盐生植物内生细菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一种盐生植物内生细菌及其应用。盐生植物内生细菌完整命名为铜绿假单胞菌L10(Pseudomonas aeruginosa L10)，该菌株在2014年07月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9406。本发明专利技术提供的铜绿假单胞菌L10能够定殖在芦苇体内，在石油污染盐渍化土壤中能够促进植物健康生长，显著提高宿主植物的生物量，协同宿主植物促进土壤中石油烃的降解。

Endophytic bacteria of halophytes and their application

The invention belongs to the field of microorganism technology, in particular to a halophyte endophytic bacterium and its application. The endophytic bacteria of the halophyte were completely named L10 (Pseudomonas aeruginosa L10). The strain was stored in the general microorganism center of the Chinese microbe preservation Management Committee on 07 2014, and the preservation was numbered as CGMCC No.9406. Pseudomonas aeruginosa L10 can be colonized in reed. It can promote the healthy growth of plants in the oil contaminated saline soil, significantly increase the biomass of the host plant, and promote the degradation of petroleum hydrocarbon in the soil with the host plant.

【技术实现步骤摘要】
盐生植物内生细菌及其应用
本专利技术属于微生物
，具体涉及一种盐生植物内生细菌及其应用。
技术介绍
土壤石油污染对人类健康和生态系统安全构成了严重威胁，是目前亟待解决的重要环境问题。在我国，大部分油田位于土壤盐渍化地区，石油在开采、储运、加工等过程中进入土壤，容易形成石油污染盐渍化土壤。大量含盐钻井废液进入土壤，也容易造成井场周围石油污染土壤盐渍化[文献1：QinX,TangJC,LiDS,etal.Effectofsalinityonthebioremediationofpetroleumhydrocarbonsinasaline-alkalinesoil[J].Lettersinappliedmicrobiology,2012,55(3):210-217]。研究证明，土壤盐渍化使石油烃类污染物的持久性显著增加，由此带来的环境风险也随之加大[文献2：LiH,BoufadelMC.Long-termpersistenceofoilfromtheExxonValdezspillintwo-layerbeaches[J].NatureGeoscience,2010,3(2):96-99]。对石油污染盐渍化土壤治理和修复，是目前面临的一项重要任务。植物修复(Phytoremediation)是利用植物及其相关微生物清除环境中的污染物，具有成本低、环境友好、可持续利用等优势，已成为全球环境修复技术与工程科学研究的前沿领域之一[文献3：AbhilashPC,JamilS,SinghN.Transgenicplantsforenhancedbiodegradationandphytoremediationoforganicxenobiotics[J].Biotechnologyadvances,2009,27(4):474-488]。利用植物修复石油污染土壤，国内外已有很多报道[文献4：刘五星,骆永明,滕应,等.石油污染土壤的生态风险评价和生物修复III.石油污染土壤的植物-微生物联合修复.土壤学报,2008,45(5):994-999；文献5：Escalante-EspinosaE,Gallegos-MartínezME,Favela-TorresE,etal.ImprovementofthehydrocarbonphytoremediationratebyCyperuslaxusLam.inoculatedwithamicrobialconsortiuminamodelsystem[J].Chemosphere,2005,59(3):405-413；文献6：MartinBC,GeorgeSJ,PriceCA,etal.Theroleofrootexudedlowmolecularweightorganicanionsinfacilitatingpetroleumhydrocarbondegradation:currentknowledgeandfuturedirections[J].ScienceoftheTotalEnvironment,2014,472:642-653]，但对于石油污染盐渍化土壤修复研究报道较少。