具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂以及含此的虾用饲料组合物制造技术

本发明专利技术有关于一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其包含免疫调节性多醣成分以及核酸佐剂，确实可更有效提升虾体的免疫基因表现，达到有效增进抗病力等功效，可添加于虾用饲料组合物中。

Shrimp feed additive with immunomodulation function and feed composition containing shrimp

The present invention has an immune regulating function of shrimp feed additive, which contains immunoregulatory polysaccharides and nucleic acid adjuvant. It can effectively improve the immune gene expression of shrimp body, effectively enhance the efficacy of disease resistance, and can be added to the shrimp feed combination.

【技术实现步骤摘要】
具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂以及含此的虾用饲料组合物
本专利技术是有关于一种水产养殖用饲料添加剂，特别是有关于一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂以及含此的虾用饲料组合物。
技术介绍
生物性免疫调节剂为促进虾先天性免疫力(innateimmunity)的关键技术，由于虾仅具有先天性免疫力，而不具备适应性免疫力(adaptiveimmunity)，无法产生针对特定病原感染后发展出来的记忆性免疫细胞，因此也无法发展出虾的疫苗。免疫多醣属当今最热门的健康食品之一，不少产品标榜其具有强化免疫功能的活性，但并非所有多醣均具有生理功效，必须在免疫细胞具有特定受体，才可以经由多醣-受体结合作用，进而活化免疫细胞功能。以哺乳动物而言，树状突细胞及巨噬细胞为体内主要高度表现Dectin-1的细胞，可以辨识特定免疫多醣，如beta-glucan的分子结构，藉由此结合作用可活化其免疫活性。目前已知含有未甲基化CpG模组(motif)的DNA(或称CpGDNA)片段，可使用于小鼠、人、猪及牛等哺乳动物用的疫苗，不仅大为增强适应性免疫细胞活性，CpGDNA片段更具备活化先天性免疫力活性，但以化学方法合成的CpGDNA片段，不仅合成费时，无法大量合成且价格昂贵，合成的CpGDNA片段必须以化学修饰核酸之间的磷酸二酯键，以硫取代磷，降低DNA分解酶(DNAase)分解CpGDNA片段的速率。再者，CpGDNA片段具有种别特异性，适用于哺乳动物与适用于水产养殖动物的CpGDNA，二者序列不同且无法彼此替换使用。近年来，由于大量人工繁殖虾苗和人工养虾的兴起，虾类疾病日益严重，其存活率一般约仅50％，造成养虾业严重的损失。虾类仅具有先天性免疫力(innateimmunity)，并不具备脊椎动物对病原发展出的适应性免疫力(adaptiveimmunity)，难以藉由疫苗产生针对特定病原感染后诱发的特异性记忆性免疫细胞，更无虾用饲料可促进虾先天性免疫力。有鉴于此，亟需开发一种虾用饲料添加剂以及含此的虾用饲料组合物，以促进虾类免疫力。
技术实现思路
因此，本专利技术的一个方面在于提供一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，藉由添加复合免疫调节剂，可有效提升虾体的免疫基因表现，达到有效增进抗病力的功效，又可使虾体增色。本专利技术的另一方面在于提供一种具有免疫调节功能的虾用饲料组合物，藉由添加上述虾用饲料添加剂，可有效提升虾体的免疫基因表现，达到有效增进抗病力的功效，又可使虾体增色。根据本专利技术的上述方面，提出一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，包含核酸佐剂以及免疫调节性多醣成分。在上述实施例中，虾用饲料添加剂包含核酸佐剂及免疫调节性多醣成分。在一例示中，前述序列可包含至少一CpG模组，而前述免疫调节性多醣成分则包含菇类水性萃取物。前述菇类可源自于一菇类，且此菇类可包含小火焰菌属(Flammulinaspp.)、香菇属(Lentinulaspp.)及/或侧耳属(Pleurotusspp.)。在上述实施例中，上述核酸佐剂的序列可例如SEGIDNO:1所示的序列。在上述实施例中，上述菇类可包含但不限于金针菇(Flammulinavelutipes(Fr.)Sing.)、香菇(Lentinulaedodes(Berk.)Pegler)及/或白精灵菇(whitekingoystermushroom；Pleurotusnerbrodensis)。在上述实施例中，前述菇类水性萃取物为热水萃取物。在上述实施例中，前述核酸佐剂与免疫调节性多醣成分的重量比可例如为1：4000至4：1000。在上述实施例中，前述核酸佐剂与免疫调节性多醣成分的重量比可例如为1：2000。根据本专利技术的另一方面，提出一种具有免疫调节功能的虾用饲料组合物，包含基本配方以及复合免疫调节剂(即，本专利技术的虾用饲料添加剂)。依据本专利技术一实施例，上述具有免疫调节功能的虾用饲料组合物的口服剂量可例如为受试对象的平均体重的3％，以调节受试对象的免疫相关基因的表现量。依据本专利技术一实施例，上述核酸佐剂占口服剂量的含量可例如为1ppm至4ppm。依据本专利技术一实施例，上述核酸佐剂占口服剂量的含量可例如为1ppm至2ppm。依据本专利技术一实施例，上述免疫调节性多醣成分占口服剂量的含量可例如为0.10重量百分比至0.40重量百分比。依据本专利技术一实施例，上述免疫调节性多醣成分占口服剂量的含量可例如为0.20重量百分比至0.40重量百分比。依据本专利技术一实施例，上述免疫相关基因可包含但不限于虾抗菌蛋白(Crustin)基因、虾粘附蛋白(Peroxinectin)基因及/或转谷氨酰胺酶(transglutaminase，TGase)基因。依据本专利技术一实施例，上述受试对象可例如为白虾(Litopenaeusvannamei)。应用本专利技术的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其包含免疫调节性多醣成分以及核酸佐剂，确实可更有效提升虾体的免疫基因表现，达到有效增进抗病力等功效，可添加于虾用饲料组合物中。附图说明为让本专利技术的上述和其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附附图的详细说明如下：图1是绘示根据本专利技术一实施例的菇类免疫多醣的制造方法的部分流程图；图2是绘示根据本专利技术一实施例的免疫调节性多醣成分浓度与葡萄糖浓度标准曲线的曲线图；图3是绘示根据本专利技术一实施例以虾淋巴细胞平台评估不同划分物的相对细胞存活率；图4是绘示根据本专利技术一实施例以虾淋巴细胞平台检测核酸佐剂的相对细胞存活率；图5是显示本专利技术数个实施例的不同配方的虾用饲料组合物的虾体照片；图6A至图6B是绘示根据本专利技术一实施例的虾淋巴血细胞吞噬FITC标定的金黄色葡萄球菌的流式细胞分析图(图6A)与阳性反应细胞的百分比(图6B)；图7A至图7C是分别绘示根据本专利技术数个实施例的虾抗菌蛋白(Crustin)基因(图7A)、虾粘附蛋白(Peroxinectin)基因(图7B)及/或转谷氨酰胺酶(transglutaminase，TGase)基因(图7C)的相对表现量；图8是绘示根据本专利技术数个实施例的实验虾经攻毒试验后的累积死亡率；其中，符号说明：100：方法101/110/111/113/115/117/119/120/121/123/125/127/129/130/131/133/135/137/139：步骤。具体实施方式承前所述，本专利技术提供一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其包含免疫调节性多醣成分及核酸佐剂，可添加于虾用饲料中，虾只经摄食后，可有效提升虾体的免疫基因表现，达到有效增进抗病力的功效。申言之，本专利技术此处所称的虾用饲料添加剂，可进一步添加于基本配方中。在一实施例中，前述基本配方的成分及其比例并无特别限制，可以是任何市售虾用饲料，但未添加复合免疫调节剂者。本专利技术此处所称的「虾」并不限于特定品种。在一些实施例中，虽以白虾(Litopenaeusvannamei)为例进行各项免疫调节功效的评估，惟本专利技术适用的虾种类不限于此处所举。本专利技术此处所称的虾用饲料添加剂是指具有促进虾体的免疫活化功能的多种成分，其包含免疫调节性多醣成分以及核酸佐剂。在一些实施例中，前述核酸佐剂与免疫调节性多醣成分的来源并无特别限制。在一例示中，前述核酸佐剂是指具有促进虾体的免疫活化功能的核酸序列。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于包含：核酸佐剂，其中核酸佐剂的序列包含至少一CpG模组；以及免疫调节性多醣成分，其中该免疫调节性多醣成分包含菇类水性萃取物，该菇类水性萃取物是源自于菇类，且该菇类包含小火焰菌属(Flammulina spp.)、香菇属(Lentinula spp.)及/或侧耳属(Pleurotus spp.)。

