重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的新型稳定制剂制造技术

本发明专利技术描述了一种重组人胰高血糖素样肽‑1类似物融合蛋白的新型稳定制剂。所述药物制剂可以用于治疗糖尿病及其相关病症。

A new stable preparation of recombinant human glucagon like peptide -1 analogue fusion protein

The present invention describes a new stable preparation of recombinant human glucagon like peptide 1 analogues fusion protein. The pharmaceutical preparation can be used for the treatment of diabetes and related diseases.

【技术实现步骤摘要】
重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的新型稳定制剂
本专利技术涉及一种重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的新型药物制剂。
技术介绍
胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物及其衍生物可用于治疗2型糖尿病。GLP-1可以诱发多种生物学效应，如以葡萄糖依赖方式作用于胰岛β细胞，促进胰岛素基因的转录，增加胰岛素的生物合成和分泌；刺激β细胞的增殖和分化，抑制β细胞凋亡，从而增加胰岛β细胞数量，抑制胰高血糖素的分泌，抑制食欲及摄食，延缓胃内容物排空等。因此GLP-1类似物及其衍生物可以通过改善2型糖尿病患者的代谢紊乱，使血糖维持在恒定水平。GLP-1(1-37)活性很低，并且GLP-1(7-37)OH及GLP-1(7-36)NH2这两种天然纯在的截断肽在体内容易被迅速清除。内源性的二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)可以通过去除GLP-1N端组氨酸和丙氨酸残基而使GLP-1失活，导致GLP-1在体内的半衰期仅为2分钟。将GLP-1与大分子蛋白进行融合或者偶联，可以有效延长其在体内的半衰期。HGS公司研发的一种基于人血清白蛋白(HSA)融合技术的长效GLP-1品种，将2个拷贝的突变GLP-1序列(N末端丙氨酸替换为甘氨酸，增加了其对DPP-IV蛋白水解的耐受性)与HSA序列重组后获得融合蛋白Albiglutide，商品名Syncria。EliLilly公司研发的Fc融合GLP-1长效融合蛋白Dulaglutide，商品名Trulicity。上述两种融合GLP-1药物既具有GLP-1生物学活性，又大大延长了其在生物体内的半衰期，能有效增加其对糖尿病的治疗效果。重组融合蛋白的稳定性都较差，在保存过程中会受到多种环境因素的影响，如温度、湿度、紫外线等都可以使融合蛋白发生多种物理或化学变化，造成蛋白质的聚合、分解、氧化或变性等。这些变化都可以使蛋白的活性降低，治疗效果下降甚至引起严重的毒副作用。因此，开发出稳定并适合长期保存的药物制剂显得尤为重要。冷冻干燥是一种常用的保存蛋白质药物的技术。可将需要保护的蛋白质与其他的赋形剂、稳定剂等物质按比例溶解混合在一起，经冷冻干燥方法去除水分，形成一种疏松的粉末状物质，从而有效延长其稳定性。
技术实现思路
本专利技术公开了一种包含重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的药物组合物。本专利技术所述的组合物包含由人胰高血糖素样肽-1类似物和人血清白蛋白形成的重组融合蛋白。在本专利技术的一些实施例中，所述融合蛋白多肽长度为613-639个氨基酸；其中人胰高血糖素样肽-1类似物为28个氨基酸，HSA为585个氨基酸，剩余氨基酸为连接肽。本专利技术所述的组合物为含有重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的治疗制剂和药物组合物。在一些实施方式中，所述制剂设置为施用较低剂量的多肽，而在其它实施方式中，所述制剂设置为施用较高剂量的多肽。在一些实施例中，本专利技术所述的重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白具有延长的保存期限。在一些实施方式中，所述药物制剂包括至少一种药学上可接受的载体，且pH在5-8.0之间、5-7.5之间、5-7.2之间、5-7.0之间、5-6.8之间、5-6.6之间、5-6.4之间、5-6.2之间、5-6之间、6-7.5之间、6-7.2之间、6-7之间。在其它实施方式中，所述pH为4、4.2、4.4、4.5、4.6、4.8、5、5.2、5.4、5.5、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.5、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.5、7.6、7.8或8.0。在一些实施方式中，所述药物制剂包含重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白，其浓度为1-150mg/ml、2.5-100mg/ml、10-50mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、35mg/ml、40mg/ml、45mg/ml、50mg/ml、55mg/ml、60mg/ml、70mg/ml、80mg/ml、90mg/ml、100mg/ml、120mg/ml或150mg/ml。