一种唾液酸衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供的一种唾液酸衍生物及其制备方法和应用，其中唾液酸衍生物为一种小分子抗肿瘤化合物(TCC‑Neu5Gc)，可以利用其特异的、广谱的性质对肿瘤进行杀伤。TCC‑Neu5Gc靶向体内的肿瘤，经过代谢生长在肿瘤细胞的表面，形成TCC‑Neu5Gc配体。肿瘤附近的巨噬细胞识别后，将其吞噬，同时释放出肿瘤碎片并呈递给其它免疫细胞，引发抗肿瘤免疫反应。本发明专利技术提供的唾液酸衍生物对多种肿瘤均有效，对肿瘤转移也有抑制效果。此外，本发明专利技术提供的唾液酸衍生物不仅可以注射，还可以通过口服发挥作用，其细胞毒性和动物毒性均很低，因此具有很高的药用价值和广阔的应用前景。

Sialic acid derivative and preparation method and application thereof

The present invention provides a sialic acid derivative and its preparation method and application, in which the sialic acid derivative is a small molecule antitumor compound (TCC Neu5Gc), which can kill the tumor by its specific and broad-spectrum properties. TCC - Neu5Gc targets the tumor in vivo, which is metabolized on the surface of tumor cells to form TCC Neu5Gc ligand. Macrophages near the tumor recognize them, swallow them, release tumor fragments and present them to other immune cells, triggering anti-tumor immune responses. The sialic acid derivative provided by the invention is effective in many kinds of tumors, and also has inhibitory effect on tumor metastasis. In addition, the sialic acid derivatives provided by the invention can not only be injected, but also play a role by oral administration. Their cytotoxicity and animal toxicity are very low, so it has high medicinal value and broad application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种唾液酸衍生物及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物医疗
，特别涉及一种唾液酸衍生物及其制备方法和应用。
技术介绍
唾液酸为N-乙酰神经胺酸或任何其酯或其醇羟基的衍生物，位于细胞膜糖蛋白侧链末端，是细胞膜表面受体的重要组成部分，在发生各种炎症性疾病及恶性肿瘤病时其数量和浓度会增高，如肺癌、胃癌、肠癌、肝癌、卵巢癌等疾病中。传统治疗癌症的方式包括手术、放疗和化疗，但这些方式均无法有效消灭癌症。进入21世纪以后，随着肿瘤学和免疫学的深入发展，肿瘤免疫疗法作为最新最先进的疗法应运而生。肿瘤免疫治疗是指应用免疫学原理和方法，提高肿瘤细胞的免疫原性和对效应细胞杀伤的敏感性，激发和增强机体抗肿瘤免疫应答，并应用免疫细胞和效应分子输注宿主体内，协同机体免疫系统杀伤肿瘤、抑制肿瘤生长。肿瘤免疫治疗近来备受关注，是肿瘤治疗领域的焦点。近几年，肿瘤免疫治疗的好消息不断，目前已在一些肿瘤类型如黑色素瘤，非小细胞肺癌等的治疗中展示出了强大的抗肿瘤活性，并已有肿瘤免疫治疗药物获得美国FDA(FoodandDrugAdministration,FDA)批准临床应用。肿瘤免疫治疗由于其卓越的疗效和创新性，在2013年被《科学》杂志评为年度最重要的科学突破。肿瘤免疫治疗有望成为继手术，化疗，放疗，靶向治疗后肿瘤治疗领域的一场革新。目前针对肿瘤免疫治疗的关注焦点主要集中在免疫检查点抑制剂的研发，主要针对三个作用靶点，包括细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxicTlympHocyte-associatedantigen-4，CTLA-4)、程序性死亡受体1(programmedcelldeath1，PD-1)和程序性死亡配体1(programmedcelldeath1ligand1，PD-L1)。在肿瘤的免疫治疗中，巨噬细胞发挥着重要作用，其可以直接吞噬肿瘤细胞，而且还可以将肿瘤细胞消化后会呈递肿瘤特异抗原给其它免疫细胞，如NK细胞、细胞毒性T细胞等，并释放免疫激活因子。这样，肿瘤部位会进一步吸引极具攻击性的NK细胞和细胞毒性T细胞，从而达到抑制肿瘤生长的目的。在巨噬细胞表面有一类特殊的生物标志物，即唾液酸结合免疫球蛋白凝集素1(Sialicacid-bindingimmunoglobulin-typelectins，SIGLEC-1)，其又称CD169或Sialoadhesin。CD169+巨噬细胞通过该受体与其它细胞表面的配体识别并结合，完成细胞间的“交流”，在抗原呈递、调节淋巴细胞增殖、诱导炎症反应和免疫耐受中发挥重要作用。SIGLEC-1具有特异结合唾液酸的能力，但是对唾液酸的亲和力不高，因此在肿瘤免疫反应中CD169+巨噬细胞难以发挥抗肿瘤功能，如何提高CD169对唾液酸的亲和力，激发CD169+巨噬细胞的肿瘤杀伤功能是人们一直关注的问题。
技术实现思路
为解决以上
技术介绍
中提到的问题，本专利技术提供一种唾液酸衍生物，其化学式为：进一步地，包括以下制备步骤：S100、制备TosSiamethylester；S200、将S100制备的TosSiamethylester与叠氮化钠加入到DMF中制得N3Siamethylester；S300、制备化合物C4包括S310-S340：S310、将S200制得的N3Siamethylester与Pd/C催化剂和无水甲醇混合，并加入乙酰氯调节至PH为1-2，得到混合物M4后，在H2气氛下搅拌；S320、将S310中搅拌后的物质通过TLC监测至反应完全时，进行过滤以除去Pd/C催化剂，得到混合物M5；S330、将混合物M5去除溶剂后的残留物R3与EDC·HCl、HOBT、三乙胺、TCC-COOH以及DMF混合后，得到混合物M6；S340、将混合物M6在黑暗中搅拌48小时后，将蒸发除去溶剂后的残余物R4通过柱层析纯化，得到浅黄色固体，即制得化合物C4；S400、制备唾液酸衍生物包括S410-S420：S410、将S300制备的化合物C4和甲醇、NaOH水溶液混合，并在室温下搅拌一定时间，然后用HCl水溶液调节至pH为7，得到混合物M7；S420、将混合物M7完全除去溶剂后的残余物R4通过柱层析纯化，得到浅黄色固体，即制得唾液酸衍生物。进一步地，S100制备TosSiamethylester的方法包括如下所述：S110、将唾液酸、三氟乙酸与无水甲醇混合，并在室温下搅拌至澄清后，蒸发除去溶剂，得到白色固体；S120、将S110制得的白色固体与P2O5在真空中干燥过夜，并与无水吡啶共蒸发两次以除去痕量的水，然后溶于无水吡啶中，得到混合物M1S130、将混合物M1冷却至0℃后，加入对甲苯磺酰氯，并加热至室温，搅拌一定时间后得到混合物体M2；S140、将混合物M2采用减压加热除去溶剂得到残留物R1；S150、将残留物R1通过柱层析纯化，得到白色固体，即制得TosSiamethylester。进一步地，S200中，将S100制备的TosSiamethylester和叠氮化钠加入到DMF中，并加热至80℃一段时间后，得到混合物M3；将混合物M3完全去除溶剂后得到的残留物R2通过柱层析，得到浅黄色固体，即制得N3Siamethylester。进一步地，所述TosSiamethylester的化学式为：进一步地，所述N3Siamethylester的化学式为：进一步地，所述化合物C4的化学式为：一种如上任意所述的唾液酸衍生物在制备治疗肿瘤药物方面的应用。本专利技术提供的一种唾液酸衍生物及其制备和应用，其中唾液酸衍生物为这种化合物为N-乙酰神经氨酸单糖的9位取代基衍生物(TCC-Neu5Gc)，这种化合物应用在抗肿瘤中发现其具有良好的抑制肿瘤生长的效果。其作用机理如下：该化合物进入体内后，由于肿瘤存在Warburg效应而富集在肿瘤部位，其被肿瘤细胞摄取后在细胞内一系列酶的催化代谢及转运下在细胞膜表面表达。由于该化合物对CD169具有很高的亲和力，因此表达该化合物的肿瘤细胞会吸引CD169+巨噬细胞，并触发巨噬细胞的吞噬功能，而且，巨噬细胞作为抗原呈递细胞，在将吞噬的肿瘤细胞消化后会呈递肿瘤抗原给其它免疫细胞，尤其是细胞毒性T细胞。这样，肿瘤部位会进一步吸引极具攻击性的细胞毒性T细胞，从而达到抑制肿瘤生长的目的。TCC-Neu5Gc作为免疫调节剂，不仅可以直接注射发挥作用，而且通过口服方式也可以激活机体免疫系统，因此具有很高的药用价值和广阔的应用前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术提供的TCC-Neu5Gc的细胞毒性测试效果图；图2为化合物TCC-Neu5Gc在体外诱导CD169+巨噬细胞吞噬杀伤肿瘤细胞的效果图；图3为尾静脉注射化合物TCC-Neu5Gc的体内抗肿瘤效果；图4为口服化合物TCC-Neu5Gc的体内抗肿瘤效果图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种唾液酸衍生物，其特征在于，化学式为：