【技术特征摘要】
1.一种具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于包含：核酸佐剂，其中核酸佐剂的序列包含至少一CpG模组；以及免疫调节性多醣成分，其中该免疫调节性多醣成分包含菇类水性萃取物，该菇类水性萃取物是源自于菇类，且该菇类包含小火焰菌属(Flammulinaspp.)、香菇属(Lentinulaspp.)及/或侧耳属(Pleurotusspp.)。2.根据权利要求1所述的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于其中该序列包含如SEGIDNO:1所示的序列。3.根据权利要求1所述的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于其中该菇类包含金针菇(Flammulinavelutipes(Fr.)Sing.)、香菇(Lentinulaedodes(Berk.)Pegler)及/或白精灵菇(whitekingoystermushroom；Pleurotusnerbrodensis)。4.根据权利要求1所述的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于其中该菇类水性萃取物为热水萃取物。5.根据权利要求1所述的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于其中该核酸佐剂与该免疫调节性多醣成分的重量比为1：4000至4：1000。6.根据权利要求1所述的具有免疫调节功能的虾用饲料添加剂，其特征在于其中该核酸佐剂与该免疫调节性多醣成分的重量比为1：2000。7.一种具有免疫调节功能的虾用饲料组合物，其特征在于包含：基本配...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄秀琪，刘俊宏，吴美莉，柯冠铭，
申请(专利权)人：屏东科技大学，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71