【技术实现步骤摘要】
一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法
本专利技术属于细胞分离领域,更具体地说,尤其涉及一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法。
技术介绍
前体脂防细胞是一类具有增殖和向成热脂肪细胞分化的特异化的前体细胞,它的存在和作用持续于人和动物的一生。在20世纪60年代初,国外即有人开始从事脂肪细胞培养的研究工作。对前体脂防细胞原代和传代培养主要使用的是体外分离系统。体外分离的前体脂肪细胞能够再现体内的生理过程,有助于研究者完整地认识脂肪组织产生和增生的全过程,并且可以直接观察各种因素对这个过程的调控,是研究脂肪细胞分化,脂肪生成、代谢以及肥胖等各种疾病发生机理的必备工具。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法,包括如下步骤:S1、将绵羊清洗干净并牵至无菌室中,再使用酒精清洗2-3次,然后将绵羊颈部处死,取出腹股沟脂肪组织5-12g,放入酒精中浸泡10-20s,再放入无菌硫化铅溶液中;S2、取出脂肪组织并置入D-Hanks液中漂洗3-6次,去除结缔组织和血管,再清洗1-2次,置于无菌烧杯中;S3、将S2中处理后的脂肪组织切碎,体积不大于1mm3,切碎后加入到恒温培养基中,加入0.07-0.08%的I型胶原酶,并将恒温培养基置于37℃的恒温培养箱中,控制培养箱内二氧化碳的浓度的5%;S4、使S3中处理后的脂肪组织碎片消化1-2h,完全消化后加入相同体积的完全培养液,终止消化,再通筛网筛除杂质,得到消化后的液体;S5、将S4中获取的液体置于离心管中,设 ...
【技术保护点】
一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将绵羊清洗干净并牵至无菌室中,再使用酒精清洗2‑3次,然后将绵羊颈部处死,取出腹股沟脂肪组织5‑12g,放入酒精中浸泡10‑20s,再放入无菌硫化铅溶液中;S2、取出脂肪组织并置入D‑Hanks液中漂洗3‑6次,去除结缔组织和血管,再清洗1‑2次,置于无菌烧杯中;S3、将S2中处理后的脂肪组织切碎,体积不大于1mm
【技术特征摘要】
1.一种绵羊脂肪前体细胞的分离方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、将绵羊清洗干净并牵至无菌室中,再使用酒精清洗2-3次,然后将绵羊颈部处死,取出腹股沟脂肪组织5-12g,放入酒精中浸泡10-20s,再放入无菌硫化铅溶液中;S2、取出脂肪组织并置入D-Hanks液中漂洗3-6次,去除结缔组织和血管,再清洗1-2次,置于无菌烧杯中;S3、将S2中处理后的脂肪组织切碎,体积不大于1mm3,切碎后加入到恒温培养基中,加入0.07-0.08%的I型胶原酶,并将恒温培养基置于37℃的恒温培养箱中,控制培养箱内二氧化碳的浓度的5%;S4、使S3中处理后的脂肪组织碎片消化1-2h,完全消化后加入相同体积的完全培养液,终止消化,再通筛网筛除杂质,得到消化后的液体;S5、将S4中获取的液体置于离心管...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵俊星,张婷,秦旭泽,李戡,王建新,
申请(专利权)人:山西农业大学,
类型:发明
国别省市:山西,14
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