一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法，先将刺梨果洗净后加至Vc‑Na和K2S2O5的混合液中打浆，在所得浆液中加入纤维素酶和果胶酶的混合酶液进行酶解，在酶解果浆中加入FeCl3，再接种椭圆酿酒酵母菌种的扩培液，25℃发酵24h，然后加入ZnCl2，继续在25℃发酵12h，得到发酵液，最后将所得发酵液依次通过不锈钢滤网和硅藻土过滤器，得到所述富含SOD的刺梨酵素。本发明专利技术的制备方法工艺温和，既能保存刺梨果原有的营养成分，又能显著提高刺梨产品中SOD酶活。

A method for the preparation of SOD rich roxroxis

The invention provides a preparation method of SOD rich rosin, which is first washed and added to the mixture of Vc Na and K2S2O5, and the mixed enzyme solution of cellulase and pectinase is added to the pulp to be enzymatically hydrolysed, FeCl3 is added to the enzymolysis pulp and then inoculated with the diffuser of oval Saccharomyces cerevisiae, at 25. 24h was fermented, then ZnCl2 was added, 12h was fermented at 25, and the fermentation broth was obtained. Finally, the fermentation broth was passed through the stainless steel filter and the diatomite filter to get the SOD rich rosin. The preparation method of the invention is mild, and can not only preserve the original nutritional components of thorn pear fruit, but also significantly improve the activity of SOD enzyme in Rosa roxburghii.

【技术实现步骤摘要】
一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法
本专利技术属于食品加工
，具体涉及一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法。
技术介绍
超氧化物歧化酶，SOD，是生物体内重要的抗氧化酶，广泛分布于各种生物体内，如动物，植物，微生物等。SOD具有特殊的生理活性，是生物体内清除自由基的首要物质。SOD在生物体内的水平高低意味着衰老与死亡的直观指标；现已证实，由氧自由基引发的疾病多达60多种。它可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD的地位越来越重要。SOD是氧自由基的自然天敌，是机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。刺梨是云贵高原特有的野生资源，以贵州为主产地。刺梨属于蔷薇属的野生灌木植物，刺梨果实为球形浆果，成熟时为黄棕色，是集药用、保健、食用、观赏为一体的绿色水果，具有独特的芳香味，营养丰富，尤其是Vc、Vp和SOD含量高，有“三王水果”之美誉。近年刺梨果汁、刺梨果脯等初加工产品日益丰富，关于诸如SOD的刺梨精深加工的产品，则是市场趋势。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法，所制得的刺梨酵素丰富了刺梨精深加工产品系列，特别是富含SOD的刺梨精深加工产品。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，原料预处理：将刺梨果洗净后加至Vc-Na和K2S2O5的混合液中打浆，在所得浆液中加入纤维素酶和果胶酶的混合酶液进行酶解，得到酶解果浆；步骤2，菌种扩培：将椭圆酿酒酵母菌种活化后进行扩培，得到扩培液；步骤3，原液发酵：在步骤1所得酶解果浆中加入FeCl3，再接种步骤2所得扩培液，25℃发酵24h，然后加入ZnCl2，继续在25℃发酵12h，得到发酵液；步骤4，发酵液处理，将步骤3所得发酵液依次通过不锈钢滤网和硅藻土过滤器，得到所述富含SOD的刺梨酵素。进一步地，步骤1中是将80-150kg刺梨果加至100LVc-Na和K2S2O5的混合液打浆，再加入500mL纤维素酶和果胶酶的混合酶液。进一步地，所述Vc-Na和K2S2O5的混合液中Vc-Na的浓度为50-200g/100L、K2S2O5的浓度为10-100g/100L；所述纤维素酶和果胶酶的混合酶液中纤维素酶的浓度为10-30g/500mL、果胶酶的浓度为5-20g/500mL。进一步地，步骤1中酶解条件为30-50℃，静置酶解1-5h。进一步地，步骤2中扩培是将活化后的椭圆酿酒酵母菌种先用5-20°麦芽原汁1L、在20-35℃下扩培至1.0×106个-2.5×107个细胞/mL，再全部接种至10°的麦芽原汁20L、在20-35℃条件下扩培至1.0×106个-2.5×107个细胞/mL。进一步地，步骤3中FeCl3是以水溶液的形式加入的，加入量为1L，FeCl3的浓度为1-10g/1L。进一步地，步骤3中扩培液和酶解果浆的用量比为20L：100-500L。进一步地，ZnCl2是以水溶液的形式加入的，加入量为1L，ZnCl2的浓度为1-8g/1L。进一步地，所述不锈钢滤网为40-200目的不锈钢滤网。本专利技术的显著优点在于：1、选用刺梨原料绿色天然，本身具有极高的营养价值；2、加工条件温和，能够最大限度保留原料本身的营养价值；3、通过发酵条件控制，显著提高刺梨酵素当中SOD酶活，加强营养价值。具体实施方式为了使本专利技术所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但是本专利技术不仅限于此。本专利技术所述的椭圆酿酒酵母菌种通过以下步骤分离得到：1、首先在贵州六盘水市盘县的刺梨种植基地选取1颗成熟非常高的刺梨果实，在研钵中磨细，取样1g放入装有10ml生理盐水和玻璃珠的100ml三角瓶中去。激烈震荡约10min,使菌体分散并悬浮与液体中。用无菌吸管吸取1ml刺梨果悬液注入盛有9ml生理盐水的试管中，吸取三次并混匀。再去一只无菌吸取管，从此试管中吸取1ml，注入另一盛有9ml生理盐水的试管中，取三次并混匀。同法类推制成10-3、10-4、10-5、10-6、10-7的各种稀释度的刺梨果悬液。2、取新鲜麦芽汁200mL在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。加水约400mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。将糖化液用4—6层纱布过滤。将滤液稀释到10波美度，pH约6.4，加入2％琼脂即成。121℃灭菌30min。培养皿采用干热灭菌(蒸汽灭菌锅)。已过滤灭菌的培养基进行分装。分装完毕后，用棉塞堵住管口。塞好棉塞的试管和锥形瓶盖上厚纸用绳捆札，然后灭菌。培养基灭菌后，趁培养基未凝固时进行制作斜面培养基和平板培养基。3、将麦芽汁琼脂培养基加热熔化，冷却至55-60℃。加入抗生素1ml并混匀。在超净工作台的酒精灯火焰旁倒制平板。将上述培养基的5个培养基的四个平板分别标上10-3、10-4、10-5、10-6、10-7五种稀释度。取5只无菌吸管，分别从四种刺梨果悬液的稀释液中各取0.1ml。对号放于已标记好稀释度的平板中，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻涂布均匀。再重复此步骤。4、将培养基平板倒置，与30-32℃温箱中培养2天。观察培养后长出的酵母菌的单个菌落，分别挑取并接种于斜面培养基上，再培养。待菌苔长好后，检查是否有杂菌，若有则需再一次进行分离纯化，直到获得纯菌株培养物。实施例1步骤1，采摘100kg纯天然、无污染、无腐败的刺梨果作为原料，采用SSTQXJ061型洗果机将刺梨果实清洗干净，将100g的Vc-Na和25g偏重亚硫酸钾溶于100L饮用水，采用MKK-XM-307型多功能水果蔬菜破碎机将果实打碎成原果浆(约200L)。将16g纤维素酶和10g果胶酶分别溶于500mL饮用水，再将纤维素酶溶液和果胶酶溶液与原果浆混合均匀，加热至40℃，静置酶解2h。步骤2，菌种扩培将刺梨果园中提取分离的椭圆酿酒酵母菌种活化，用10°麦芽原汁1L，在25℃条件下扩培至1.5×107个细胞/mL，再全部接种至20L浓度10°的麦芽原汁，在25℃条件下扩培至1.5×107个细胞/mL。步骤3，原液发酵将2.6g的FeCl3溶于1L饮用水，再将此FeCl3溶液与原果浆搅匀，再将上述20L扩培液全部接种至200L刺梨原果浆，在25℃条件下发酵24h。再将1g的ZnCl2溶于1L饮用水，再将此ZnCl2溶液与上述发酵液搅匀，在25℃条件下继续发酵12h。步骤4，发酵液处理将发酵液通过160目不锈钢滤网(自制)，得到初滤液；将初滤液通过WK-220型硅藻土过滤器，得到精滤液，即所述富含SOD的刺梨酵素。本实施例所采用的对照样通过以下方法制备得到：步骤1，采摘1kg纯天然、无污染、无腐败的刺梨果作为原料，清洗干净，将1g的Vc-Na和0.25g偏重亚硫酸钾溶于1L饮用水，用破碎机将果实打碎成原果浆。将0.16g纤维素酶和0.1g果胶酶分别溶于5mL饮用水，再将纤维素酶溶液和果胶酶溶液与原果浆混合均匀，加热至40℃，静置酶解2h。步骤2，加入10°麦芽原汁210mL，静置。步骤3，将0.0026g的FeCl3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，原料预处理：将刺梨果洗净后加至Vc‑Na和K2S2O5的混合液中打浆，在所得浆液中加入纤维素酶和果胶酶的混合酶液进行酶解，得到酶解果浆；步骤2，菌种扩培：将椭圆酿酒酵母菌种活化后进行扩培，得到扩培液；步骤3，原液发酵：在步骤1所得酶解果浆中加入FeCl3，再接种步骤2所得扩培液，25℃发酵24h，然后加入ZnCl2，继续在25℃发酵12h，得到发酵液；步骤4，发酵液处理，将步骤3所得发酵液依次通过不锈钢滤网和硅藻土过滤器，得到所述富含SOD的刺梨酵素。

