骨髓细胞基因组DNA的提取方法及提取试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法和提取试剂盒，提取方法包括：采用蛋白酶K和裂解液处理骨髓细胞样品，然后采用核糖核酸酶消化，与无水乙醇混合后放入硅胶吸附柱中吸附，依次采用第一洗涤液、第二洗涤液和洗脱液处理，得到纯化后的骨髓细胞基因组DNA。本发明专利技术的骨髓细胞基因组DNA的提取方法通过控制配方、调节pH值和离子浓度等，能够在低成本的情况下，提取出来质量高、纯度高的gDNA，提取效果稳定可靠。

Extraction method and extraction kit of genomic DNA from bone marrow cells

The invention provides a method for extracting the genomic DNA of bone marrow cells and the extraction kit. The extraction method includes: using the protease K and lysate to treat the bone marrow cell samples, then digested by ribonuclease, and then adsorbed in the silica gel column after mixing with the anhydrous ethanol, and using the first washing liquid and the second washing liquid in turn. And the elution solution was used to obtain the purified genomic DNA of bone marrow cells. The extraction method of the genomic DNA of the bone marrow cell of the invention can extract the gDNA with high quality and high purity by controlling the formula, adjusting the pH value and the ion concentration, and the extraction effect is stable and reliable.

【技术实现步骤摘要】
骨髓细胞基因组DNA的提取方法及提取试剂盒
本专利技术属于DNA提取领域，涉及一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法及提取试剂盒。
技术介绍
骨髓细胞是人体内重要的细胞之一，了解骨髓细胞的基因组DNA(GenomicDNA，gDNA)有助于了解人体的健康情况，因此，就很有必要先提取骨髓细胞gDNA。人们常用骨髓细胞gDNA提取试剂盒来提取骨髓细胞gDNA。目前市面上销售的骨髓细胞gDNA提取试剂盒要么为了提高gDNA的浓度而牺牲其纯度，要么为了提高其纯度而牺牲其浓度。gDNA的浓度和纯度均会对后继的建库和测序数据产生影响，因此，在提取gDNA时同时获得较高浓度和较大纯度的gDNA就非常有意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于为克服现有技术的缺陷而提供一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其能够在低成本的情况下同时获得较高浓度和较大纯度的gDNA。本专利技术的第二个目的在于提供一种能够实现上述方法的骨髓细胞基因组DNA提取试剂盒。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其包括以下步骤：(1)、将骨髓细胞样品、蛋白酶K溶液和裂解液混合，裂解后得到裂解悬浮本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：其包括以下步骤：(1)、将骨髓细胞样品、蛋白酶K和裂解液混合，裂解后得到裂解悬浮液；(2)、将所述裂解悬浮液冷却至室温，与核糖核酸酶混合并消化后，得到消化液；(3)、将消化液与无水乙醇混合，待溶液澄清后作为上样液加入硅胶吸附柱中进行吸附，依次采用第一洗涤液和第二洗涤液清洗所述硅胶吸附柱并弃去废液；(4)、采用洗脱液洗脱步骤(3)得到的硅胶吸附柱，分离得到骨髓细胞基因组DNA。

【技术特征摘要】
1.一种骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：其包括以下步骤：(1)、将骨髓细胞样品、蛋白酶K和裂解液混合，裂解后得到裂解悬浮液；(2)、将所述裂解悬浮液冷却至室温，与核糖核酸酶混合并消化后，得到消化液；(3)、将消化液与无水乙醇混合，待溶液澄清后作为上样液加入硅胶吸附柱中进行吸附，依次采用第一洗涤液和第二洗涤液清洗所述硅胶吸附柱并弃去废液；(4)、采用洗脱液洗脱步骤(3)得到的硅胶吸附柱，分离得到骨髓细胞基因组DNA。2.根据权利要求1所述的骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述骨髓细胞样品与所述蛋白酶K的体积比可以为(5‐20):1，可以为(8‐15):1，也可以为10:1；和/或，所述骨髓细胞样品与所述裂解液的体积比可以为1:(0.5‐2)，可以为1:1。3.根据权利要求1所述的骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述裂解液包括：盐酸胍、脱氧胆酸钠、离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂。4.根据权利要求3所述的骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述裂解液中的所述盐酸胍的可以为3‐10M，可以为3.5‐9.5M，还可以为5‐9M；进一步可以为5.5‐7.5M；和/或，所述裂解液中脱氧胆酸钠的质量体积百分比可以为0.1‐0.5％，可以为0.2‐0.4％，更可以为0.25‐0.3％；和/或，所述离子型表面活性剂为月桂酰基肌氨酸钠，在所述裂解液中的质量体积百分比为0.8％‐1.2％；和/或，所述非离子型表面活性剂为聚氧乙烯醚，在所述裂解液中的质量体积百分比浓度为0.4％‐0.5％。5.根据权利要求3所述的骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述第一洗涤液为盐酸胍和无水乙醇的混合液，pH值为9.0‐10.0；可选地，所述第一洗涤液中盐酸胍的摩尔浓度大于所述裂解液中盐酸胍的摩尔浓度；和/或，所述第一洗涤液中盐酸胍与所述无水乙醇的体积比为1:(0.9‐1)；可选地，所述第一洗涤液中盐酸胍的浓度是所述裂解液中盐酸胍的浓度1.4倍至2倍。6.根据权利要求3所述的骨髓细胞基因组DNA的提取方法，其特征在于：所述第二洗涤液为Tris‐HCl缓冲液和无水乙醇的混合液，pH值为7.5‐8.5；优选地，所述T...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈明增，赵奕欣，仇伟，金刚，
申请(专利权)人：云健康基因科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31