在一些实施方式中，所述药物组合物包括至少一种药学上可接受的缓冲剂。在一些实施方式中，所述组合物中缓冲剂存在的浓度为5-50mmol/L、10-50mmol/L、15-50mmol/L、5-10mmol/L、10-20mmol/L、20-30mmol/L、15-25mmol/L或20mmol/L。在一些实施方式中，所述组合物中缓冲剂存在的浓度为5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L、30mmol/L、35mmol/L、40mmol/L、45mmol/L、50mmol/L、55mmol/L或60mmol/L。在一些实施方式中，所述缓冲剂是磷酸盐、柠檬酸盐、或其组合。在一些实施方式中，所述缓冲剂包括磷酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠或其组合。在一些实施方式中，所述药物组合物包括冻干稳定剂。在一些实施方式中，所述冻干稳定剂是氨基酸。在一些实施方式中，所述氨基酸的浓度2.5-55mg/ml、4-50mg/ml、6-45mg/ml。在一些实施方式中，所述氨基酸的浓度为10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml或30mg/ml。在一些实施方式中，所述药物组合物包括赋形剂。在一些实施方式中，所述赋形剂是多元醇。在一些实施方式中，所述多元醇是甘露醇。在进一步的实施方式中，所述药物组合物包括药学上可接受的载体。在一些实施方式中，所述载体是聚山梨酯。优选地，所述药物组合物包含以下组分：本专利技术所述药物组合物配制为多种形式并以不同途径给药。例如，在一些实施方式中，所述药物组合物制备用于经口、肺、静脉内、肌肉内、皮下、或局部给药。组合物还可以用于配制特定剂型。例如，在一些实施方式中，所述药物组合物可以配制成液体、凝胶、气溶胶、油膏、乳膏、冻干制剂、粉末、块、片或胶囊。在其它实施方式中，所述药物组合物配制成控释制剂、速溶制剂、延迟释放制剂、缓释制剂、脉冲释放制剂、和混合的立即释放制剂。在其它实施方式中，所述药物组合物以冻干粉末提供。在其它实施方式中，所述药物组合物以冻干块提供。本专利技术所述人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白中，人血清白蛋白的N端可以直接与人胰高血糖素样肽的C端相连，也可以通过柔性的连接肽使两个蛋白相连。本专利技术的含人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的药物制剂可经过下列方法制备获得：1)按配比将人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白、药学上可接受的水溶性赋形剂、药学上可接受的保护剂及pH值调节剂与注射用水混匀，调节pH值至约6.0-7.0；2)将步骤1)配制好的药液除菌、过滤、分装后，置于冻干机中冷冻干燥。所述步骤2)具体为：将步骤1)配制好的药液除菌过滤分装于适宜大小的西林瓶中，待冻干机板层温度预先冷冻到-10℃以下后，将冻干西林瓶样品放入冻干箱，在-35℃以下保温2-3小时。冷凝期温度降至-45℃后，开始抽真空，真空度低于80pa后，升板层温度到-18℃。当可见水线消失后开始梯度逐级升温，最后升制品温度到30℃，当制品温度上升至30℃时保持3-5小时。所述冻干机板层温度预先冷冻到-10℃以下，使待冻干制品进冻干箱后温度迅速降低，形成细小的无定型状态，易于水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包含重组人胰高血糖素样肽‑1类似物融合蛋白的药物组合物，其特征在于，包含以下组分：（1）1‑150mg/ml    重组人胰高血糖素样肽‑1类似物融合蛋白；（2）20‑50mg/ml    甘露醇；（3）2.5‑55mg/ml   氨基酸；（4）0.3‑2.0mg/ml  聚山梨酯80；（5）10‑50mmol/L   磷酸盐；（6） 注射用水。

【技术特征摘要】
1.一种包含重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的药物组合物，其特征在于，包含以下组分：（1）1-150mg/ml重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白；（2）20-50mg/ml甘露醇；（3）2.5-55mg/ml氨基酸；（4）0.3-2.0mg/ml聚山梨酯80；（5）10-50mmol/L磷酸盐；（6）注射用水。2.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物pH为4.0-8.0。3.权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述组合物pH为6.0-7.0。4.权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述重组人胰高血糖素样肽-1类似物融合蛋白的浓度为约2.5-100mg/ml。5.权利要求1所述的药物组合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：严守升，顾迎迎，陆游，于东安，郭斌，任杰，李雪松，范敏，
申请(专利权)人：江苏泰康生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32