【技术特征摘要】
1.一种富含SOD的刺梨酵素的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，原料预处理：将刺梨果洗净后加至Vc-Na和K2S2O5的混合液中打浆，在所得浆液中加入纤维素酶和果胶酶的混合酶液进行酶解，得到酶解果浆；步骤2，菌种扩培：将椭圆酿酒酵母菌种活化后进行扩培，得到扩培液；步骤3，原液发酵：在步骤1所得酶解果浆中加入FeCl3，再接种步骤2所得扩培液，25℃发酵24h，然后加入ZnCl2，继续在25℃发酵12h，得到发酵液；步骤4，发酵液处理，将步骤3所得发酵液依次通过不锈钢滤网和硅藻土过滤器，得到所述富含SOD的刺梨酵素。2.根据权利要求1所述的富含SOD的刺梨酵素的制备方法，其特征在于：步骤1中是将80-150kg刺梨果加至100LVc-Na和K2S2O5的混合液打浆，再加入500mL纤维素酶和果胶酶的混合酶液。3.根据权利要求2所述的富含SOD的刺梨酵素的制备方法，其特征在于：所述Vc-Na和K2S2O5的混合液中Vc-Na的浓度为50-200g/100L、K2S2O5的浓度为10-100g/100L；所述纤维素酶和果胶酶的混合酶液中纤维素酶的浓度为10-30g/500mL、果胶酶的浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘华峰，刘洁，李三暑，杨会勇，钟权华，程际原，
申请(专利权)人：厦门特吉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35