用于诊断凝集素受体高表达肿瘤的放射性药物制造技术

一种用于诊断凝集素受体高表达肿瘤的放射性药物，所述放射性药物是一种

Radiopharmaceuticals used to diagnose lectin receptor high expression tumors

A radiopharmaceuticals used to diagnose lectin receptor high expression tumors.

【技术实现步骤摘要】
用于诊断凝集素受体高表达肿瘤的放射性药物
本专利技术涉及一种基于凝集素受体预靶向策略的肿瘤诊断的放射性药物，尤其涉及一种用于诊断凝集素受体介导的结直肠癌的放射性药物。
技术介绍
凝集素(Lectin)是一类能与生命体中糖化合物中糖基发生特异性结合的蛋白质，其被研究的历史已超过一百余年。上个世纪90年代，科学家们发现许多胃肠道肿瘤中凝集素表达量远远高于癌周组织。例如Ohannesian等人曾经将21种结直肠癌细胞系进行分子生物学分析，发现有20种均表达凝集素。因此，对于结直肠癌而言凝集素无疑是一个很好的药物作用靶点，可以用于肿瘤的诊断和治疗。亲和素(Avidin)提取自蛋清中，分子量66–69kDa，是一种高度糖基化、带正电荷的蛋白质(pI＝10.5)，含有末端N-乙酰化的葡萄糖及甘露糖残基。这些糖残基能被凝集素特异性识别，并发生高亲和力的结合形成Avidin–Lectin复合物。在生物体内，Avidin可以特异性的结合肿瘤细胞高表达的Lectin，未与Lectin结合的Avidin会重新进入血液循环，被肝吸收并通过肝胆代谢出体外。因此，Avidin可以作为Lectin的特异性配体，用于在体检测Lectin表达水平的靶向分子或特异性载体。核医学分子影像技术，例如正电子发射断层(PET)和单光子发射断层(SPECT)技术，与传统的检测手段相比，具有灵敏度高、无创、快速、实时等诸多优点，在肿瘤早期诊断方面拥有巨大优势。相关研究报道，Lectin(凝集素)受体高度表达于多种肿瘤细胞的表面，尤其在胃肠道肿瘤中，例如结直肠癌，其表达程度与恶性程度呈正相关。因此，对于Lectin受体高度表达的肿瘤而言，其无疑是一个很好的放射性药物作用靶点。目前，针对Lectin的核医学分子探针均以Avidin为设计核心，但此类探针大都分子量过大，结构过于复杂，不利于未来药盒化制备，其次，探针结构中都含有氨基酸例如赖氨酸，这会使得探针与高度表达于远端肾小管部位的megalin蛋白进行结合，导致探针在肾脏部位摄取过多并且滞留时间过长，肿瘤/肾脏比值较低，对位于腹腔部位肿瘤的诊断产生了较大的影响。另外，具体对于结直肠癌而言，以Lectin为靶点的研究大都以结直肠癌腹腔播散模型为主，此类模型与临床实际情况有一定差距，并不能反映药物真实的药代行为。
技术实现思路
为了改善现有技术存在的上述问题，本专利技术提供一种99mTc的放射性标记配合物，所述配合物具有核心鳌合配体，该配体以下式L1或其立体异构体形式为其配体前体：其中：-L-选自如下所示的连接臂：R各自独立的选自H、任选被羟基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、-NH2；n为2-8的整数，例如2、3、4、5、6、7、8；s为0-6的整数，例如0、1、2、3、4、5、6；R1为H，-SO3H，-COOH，或所述磺酸、羧酸药学上可接受的盐或酯。根据本专利技术，上述的配体前体式L1在形成标记配合物时，C＝N双键断裂形成N＝N双键，与锝配位。L1是以联肼尼克酰胺(HYNIC)螯合剂为基础的配体前体。已知HYNIC是一种有效的Tc螯合剂，由于HYNIC只能提供1-2个配位原子参与99mTc络合，因此除了本专利技术上述定义的核心鳌合配体外，还可具有辅助的协同配体L2和/或L3。作为协同配体L2、L3，其可以相同或不同，均是现有技术中已知可作为99mTc配体的那些，其中常见的协同配体L2、L3包括水溶性膦(例如三苯基膦三间磺酸钠盐TPPTS)，N-三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、N-二(羟乙基)甘氨酸、葡庚糖酸盐、乙二胺-N,N’-二乙酸酯(EDDA)、3-苯甲酰基吡啶(BP)、吡啶-2-偶氮-p-二甲苯胺(PADA)等。根据本专利技术，所述99mTc包括任意氧化还原态的锝放射性同位素，例如其+6、+5、+4、+3、+2、+1价态，优选99mTc(III)，99mTc(IV)，99mTc(VII)。根据本专利技术，所述式L1中，R1为其苯环上的取代基，其位置可为腙键的邻、间、对位。优选地，本专利技术的99mTc的放射性标记配合物中：L1中的连接臂L选自式d结构；优选其中s为2、n为3；R1为-SO3H；协同配体可相同或不同，独立地选自：N-三(羟甲基)甲基甘氨酸、三苯基膦三间磺酸钠盐。作为实例，本专利技术的核心鳌合配体前体式L1为下式或其立体异构体：作为实例，本专利技术的标记配合物(简写为99mTc-HYNIC-PEG3-B)为：本专利技术如上的标记配合物，由于配体的结合协同作用，其在溶液中和体内均保持稳定。所述配合物通过静脉注射后在尿样中回收到完整的该配合物，而没有发现理化降解物，这足以说明所述配合物的稳定性。本专利技术还提供所述99mTc的放射性标记配合物的制备方法，包括下述步骤：(1)将配体前体L1的溶液、L2的溶液和/或L3的溶液混合后，向混合溶液中加入99mTc源，反应生产所述标记配合物；或者将配体前体L1，配体L2和/或L3溶解在缓冲溶液中，向混合溶液中加入99mTc源，反应生产所述标记配合物；优选地，所述配体前体式L1由以下步骤(2)偶联得到，本领域技术人员应当理解，其中所述L是本专利技术上述L1定义中的连接臂L除去-NH-之外的结构：(2)本专利技术99mTc的放射性标记配合物的上述制备方法，均为现有技术已知方法。根据本专利技术的制备方法，在步骤(1)的标记方法中，利用已知的加入或不加SnCl2的标记法，其中反应温度根据具体反应原料和是否需要加入SnCl2会有所差异，例如15-100℃，如需加热则一般采用水浴或者空气浴加热，反应时间通常为几十分钟至几小时，优选20-60min。配体L1的前体可以用去离子水溶解，而协同配体L2、L3可以根据性质选择相应的缓冲溶液溶解，例如TPPTS、Tricine可选择琥珀酸缓冲液。所述的99mTc源一般是其盐，例如Na99mTcO4。根据本专利技术的制备方法，通常在步骤(1)的标记结束后，例如用已知的Radio-HPLC法，Sep-Pak反相色谱柱、SephadexG-25柱、YMC-PackODS-AC18分析柱等纯化后计算其标记率。根据本专利技术的制备方法，在步骤(2)的偶联反应中，所述原料SBZ-HYNIC为已知物质，结构为：所述另一原料可从市场购得，例如BioMatrik(嘉兴博美)公司的系列产品。本专利技术中R1为其他定义的步骤(2)的偶联剂可由原料SBZ-HYNIC制备获得，例如磺酸基的酯化反应，还可由与具有羧酸苯基的醛发生腙键反应。所述偶联反应在反应物的混合溶液中进行，溶剂可选自如二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)、二甲基亚砜(DMSO)等；反应pH值可调节到8-9之间，例如8.5；温度可以为15-50℃，优选接近室温，例如25℃；所述反应的时间可以为2-30小时，反应过程中，可用HPLC检测反应过程并收样。当使用高效液相色谱时，可以在0-5min内使用流动相为体积比为100:0的流动相A：流动相B；之后至35min左右使用流动相为体积比为20:80的流动相A:流动相B；流动相A可以为含0.05％三氟乙酸的去离子水，流动相B可以为含0.05％三氟乙酸的乙腈。本专利技术经研究发现，本专利技术99mTc的放射性标记配合物与Avidin具有特异性结合，而Avidin可以特本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种