近年来研究发现，种植盐生植物能加快土壤中石油污染物降解[文献7：WangZ,XuY,ZhaoJ,etal.Remediationofpetroleumcontaminatedsoilsthroughcompostingandrhizospheredegradation[J].Journalofhazardousmaterials,2011,190(1):677-685]。基于盐渍化土壤石油污染问题的艰巨性，引入盐生植物是加快污染土壤修复进程的重要途径。植物修复效率低、周期长以及石油污染物通过植物体挥发造成大气污染[文献8：WeyensN,vanderLelieD,TaghaviS,etal.Exploitingplant-microbepartnershipstoimprovebiomassproductionandremediation[J].Trendsinbiotechnology,2009,27(10):591-598]，这些因素制约植物修复技术的应用和发展。植物内生细菌(Endophyticbacteria)是从表面消毒的植物组织中分离得到或从植物内部获得的、能够定殖在健康植物各种组织和器官内，并未使植物的表型特征和功能发生改变的细菌。研究发现，植物内生细菌能提高宿主对环境污染物的耐受性，促进植物生长，并且能在植物组织中降解有机污染物，减少有毒污染物对食草动物的影响和向大气中挥发[文献9：NewmanLA,ReynoldsCM.Bacteriaandphytoremediation:newusesforendophyticbacteriainplants[J].TrendsinBiotechnology,2005,23(1):6-8；文献10：KhanS,AfzalM,IqbalS,etal.Plant–bacteriapartnershipsfortheremediationofhydrocarboncontaminatedsoils[J].Chemosphere,2013,90(4):1317-1332]。此外，与根际微生物相比，内生细菌生存竞争压力小，具有稳定的生境，在植物修复的实践中更具有优势[文献11：WeyensN,TruyensS,DupaeJ,etal.PotentialoftheTCE-degradingendophytePseudomonasputidaW619-TCEtoimproveplantgrowthandreduceTCEphytotoxicityandevapotranspirationinpoplarcuttings[J].EnvironmentalPollution,2010,158(9):2915-2919]。利用内生细菌协同宿主盐生植物修复石油污染盐渍化土壤是一新兴方向。盐生芦苇是黄河三角洲土壤盐渍化地区土著优势种[文献12：CaoD,ShiF,KoikeT,etal.HalophyteplantcommunitiesaffectingenzymeactivityandmicrobesinsalinesoilsoftheYellowRiverDeltainChina[J].CLEAN–Soil,Air,Water,2014,42(10):1433-1440]，能够广泛适应黄河三角洲石油污染与土壤盐碱化[文献13：熊运实.油田开发区水体的非点源石油污染试验研究-以胜利油田为例[J].地理研究,1993,(04):23-31.]，被认为是一种治理石油污染盐渍化土壤的修复植物工具种[文献14：聂明.芦苇及其根围微生物对石油污染响应的生态系统生态学研究[D].复旦大学,2010]。实际场地修复中，芦苇由于受到高盐和石油污染物胁迫，通常生长缓慢，生物量低，生长周期长，限制其修复效率。寻找一种促进植物生长和提高降解石油烃能力的方法是提高芦苇修复石油污染盐渍化土壤效率的关键。目前，关于盐生植物内生细菌促进盐渍化石油污染土壤中植物生长、提高植物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种盐生植物内生细菌，其特征在于分类命名为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，完整命名为铜绿假单胞菌L10(Pseudomonas aeruginosa L10)，该菌株在2014年07月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9406。

【技术特征摘要】
1.一种盐生植物内生细菌，其特征在于分类命名为铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，完整命名为铜绿假单胞菌L10(PseudomonasaeruginosaL10)，该菌株在2014年07月03日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.9406。2.一种权利要求1所述的盐生植物内生细菌的应用，其特征在于步骤如下：(1)将芦苇幼苗接种盐生植物内生细菌，接种后将芦苇幼苗种植于待修复的石油污染盐渍化土壤中，当芦苇成熟后进行刈割；(2)从芦苇接种后第二个生长季开始，每个生长季重新对芦苇接种盐生植物内生细菌，连续修复石油污染盐渍化土壤。3.根据权利要求2所述的盐生植物内生细菌的应用，其特征在于步骤(1)中接种的方法如下：①采用LB培养基，盐生植物内生细菌摇床培养至菌液OD600达到3.0，离心收集菌体，用磷酸缓冲液冲洗，采用10倍稀释法使1/2霍格兰营养液中菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴涛，许杰，谢文军，姚志刚，李甲亮，王怡，杨红军，孙春龙，
申请(专利权)人：滨州学院，
类型：发明
国别省市：山东,37