抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂制造技术

本发明专利技术涉及一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其包括：脂质体负载的血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白、唾液酸、天然多糖和生理盐水。该鼻腔喷雾制剂以脂质体负载的ACE2胞外段重组蛋白(liposome‑ACE2)为主，可竞争性抑制病毒与宿主细胞的结合，预防和治疗多种病毒导致的呼吸道感染，增强抗呼吸道病毒感染鼻腔喷雾制剂的抗病毒范围和临床适应症。另外，该鼻腔喷雾制剂可以将药物直接喷雾到病毒繁殖的部位，使用方便简单。

【技术实现步骤摘要】
抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂。
技术介绍
呼吸道传染病是指由病毒、细菌、支原体和衣原体等病原体通过呼吸道感染侵入而引起的有传染性的疾病，常见的冬春季呼吸道传染病包括由流感病毒导致的流行性感冒、由冠状病毒、腺病毒等引起的普通感冒、急性肺炎等。新型冠状病毒2019-nCov是一种以前尚未在人类中发现的冠状病毒，通过呼吸道入侵肺部并引发重症肺炎是其致病的最主要模式。新型冠状病毒2019-nCov在进化上与SARS病毒相近，同属冠状病毒β属，与SARS冠状病毒的基因序列相似性为82％。新型冠状病毒2019-nCov与宿主细胞结合方式也与SARS冠状病毒相似，当SARS-CoV进入人体后，它首先与人血管紧张素转换酶2(ACE2)蛋白结合，入侵宿主细胞，同时导致蛋白质降解，ACE2蛋白的数量减少，机体从而遭到破坏，肺部受到损伤，引起肺功能衰竭。2019-nCoV病毒S-蛋白与SARS-CoV的S-蛋白相比，5个关键氨基酸有4个发生了变化，但变化后的氨基酸，却整体性上非常完美的维持了SARS病毒S-蛋白与ACE2蛋白相互作用的结构构象，与人ACE2蛋白的亲和力还是很强。目前，针对2019-nCoV新型冠状病毒引起的急性肺炎，缺乏针对病原体的有效抗病毒药物，以隔离治疗、对症支持治疗为主。血管紧张素转化酶2(ACE2)与血管紧张素转换酶(ACE)同属于庞大的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)和激肽-缓激肽系统(KKS)家族。ACE2蛋白主要生理作用是降低AngⅠ、AngⅡ和Des-Arg缓激肽，促进Ang1-7生成，后者通过特异性Mas受体发挥舒张血管、抗炎、抗增生、抗纤维化和抗肺泡上皮细胞凋亡等作用，达到拮抗AngⅡ的生物学作用。基于ACE2蛋白在2019-nCoV新型冠状病毒、SRAS病毒感染中的重要作用，ACE2成为抗病毒治疗的重要靶点，针对病毒S蛋白与人ACE2特异性结合的特点，选择性破坏两者结合，比如S蛋白的抗体、可溶性ACE2片段等；针对病毒感染后ACE2缺失造成的急性肺损伤，可以通过外源性补充ACE2缓解肺部损伤。北美曾开展一项Ⅱ期临床研究，对10例确诊的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者应用人重组rACE2注射治疗后，发现AngⅡ水平快速下降，Ang1-7水平也得到回升，初步显示在人体补充外源性ACE2能够重塑肺部ACE2/ACE平衡，治疗急性肺损伤具有良好的安全性和可行性。但根据在人和小鼠中的药代动力学研究结果表明，rACE2的清除率较高，半衰期仅为数小时，临床应用受到限制。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，可竞争性抑制病毒与宿主细胞的结合，预防和治疗多种病毒导致的呼吸道感染。根据本专利技术实施例的一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其包括：脂质体负载的血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白、唾液酸、天然多糖和生理盐水。根据本专利技术的一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，以脂质体负载的ACE2胞外段重组蛋白(liposome-ACE2)为主，竞争性抑制新型冠状病毒2019-nCov和SARS病毒通过与ACE2蛋白结合入侵宿主细胞，同时重塑肺部ACE2/ACE平衡，治疗急性肺损伤。抗呼吸道病毒感染鼻腔喷雾制剂的另一重要成分唾液酸，其可竞争性抑制流感和副流感病毒与宿主细胞的结合，增强抗呼吸道病毒感染鼻腔喷雾制剂的抗病毒范围和临床适应症。另外，该鼻腔喷雾制剂可以将药物直接喷雾到病毒繁殖的部位，使用方便简单。另外，根据本专利技术上述实施例提出的一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，还可以具有如下附加的技术特征：根据本专利技术的实施例，血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白为血管紧张素转换酶2(ACE2)胞外段重组蛋白。