一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法技术

本发明专利技术属于载药微球制剂，本发明专利技术公开了一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法。通过将PLGA溶于六氟异丙醇作为壳层溶液，将PTX和ETP溶于二氯甲烷溶液中作为核层溶液，搅拌后将两种溶液分别注入一次性1ml塑料注射器中，利用静电纺丝机进行高压静电喷射，之后进行冷冻干燥，制备出包埋PTX和ETP的PLGA微球。本发明专利技术制备的同轴载药微球，可缓释控释，并可用于注射。本发明专利技术通过对该微球的表征观察及其粒径的测定，得知该载药微球的平均粒径大小为3μm，其表面光滑无孔洞。本发明专利技术制备的复合微球安全无毒性，可用于骨肉瘤的术后治疗，其特有的缓释效应有利于减小抗肿瘤药物对人体的伤害，并提高药物的抗肿瘤活性，具有广阔的研究价值和发展前景。

【技术实现步骤摘要】
一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法
本专利技术属于生物组织工程细胞支架材料，具体涉及具有抗骨肉瘤作用的PLGA载药微球的制备方法，尤其涉及一种通过静电纺丝机制备具有缓释作用的同轴PLGA载药微球的方法。
技术介绍
骨肉瘤(OS)是一种恶性结缔组织肿瘤，骨肉瘤的发病率在恶性肿瘤中占据首位。骨肉瘤是恶性骨肿瘤的常见、高恶性程度和预后不良。几个月后，它就会扩散到肺部。在截肢3年后，生存率仅为5％到20％。因此，我们应该高度评价它。从目前到目前为止，有许多作者在术前化疗中使用顺铂(DDP)、阿霉素(ADR)、甲氨叶酸(mtx-cf)、BCD、异磷酰胺(IFO)和环磷酰胺(CTX)等治疗骨肉瘤，且无疾病的存活率为42％。微球(microspheres)是指药物分散或被吸附在高分子聚合物基质中而形成的微小球状实体，其粒径一般在1-250μm之间。由于微球制剂具有长效缓释或靶向作用，可以大大提升患者用药的方便性、依从性，在临床上已突显优势，是一种极具潜力的剂型。此外，微球制剂产品附加值较大，市场前景广阔，近年来已成为药物研发的热点。紫杉醇PTX(Paclitaxel)是一种从裸子植物红豆杉的树皮分离提纯的天然次生代谢产物，经临床验证，具有良好的抗肿瘤作用，特别是对癌症发病率较高的卵巢癌、子宫癌和乳腺癌等有特效。体外实验证明紫杉醇具有显著的放射增敏作用，可能是使细胞中止于对放疗敏感的G2和M期。依托泊苷ETP(etoposide)为细胞周期特异性抗肿瘤药物，作用于DNA拓扑异构酶Ⅱ，形成药物-酶-DNA稳定的可逆性复合物，阻碍DNA修复。实验发现这复合物可随药物的清除而逆转，使损伤的DNA得到修复，降低了细胞毒作用。因此，延长药物的给药时间，可能提高抗肿瘤活性。紫杉醇和依托泊苷虽然抗肿瘤作用良好，但毒副作用大，主要是骨髓抑制，心脏毒性和神经毒性，现在研究进展往脂质体方向，用来降低抗肿瘤药物的神经毒性。聚乳酸羟基乙酸共聚物(Poly(lactic-co-glycolicacid)，PLGA)是由乳酸和羟基乙酸两种单体随机聚合得到的，是一种可降解的有机高分子化合物，由于其良好的生物相容性、无毒性以及生物可降解性而被广泛应用于制药、医用工程材料和3D生物组织工程支架。在药物载体的应用中，这种复合微球可用于注射，并且具有一定的力学强度，载体材料无毒性可被人体正常代谢。但是要制备出可同时用于注射的、且能够很好解决药物释放初期突释问题的达到缓释效果的微球制剂还需进一步研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点，旨在提供一种利用静电纺丝技术，制备出既具有抗肿瘤效应的，可缓释控释PTX(Paclitaxel)和ETP(etoposide)的PLGA复合微球。根据本方法制备的内部镶嵌有PTX和ETP的PLGA微球制剂，其粒径范围在0.8μm到4.5μm，平均粒径为3.03±0.5μm到3.04±0.5μm，颗粒体积小且均匀，满足体内注射的粒径范围。本专利技术为解决技术问题采用如下技术方案步骤：一种利用静电纺丝同轴制备PLGA载药微球的方法，包括如下步骤：分别取PLGA，PTX和ETP溶于两种不同的溶液中，磁性搅拌后分别注入两个1ml塑料注射器内进行静电纺丝，通过调节纺丝工艺参数，使得接收板上收集到微球，之后进行冷冻干燥，于-20℃下保存备用。作为优选，所用PTX和ETP用二氯甲烷溶液来溶解，以达到完全溶解。作为优选，用来溶解PLGA和药物(PTX、ETP)的溶液分别为六氟异丙醇和二氯甲烷溶液。作为优选，所纺PLGA溶液的浓度为5～6％(g/ml)，PTX和ETP的浓度为0.1％(g/ml)。作为优选，室温下，壳层溶液进行磁力搅拌4h，核层溶液涡旋混合，从而得到均一稳定的核壳层溶液。