【技术特征摘要】
1.一种唾液酸衍生物，其特征在于，化学式为：2.根据权利要求1所述的唾液酸衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：S100、制备TosSiamethylester；S200、将S100制备的TosSiamethylester与叠氮化钠加入到DMF中制得N3Siamethylester；S300、制备化合物C4，包括S310-S340：S310、将S200制得的N3Siamethylester与Pd/C催化剂和无水甲醇混合，并加入乙酰氯调节至PH为1-2，得到混合物M4后，在H2气氛下搅拌；S320、将S310中搅拌后的物质通过TLC监测至反应完全时，进行过滤以除去Pd/C催化剂，得到混合物M5；S330、将混合物M5去除溶剂后的残留物R3与EDC·HCl、HOBT、三乙胺、TCC-COOH以及DMF混合后，得到混合物M6；S340、将混合物M6在黑暗中搅拌48小时后，将蒸发除去溶剂后的残余物R4通过柱层析纯化，得到浅黄色固体，即制得化合物C4；S400、制备唾液酸衍生物，包括S410-S420：S410、将S300制备的化合物C4和甲醇、NaOH水溶液混合，并在室温下搅拌一定时间，然后用HCl水溶液调节至pH为7，得到混合物M7；S420、将混合物M7完全除去溶剂后的残余物R4通过柱层析纯化，得到浅黄色固体，即制得唾液酸衍生物。3.根据权利要求2所述的唾液酸衍生物的制备方法，其特征在于，S100制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：李柱，闫旭，韩绪春，郭岗，黄国锋，
申请(专利权)人：厦门诺康得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35