医疗系统较差的贫穷国家。抗微生物抗性发生的主要途径可以有以下三种：对某些类型细菌的天然抗性、基因突变、或通过从另一种细菌获得抗性。由于微生物自身的突变，抗微生物抗性可能自发发生，随着时间推移积累抗性或滥用抗生素。抗性微生物越来越难以治疗，导致需要替代性药物或更高剂量，这两种情况对个体而言可能更昂贵或更具毒性。由于抗微生物抗性，一些感染已经变得无法治愈。抗微生物抗性是越来越棘手的问题，每年导致数百万人死亡。抗药性的上升趋势可归因于四个主要方面：在人类群体中使用抗生素、在动物群体中使用抗生素、在人类和/或非人类来源之间抗性菌株的传播、以及抗生素在环境中的释放。抗微生物抗性的后一个原因，抗生素在环境中释放，在农业和工业的各个环节都是一个日益严重的问题。在这方面，环境，尤其是通过例如医院和工业废水以及未经处理的城市废水等“热点”的传播和污染呈现出日益严重的公共健康问题。自从通过人类废物(用药、耕作)、动物治疗和制药业等若干来源引入抗生素以来，它们一直在污染环境。抗生素废物可能含有抗性细菌，或可能是抗性细菌发展的来源。因此，抗生素废物可能会导致抗生素抗性细菌进入环境。随着细菌快速复制，进入环境的抗性细菌在继续分裂时复制其抗性基因。另外，携带抗性基因的细菌(即抗性细菌)具有通过水平基因转移将这些基因传播到其他物种的能力。因此，即使特定抗生素不再被引入环境中，抗生素抗性基因仍会通过已经复制而没有持续暴露的细菌而持续存在。作为后果之一，抗生素的生产者必须确保使用最清洁、最严格和可持续的方法来使生产挽救生命的药物对环境的影响最小化，而朝这个方向迈出的第一步是测量(工业)废物流中的抗生素含量。从技术上讲，采用最先进的分析方法，这是可行的。水性流中抗生素的量可以通过若干种方法测量，所述方法包括光度测定法、电化学、气相色谱法和直接液相色谱法(Pettas和Karayannis(2004),Anal.Chim.Acta[分析化学学报]522,275-280)。缺点是这些技术费力费时，并且通常需要昂贵的设备和训练有素的人员。因此，这些方法即使不是不可能，也很难以高频率和/或在许多地点由没有特别高的技术技能的人员实施。因此，需要简单、廉价且易于使用的方法来确定废物流中抗生素的存在和/或浓度。本披露提供了这样的方法。已知用于确定抗生素的微生物测定已经相当长的一段时间了。这类测定的实例描述于CA2056581、DE3613794、EP0005891、EP0285792、EP2226389、GB1467439、WO94/18343和WO2005/118837中。这些分析中大多数都是为用于乳品行业而设计的，特别是用于分析奶。这些微生物测定包含即用型测定，该测定利用微生物并通过由添加到测定介质中的指示剂(例如可以给出指示信号的指示剂分子)所指示的变化给出结果。其原理是，当抗生素以足以抑制微生物生长的浓度存在于样品中时，指示剂的颜色将保持不变，而当不发生抑制时，微生物的生长伴随着酸和/或减少的代谢物的形成或其他会引起指示剂指示信号变化的现象。不幸的是，当将这样的测定法应用于比奶更复杂的底物时，例如包含许多其他组分或甚至(半)固体废物(例如滤饼、菌丝体或来自发酵过程的浓缩残余物)的废水流，结果难以解释，并且因此不可靠。如果指示剂变化是指示剂分子颜色的变化，这种变化往往难以观察或解释。另一个可能的缺点是复合样品中的其他非抗微生物组分影响测定微生物的正常功能。
技术实现思路
本披露涉及用于确定基本不含乳糖和/或含有少于0.01％(w/w)的乳糖的不含乳糖的样品中抗生素存在或不存在的方法，该方法包括以下步骤：(a)使所述不含乳糖的样品与测定介质接触，该测定介质包含微生物、胶凝剂和能够检测该微生物的生长或抑制的指示剂，以获得不含乳糖的样品和测定介质的组装体；(b)在没有抗生素存在于所述不含乳糖的样品中的情况下，将步骤(a)中获得的组装体孵育足够的时间以使该微生物生长；和(c)用该指示剂检测该微生物的生长或生长的抑制，其特征在于在步骤(a)中添加奶和/或奶粉。本披露还涉及试剂盒，该试剂盒包含：(a)具有测定介质的容器，该测定介质包含微生物、胶凝剂和能够检测该微生物生长或抑制的指示剂以获得混合物；(b)包含用于确定基本上不含乳糖和/或含有小于0.01％(w/w)乳糖的不含乳糖样品中抗生素浓度的说明书的手册。本披露还涉及溴甲酚紫或溴百里酚蓝用于确定基本不含乳糖和/或含有小于0.01％(w/w)乳糖的不含乳糖的样品中抗生素浓度的用途。本专利技术进一步涉及β-内酰胺降解化合物用于确定基本不含乳糖和/或含有小于0.01％(w/w)乳糖的不含乳糖样品中抗生素浓度的用途。具体实施方式本专利技术的目的是提供一种用于确定废物中抗生素的简单、廉价且易于使用的方法。还提供了包含用于应用于废物的易于使用的微生物测定和说明书的部件的试剂盒，该试剂盒包含复合物基质，例如包含许多其他组分或甚至(半)固体废物(例如滤饼、菌丝体或来自发酵过程的浓缩残余物)的废水流。本披露提供了独特的可靠且简单的通用测试方案。在本专利技术的上下文中，术语和缩写定义如下。术语“抗生素”是指如下化合物，例如像β-内酰胺类、四环素类、氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类及其衍生物；及其任何组合。