可选地，所述血管紧张素转换酶2(ACE2)胞外段重组蛋白的浓度为0.5mg/mL。具体地，脂质体为二棕榈酰磷脂酰胆碱DPPC、胆固醇Chol、聚乙二醇磷脂DSPE-PEG2K和磷脂-聚乙二醇-马来酰亚胺DSPE-PEG-MAL的混合物，其中各成分按照DPPC:Chol:DSPE-PEG2K:DSPE-PEG-MAL为60:40:4:1的摩尔比混合。具体地，所述唾液酸为N-乙酰神经氨酸。进一步地，所述N-乙酰神经氨酸的浓度为1mg/mL～8mg/mL。具体地，所述天然多糖为岩藻多糖、壳聚糖及其衍生物的一种或几种。进一步地，所述岩藻多糖的浓度为0.6mg/mL；所述壳聚糖的浓度为0.4mg/mL。可选地，将脂质体负载的ACE2胞外段重组蛋白、N-乙酰神经氨酸、岩藻多糖和壳聚糖溶于生理盐水，调节pH至6.5-7.0，即获得所述鼻腔喷雾制剂。可选地，所述呼吸道病毒包括流感病毒、副流感病毒、2019新型冠状病毒和SRAS病毒、hCoV-NL63病毒。本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。附图说明图1为脂质体liposome的表征；图2为脂质体负载ACE2胞外段重组蛋白liposome-ACE2的表征；图3为脂质体负载ACE2胞外段重组蛋白liposome-ACE2的透射电镜；图4为实施例3中鼻腔喷雾制剂对SARSCoV感染的细胞融合抑制影响；图5为实施例3中鼻腔喷雾制剂对2019-nCoV感染的细胞融合抑制影响。具体实施方式以下通过特定的具体实例说明本专利技术的技术方案。应理解，本专利技术提到的一个或多个方法步骤并不排斥在所述组合步骤前后还存在其他方法步骤或在这些明确提到的步骤之间还可以插入其他方法步骤；还应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。而且，除非另有说明，各方法步骤的编号仅为鉴别各方法步骤的便利工具，而非为限制各方法步骤的排列次序或限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
的情况下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。为了更好的理解上述技术方案，下面更详细地描述本专利技术的示例性实施例。虽然显示了本专利技术的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本专利技术而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。本专利技术采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面参考具体实施例，对本专利技术进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本专利技术。实施例1liposome-ACE2制备按照脂质体混合物(lipidmixture)成份摩尔比为DPPC:Chol:DSPE-PEG2K:DSPE-PEG-MAL为60:40:4:1，依次称取脂质体各成份，总的摩尔数约为26μmol，然后加入5mLCHCl3溶解，旋蒸除去氯仿(CHCl3)，再使用真空本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，包括：/n脂质体负载的血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白、唾液酸、天然多糖和生理盐水。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，包括：
脂质体负载的血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白、唾液酸、天然多糖和生理盐水。


2.如权利要求1所述的抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，血管紧张素转换酶2(ACE2)重组蛋白为血管紧张素转换酶2(ACE2)胞外段重组蛋白。


3.如权利要求2所述的抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，所述血管紧张素转换酶2(ACE2)胞外段重组蛋白的浓度为0.5mg/mL。


4.如权利要求1所述的抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，脂质体为二棕榈酰磷脂酰胆碱DPPC、胆固醇Chol、聚乙二醇磷脂DSPE-PEG2K和磷脂-聚乙二醇-马来酰亚胺DSPE-PEG-MAL的混合物，其中各成分按照DPPC:Chol:DSPE-PEG2K:DSPE-PEG-MAL为60:40:4:1的摩尔比混合。


5.如权利要求1-4中任一项所述的抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李柱，李勤斌，田云鹏，赵绍军，
申请(专利权)人：厦门诺康得生物科技有限公司，来复厦门基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35