一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，包括囊泡载体

【技术实现步骤摘要】
一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂及其应用


[0001]本专利技术属于肿瘤免疫治疗
，具体涉及一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂及其应用
。

技术介绍

[0002]免疫细胞接合剂是一种能连接免疫细胞
(
主要是
T
细胞或者
NK
细胞
)
和肿瘤细胞，增强免疫细胞杀伤肿瘤细胞效果的物质，一般由抗体片段和细胞因子构成
。
针对
T
细胞的接合剂，主要针对
T
细胞上的
CD3
靶点，通过
CD3
ε
抗体片段结合
CD3
，激活
T
细胞功能
。
针对
NK
细胞的接合剂，主要针对
NK
细胞上的
CD16A
靶点，通过
CD16A
抗体片段结合
CD16A
，激活
NK
细胞功能
。
细胞因子
IL15
可以刺激
NK
细胞增殖并提高
NK
细胞的激活水平
。
双特异性抗体或者三特异性抗体相对单抗具有更强的抗肿瘤功能，但是其制备复杂，易产生错配，体内半衰期短，靶向病灶的有效剂量低，易产生系统性的毒副作用
。

技术实现思路

[0003]本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂
。
[0004]本专利技术的技术方案如下：
[0005]一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，包括囊泡载体
、
能特异性连接免疫细胞的第一分子和能特异性连接肿瘤细胞的第二分子，该第一分子和第二分子装载于上述囊泡载体的表面，该囊泡载体为质膜囊泡或外泌体囊泡
。
[0006]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述囊泡载体为质膜囊泡，所述第一分子能特异性连接
NK
细胞，所述第二分子能特异性连接
HER2
阳性的肿瘤细胞
。
[0007]进一步优选的，所述第一分子为
CD16A
抗体片段，所述第二分子由膜结合型
IL15
抗体片段和
HER2
抗体片段组成
。
[0008]更进一步优选的，所述
CD16A
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.01
所示，所述膜结合型
IL15
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.02
所示，所述
HER2
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.03
所示
。
[0009]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述囊泡载体为外泌体囊泡，所述第一分子能特异性连接
NK
细胞，所述第二分子能特异性连接
BCMA
阳性的肿瘤细胞
。
[0010]进一步优选的，所述第一分子为
CD16A
抗体片段，所述第二分子为
BCMA
抗体片段
。
[0011]更进一步优选的，所述
CD16A
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.01
所示，所
BCMA
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.04
所示
。
[0012]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述囊泡载体为外泌体囊泡，所述第一分子能特异性连接
T
细胞，所述第二分子能特异性连接
BCMA
阳性的肿瘤细胞
。
[0013]进一步优选的，所述第一分子为
CD3
ε
抗体片段，所述第二分子为
BCMA
抗体片段
。
[0014]更进一步优选的，所述
CD3
ε
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.05
所示，所
BCMA
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.04
所示
。
[0015]本专利技术的有益效果是：如图1所示，本专利技术可提高瘤内滞留时间，降低系统暴露，特异性的激活瘤内
NK
细胞或者
T
细胞，增强抗肿瘤效果
。
附图说明
[0016]图1为本专利技术的囊泡结合剂
(
即免疫细胞肿瘤细胞结合剂
)
的作用示意图
。
[0017]图2为本专利技术实施例1中
293TaCD16A
×
mIL15
×
aHER2
稳转细胞的鉴定图
。
[0018]图3为本专利技术实施例1中
K562aCD16A
×
mIL15
×
aHER2
稳转细胞的鉴定图
。
[0019]图4为本专利技术实施例1中
aCD16A
×
mIL15
×
aHER2
质膜囊泡对
NK
增殖的影响图
。
具体实施方式
[0020]以下通过具体实施方式结合附图对本专利技术的技术方案进行进一步的说明和描述
。
实施例
1aCD16A
×
mIL15
×
aHER2
质膜囊泡
[0021](1)
质粒的构建
[0022]aCD16A
×
mIL15
×
aHER2
质粒由
aCD16A(CD16A
的抗体片段，
SEQ ID NO.01)、mIL15(
膜结合的
IL15
，
SEQ ID NO.02)
及
aHER2(HER2
的抗体片段，
SEQ ID NO.03)
构建，序列如下
(SEQ ID NO.06)
：
[0023][0024][0025]将上述序列整合到
pCDH
‑
CMV
载体上即可
(pCDH
‑
CMV
‑
aCD16A
×
mIL15
×
aHER2)。
[0026](2)
稳转细胞系的构建
[0027]慢病毒包装：将
293T
细胞按
80
％的细胞密度铺到6孔板中，过夜贴壁后，更换成无血清的
DMEM
培养基
。
每孔加入2μ
g
目的质粒
(pCDH
‑
CMV
‑
aCD16A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，其特征在于：包括囊泡载体
、
能特异性连接免疫细胞的第一分子和能特异性连接肿瘤细胞的第二分子，该第一分子和第二分子装载于上述囊泡载体的表面，该囊泡载体为质膜囊泡或外泌体囊泡
。2.
如权利要求1所述的一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，其特征在于：所述囊泡载体为质膜囊泡，所述第一分子能特异性连接
NK
细胞，所述第二分子能特异性连接
HER2
阳性的肿瘤细胞
。3.
如权利要求2所述的一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，其特征在于：所述第一分子为
CD16A
抗体片段，所述第二分子由膜结合型
IL15
抗体片段和
HER2
抗体片段组成
。4.
如权利要求3所述的一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，其特征在于：所述
CD16A
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.01
所示，所述膜结合型
IL15
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.02
所示，所述
HER2
抗体片段的核苷酸序列如
SEQ ID NO.03
所示
。5.
如权利要求1所述的一种免疫细胞肿瘤细胞结合剂，其特征在于：所述囊泡载体为外泌体囊泡，所述第一分子能特异性连接
NK
细胞，所述第二分子能特...

【专利技术属性】
技术研发人员：李柱，王先武，田云鹏，
申请(专利权)人：厦门诺康得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：