一种Isoforrensin A衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用，Isoforrensin A衍生物的结构如式(I)所示。式(I)所述Isoforrensin A衍生物的制备方法，包括1)将Isoforretin A，DMAP溶于二氯甲烷，加入三乙胺，保温0℃～5℃下滴加3‑氯丙酰氯，滴毕后将反应液升温至20℃～25℃并搅拌反应；2)至TLC检测反应完全后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取水层三次，合并有机层，有机层用稀盐酸洗涤三次，饱和食盐水洗涤三层。收集有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩后得粗品。粗品经快速硅胶柱色谱纯化得纯品目标产物式(I)化合物。
A Isoforrensin A derivative and its application in the preparation of antineoplastic agents
A Isoforrensin A derivative and its application in the preparation of antitumor drugs. The structure of Isoforrensin A derivative is shown in formula (I). The preparation method of Isoforrensin A derivative (I), including 1), dissolves Isoforretin A, DMAP in dichloromethane, adding three ethylamine, adding 3 chloroprol chloroyl chloride at 0 to 5 C, and then heating the reaction liquid to 20 to 25 C and stirring reaction; 2) adding saturated hydrogen carbonate to the reaction liquid after the TLC detection reaction is complete. Sodium water quenching reaction, using dichloromethane to extract water layer three times, combined organic layer, organic layer washed with diluted hydrochloric acid three times, saturated salt water washed three layers. The organic layer was collected by anhydrous Magnesium Sulfate dry, filtered and concentrated. The purified product was purified by fast silica gel column chromatography and purified product (I) compound was obtained.
【技术实现步骤摘要】
一种IsoforrensinA衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
：本专利技术涉及一种新型二萜类化合及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
：中国专利申请CN106631804A公开了一种提取自香茶菜属植物的化合物如下式(IsoforresinA，简称IsoA)，该化合物为一种对应-贝壳杉烷二萜衍生物，该申请中指出IsoA是硫氧还蛋白-1抑制剂((thioredoxin-1，简称Trx-1)，先期的研究表明，Trx-1在许多肿瘤细胞和肿瘤组织中异常高表达，因此，筛选新的Trx1选择性抑制剂是医药研发的重要需求，它们可能是极为有效的治疗肿瘤及其他Trx1介导的疾病的药物。实验结果表面IsoA对部分肿瘤细胞具有一定抑制效果，且能够延长肝癌荷瘤小鼠的生存期，但IsoA的抗癌谱较窄，仅对肝癌等少数几种肿瘤治疗效果明显。因此在IsoA基础上进行结构改性提供一种对不同肿瘤具有抑制效果的对应-贝壳杉烷二萜衍生物成为现有技术中亟待解决的问题。
技术实现思路
我们在现有的IsoA基础上通过化学改性得到一种新的化合物，并惊奇的发现可以明显提高其抗癌效果。为解决前述技术问题本专利技术采用的技术方案是，提供一种IsoforrensinA衍生物，其特征在于所述一种IsoforrensinA衍生物的结构如式(I)所示本专利技术还提供了式(I)所述IsoforrensinA衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤，1)将IsoforretinA，DMAP溶于二氯甲烷，加入三乙胺，保温0℃～5℃下滴加3-氯丙酰氯，滴毕后将反应液升温至20℃～25℃并搅拌反应。2)至TLC检测反应完全后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取水层三次，合并有机层，有机层用稀盐酸洗涤三次，饱和食盐水洗涤三层。收集有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩后得粗品。粗品经快速硅胶柱色谱纯化得纯品目标产物式(I)化合物；所述IsoforretinA、DMAP、三乙胺和3-氯丙酰氯的摩尔比为1:0.15～0.25：2～4：2～4。本专利技术还提供了如式(I)所示IsoforrensinA衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术还提供了如式(I)所示IsoforrensinA衍生物在制备抗胃癌药物中的应用。本专利技术还提供了一种药物组合物，其特征是所述药物组合物包括式(I)所示IsoforrensinA衍生物。