【技术特征摘要】
1.一种99mTc的放射性标记配合物，所述配合物具有核心鳌合配体，该配体以下式L1或其立体异构体形式为其配体前体：其中：-L-选自如下所示的连接臂：R各自独立的选自H、任选被羟基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、-NH2；n为2-8的整数，例如2、3、4、5、6、7、8；s为0-6的整数，例如0、1、2、3、4、5、6；R1为H，-SO3H，-COOH，或所述磺酸、羧酸药学上可接受的盐或酯。2.根据权利要求1所述的标记配合物，其特征在于，所述配合物具有辅助的协同配体，其选自水溶性膦(例如三苯基膦三间磺酸钠盐TPPTS)，N-三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)、N-二(羟乙基)甘氨酸、葡庚糖酸盐、乙二胺-N,N’-二乙酸酯(EDDA)、3-苯甲酰基吡啶(BP)、吡啶-2-偶氮-p-二甲苯胺(PADA)；优选地，L选自式d结构的连接臂，n为3-5的整数，s为2-3的整数，优选地，n为3，s为2；优选地，R1为H、-SO3H，-COOH；优选地，协同配体可相同或不同，独立地选自：N-三(羟甲基)甲基甘氨酸、三苯基膦三间磺酸钠盐；优选地，L1为下式的化合物或其立体异构体：3.根据权利要求1-2任一项所述的标记配合物，其特征在于所述标记配合物为下式：4.一种分子探针，其特征在于：其具有如权利要求1-3任一项所定义的标记配合物。5.一种药物组合物，所述组合物包含有效量的权利要求1-3任一项所定义的标记配合物。优选地，所述药物组合物是可注射制剂，其含有所述标记配合物和可注射的载体。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是一种放射性诊断显像剂。优选所述显像剂是指作为SPECT的显像剂。7.一种药物系统，所述系统包含有效量的权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾兵，王凡，李立强，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11