作为优选，静电纺丝的高压电压为10～20KV，收集距离为10～20cm，纺丝速度为：壳层为1.075ml/h，核层为0.12ml/h。专利技术的另一个目的是提供所述微球在体外释放和降解中的应用。本专利技术具有以下优点：①所得微球上表面光滑，与其他微球上的孔隙相比，本专利技术的微球的光滑表面可以缓解所载药物的突释情况；②且得到的复合微球满足能够被注射入生物体内的要求，可直接作用于肿瘤组织部位；③所用载体模型为生物相容性良好、无毒性、一定时间可在体内降解的材料；④复合载药微球制剂，能够有效实现药物缓慢长期释放。本专利技术利用的溶剂六氟异丙醇具有优良的溶解能力，制备的微球制剂的粒径为0.8～4.5μm，在能被注射范围之内。并且所用材料无毒性，具有很好的生物相容性，可在植入体内降解，可直接注射到达靶部位，具有很大的研究价值和发展前景。附图说明图1是采用本专利技术实施例1制备的载PTX和ETP的微球用SEM观察的照片。图2是采用本专利技术实施例2制备的载PTX和ETP的PLGA微球在SEM下的照片。图3是采用本专利技术实施例3制备的载PTX和ETP的PLGA微球在SEM下的照片。图4是不同载药方式的PLGA微球用SEM观察的照片，其中A、B、C分别为载PTX微球，载ETP微球，载PTX+ETP微球。图5是不同载药方式的PLGA微球的粒径分布图，A、B、C分别为载PTX微球，载ETP微球，载PTX+ETP微球。图6是不同载药方式的PLGA微球的体外释放曲线。图7是PLGA微球的体外降解变化。具体实施方式下面结合附图和以下具体实施例，对本专利技术作进一步的描述；但这些实施例仅用于解释本专利技术，而非限制本专利技术的范围。实施例1①称取60mgPLGA溶于1ml六氟异丙醇中，配制成6％(g/ml)的壳层PLGA溶液，室温下磁力搅拌4h；用二氯甲烷溶液配制一定浓度的PTX和ETP溶液，作为核层溶液，涡旋混匀。②调节静电纺丝的纺丝电压为10KV、纺丝距离为20cm、纺丝的速度壳层和核层分别为1.075ml/h和0.12ml/h，然后冷冻干燥得到PLGA载药微球，于-20℃下保存备用。其扫描电镜结果如图1所示，平均粒径范围为1～4μm，且微球形状较规则，有黏连。实施例2①称取50mgPLGA溶于1ml六氟异丙醇中，配制成5％(g/ml)的PLGA溶液，室温下磁力搅拌4h，得到均一稳定的壳层溶液；用二氯甲烷溶液配制成一定浓度的PTX和ETP溶液，涡旋混匀后得到芯层溶液。②调节静电纺丝机的纺丝电压为15KV、纺丝距离为15cm、纺丝速度壳层和核层分别为1.075ml/h和0.12ml/h，高压静电纺得到PLGA载药微球，冷冻干燥后-20℃保存。其电镜结果如图2所示，粒径范围为1～3.5μm，大小较不均匀，有牵丝。实施例3①称取50mgPLGA溶于1ml六氟异丙醇溶液中，配制成5％(g/ml)的PLGA溶液，室温下磁力搅拌4h，得到均一稳定的壳层溶液；用二氯甲烷溶液配制成一定浓度的PTX和ETP溶液，涡旋混匀后得到芯层溶液。②调节静电纺丝机的纺丝电压为18KV、纺丝距离为15cm、纺丝速度壳层和核层分别为1.075ml/h和0.12ml/h，高压静电纺得到PLGA载药微球，冷冻干燥后-20℃保存。其电镜结果如图3所示，形状较规则。实施例4(1)载PTX的PLGA复合微球的制备①精密称取50mgPLGA，溶于1ml六氟异丙醇中，配制成含5％(g/ml)的PLGA溶液，作为壳层溶液，室温下磁力本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法，其特征在于通过如下步骤获得微球：取PLGA，PTX和ETP分别溶于不同的溶液中，搅拌之后的溶液分别注入两个1ml塑料注射器内，利用静电纺丝机，调节纺丝工艺参数进行静电喷射，所得的微球进行冷冻干燥后，于‑20℃下保存备用。

【技术特征摘要】
1.一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法，其特征在于通过如下步骤获得微球：取PLGA，PTX和ETP分别溶于不同的溶液中，搅拌之后的溶液分别注入两个1ml塑料注射器内，利用静电纺丝机，调节纺丝工艺参数进行静电喷射，所得的微球进行冷冻干燥后，于-20℃下保存备用。2.根据权利要求1所述的一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法，其特征为，PTX和ETP用二氯甲烷来溶解，确保其充分溶解。3.根据权利要求1所述的一种利用静电纺丝机同轴制备可注射PLGA载药微球的方法，其特征为，所述用来溶解PLGA和药物(PTX、ETP)的溶液分别为六氟异丙醇和二氯甲烷溶液。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：张梅，唐亚军，朱振华，赵贺，姚霁航，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22