本专利技术还提供了一种药物制剂，包含治疗有效量的式(I)所示IsoforrensinA衍生物以及药学上可接受的赋形剂。在研究中我们发现，将IsoA进行氯丙酰化后的得到的式(I)化合物，能够显著提高对Trx1的体外抑制活性，在对肿瘤细胞的体外抑制实验中，对胃癌细胞等表现出了更好的抑瘤效果，基于体外抑制实验的结果，在对胃癌荷瘤小鼠的抑瘤实验中，采用式(I)化合物给药的实验小鼠与采用同样剂量IsoA的实验小鼠相比，表现出了更好的抑瘤效果，说明式(I)所示化合物在经过化学改性后，显著提高了对胃癌的抑制效果，具有制成新的胃癌治疗药物的潜力。。具体实施方式实施例1式(I)化合物的合成1)将IsoforretinA，DMAP(4-二甲氨基吡啶)溶于二氯甲烷，加入三乙胺，保温0℃～5℃下滴加相应的3-氯丙酰氯，滴毕后将反应液升温至20℃～25℃并搅拌反应。2)至TLC检测反应完全后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取水层三次，合并有机层，有机层用稀盐酸洗涤三次，饱和食盐水洗涤三层。收集有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩后得粗品。粗品经快速硅胶柱色谱纯化得纯品目标产物式(I)化合物；IsoforretinA、DMAP、三乙胺和3-氯丙酰氯的摩尔比为1:0.2：2。对产物进行元素分析的结果为：C，59.56；H，6.61；O，28.15。产物的化学式为C31H41ClO1113C-NMR(CDCl3)结果如下表C的位置12345678913C-NMR77.738.448.440.140.369.469.138.449.6C的位置10111213141516171813C-NMR43.330.533.779.476.7152.1208.8116.419.7C的位置19202122232425262713C-NMR23.623.6170.221.0170.221.0170.221.0170.2C的位置2829303113C-NMR21.0173.138.039.0药理实施例1式(I)化合物在体外反应中对Trx1活性抑制作用实验材料:Trx1蛋白购自北京义翘神州生物技术有限公司，Trx1活性检测试剂盒购自美国CaymenChemical公司。实验方法:1)按照试剂盒提供实验方法配制Trx1检测液；2)分别加入系列稀释的式(I)化合物(终浓度0-100μM)；3)37℃孵育30min；4)每孔加入加5μLNADPH，37℃孵育10min；5)每孔加入10μl荧光底物，37℃孵育5min；6)酶标仪检测7)计算相对酶活力体外条件下Trx活性检测方法:体外条件下Trx活性检测采用ThioredoxinActivityFluorescentAssayKit(CaymenChemical)来进行。根据试剂盒说明书的要求，在0.02μM的Trx样品中加入2μL的不同浓度的式(I)化合物(0.1μMto100μM)，随后每个样品各加入5μL的β-NADPH，37℃孵育30min.最后加入荧光底物，在反应30至60分钟时间段，通过在酶标仪(ThermoScientificVarioskanFlashfluorescentmicroplatereader)记录518nm的发射波长(488nm激发)来计算Trx1活性。实验结果见下表实验结果表明，式(I)化合物在浓度达到0.5μM时开始表现出对Trx1的明显抑制活性(相对酶活力86.5％)，且随着浓度增加对Trx1活性的抑制能力逐渐增加。与IsoA相比，对Trx1的抑制活性明显提高。药理实施例2式(I)化合物对不同类型的实体肿瘤细胞的抑制效果式(I)化合物(纯度＞99％)溶解于DMSO，配置100uM母液，-20℃保存。选择十种常见恶性实体肿瘤(包括肺癌，胃癌，乳腺癌，结直肠癌，肝癌，宫颈癌，食管癌，口腔癌，前列腺癌，胰腺癌)，体外培养上述十种肿瘤的肿瘤细胞系及其中五种肿瘤的对应组织正常细胞系，如下：肺癌：人正常肺上皮细胞HBEC，人肺癌细胞A549，SK-MES-1胃癌：人正常胃粘膜上皮细胞RGM-1，人胃癌细胞MGC-803，SGC-7901乳腺癌：人正常乳腺上皮细胞MCF10A，人乳腺癌细胞MCF7，MDA-MB-231结直肠癌：人正常结直肠粘膜细胞FHC，人结直肠癌细胞Caco-2，LOVO2肝癌：人正常肝细胞LO2，人肝癌细胞HepG2，Hep3B宫颈癌：人宫颈癌细胞Hela食管癌：人食管癌细胞EC109口腔癌：人舌鳞癌细胞SCC9前列腺癌：人前列腺癌细胞PC3胰腺癌：人胰腺癌细胞PANC-1对于以上各种细胞系，使用不同浓度的式(I)化合物处理24h，然后通过MTT法检测它对不同细胞的抑制效果，计算IC50，结果如下表所示细胞系HBECRGM-1MCF10AFHCLO2IC50(μM)115.0148.694.3137.7本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种Isoforrensin A衍生物，其特征在于所述Isoforrensin A衍生物的结构如式(I)所示
【技术特征摘要】
1.一种IsoforrensinA衍生物，其特征在于所述IsoforrensinA衍生物的结构如式(I)所示2.如权利要求1中式(I)所述IsoforrensinA衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤，1)将IsoforretinA，DMAP溶于二氯甲烷，加入三乙胺，保温0℃～5℃下滴加3-氯丙酰氯，滴毕后将反应液升温至20℃～25℃并搅拌反应；2)至TLC检测反应完全后，向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，用二氯甲烷萃取水层三次，合并有机层，有机层用稀盐酸洗涤三次，饱和食盐水洗涤三层。收...
【专利技术属性】
技术研发人员：张春泽，张伟华，刘艳迪，付文政，
申请(专利权)人：天津市人民医院，
类型：发明
国别省市：天津,12
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