可以用本专利技术所述的方法或试剂盒检测其存在的抗生素的实例是但不限于氨基糖苷类(例如阿米卡星，地贝卡星，庆大霉素，卡那霉素A，新霉素B、C和E，奈替米星，西索米星，链霉素，妥布霉素等)、头孢菌素(例如7-氨基头孢烷酸、7-氨基去乙酸头孢烷酸、头孢克洛、头孢羟氨卡、头孢羟唑、头孢曲嗪、头孢唑啉、头孢拉宗、头孢卡品、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡肟、头孢他美、头孢克肟、头孢甲肟、头孢美唑、头孢米诺、头孢地嗪、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻利、头孢噻肟、头孢替安、头孢替坦、头孢维新、头孢西丁、头孢唑兰、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢喹肟、头孢沙定、头孢磺啶、头孢洛林、头孢他啶、头孢特仑、头孢布烯、头孢噻呋、头孢唑肟、头孢吡普、他唑巴坦、头孢曲松、头孢呋辛、头孢氨苄、头孢菌素C、头孢拉定等)、青霉素(如6-氨基青霉烷酸、阿莫西林、氨苄西林、氯唑西林、氟氯西林、苯唑西林、青霉素G、青霉素V等)、第一代喹诺酮类(如西诺沙星、萘啶酮酸、奥索利酸、吡哌酸、吡罗米酸、罗索沙星)、第二代喹诺酮类(如环丙沙星、依诺沙星、氟罗沙星、洛美沙星、纳地沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星、鲁氟沙星)、第三代喹诺酮类(如巴罗沙星、格帕沙星、左氧氟沙星、帕珠沙星、司帕沙星、替马沙星、托氟沙星)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于确定基本不含乳糖和/或含有少于0.01％(w/w)的乳糖的不含乳糖的样品中抗生素存在或不存在的方法，该方法包括以下步骤：(a)使所述不含乳糖的样品与测定介质接触，该测定介质包含微生物、胶凝剂和能够检测该微生物的生长或抑制的指示剂，以获得不含乳糖的样品和测定介质的组装体；(b)在没有抗生素存在于所述不含乳糖的样品中的情况下，将步骤(a)中获得的组装体孵育足够的时间以使该微生物生长；和(c)用该指示剂检测该微生物的生长或生长的抑制，该方法特征在于在步骤(a)中添加奶和/或奶粉。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.20 EP 15195669.5;2016.01.21 EP 16152287.51.一种用于确定基本不含乳糖和/或含有少于0.01％(w/w)的乳糖的不含乳糖的样品中抗生素存在或不存在的方法，该方法包括以下步骤：(a)使所述不含乳糖的样品与测定介质接触，该测定介质包含微生物、胶凝剂和能够检测该微生物的生长或抑制的指示剂，以获得不含乳糖的样品和测定介质的组装体；(b)在没有抗生素存在于所述不含乳糖的样品中的情况下，将步骤(a)中获得的组装体孵育足够的时间以使该微生物生长；和(c)用该指示剂检测该微生物的生长或生长的抑制，该方法特征在于在步骤(a)中添加奶和/或奶粉。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述测定介质还包含营养素。3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其中所述指示剂是溴甲酚紫或溴百里酚蓝。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述微生物是嗜热的。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述微生物是嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述胶凝剂为琼脂。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中在步骤(a)之前从所述不含乳糖的样品中去除固体。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述不含乳糖的样品加所述添加的奶或奶粉中的乳糖的量为从2％至5％(w/w)。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，该方法还包括选自以下的对照测试：(i)在步骤(a)中添加已知量的抗生素，或者(ii)在步骤(a)中添加已知量的β-内酰胺降解化合物，或者(iii)(i)和(ii)的组合。10.一种用于确定基本不含乳糖和/或含有少于0.01％(w/w)的乳糖的不含乳糖的样品中抗生素浓度的方法，该方法包括以下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：伦德特·马里纳斯·哈内马埃杰尔，狄瑞扎·钱德勒·加戈萨，
申请(专利权)人：中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司，
类型：发明
国别省市：荷兰,NL