本发明专利技术公开了一株植物根际促生细菌。菌株从青海牦牛粪中分离，经鉴定为枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ），保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏名为：Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＱＭ３４，保藏日：２００８年０９月２２日，保藏号：ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２６６９；本发明专利技术ＱＭ３４菌株对１２种土传性植物真菌病原菌均有拮抗作用；菌株ＱＭ３４发酵液和ＱＭ３４发酵液的无细胞培养液对番茄早疫病有明显的防治效果，对番茄植株的生长有明显的促进作用，且能在番茄植株根际大量定殖。故本发明专利技术是用于番茄早疫病害生物防治的一株广谱性根际促生细菌，定会倍受人们青睐。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株植物根际促生细菌，可广谱防治多种植物土传真菌病害，在植物 根际可大量定殖，对植物的生长发育有明显的促进作用，属于农用微生物
， 也属于植物生物防治
技术背景从20世纪60年代末期以来，随着大量化学农药长期的不合理使用，植物病虫害 的化学防治严重威胁着农业经济的发展和人类的健康，已成为人类社会进入21世纪的 严重挑战。随着科学技术的发展，面对环境的日趋恶化，人们对有害生物的认识和农作物保 护策略发生了转变，从对有害生物的"斩尽杀绝"转变为"适度容忍"。农业部于2002年 启动实施了"无公害食品行动计划"，这标志着我国农业结构调整已进入新的发展阶段。 展望今后食品安全的发展需要，生物防治将成为病虫害防治的重要措施，有着广阔的 发展前景。但生物防治从整体上看仍存在一些不足 一是被用来筛选的样品材料主要集中在 根际土壤、被感染的病体组织、易感植株的内生菌等处，限制了微生物资源的多样性； 二是筛选的生防菌常常是针对某一种或某一类病原菌有较好的抑菌效果，缺乏抑菌的 广谱性；三是外界条件的变化会直接影响生防菌剂的生防机制和生防效果，即防效不 稳定；四是生防菌的生产和使用技术不够完善等等。为全面贯彻落实"预防为主，科 学防控，依法治理，促进健康"的生物防治方针，指导各地安全、科学、合理的使用 农药和综合防治，进一步促进农林业有害生物的无公害防治，保护生态环境和生物多 样性，结合目前我国农作物的防治结构，提出了一系列新的防治技术。生物防治的新技术之一就是分离和筛选植物根际促生菌(plant growth—promoting rhizobacteria, PGPR)，其能够高密度地在植物根际定殖，兼有抑制植物病原菌、根际 有害微生物，以及促进植物生长并增加作物产量的作用，更重要的是有些PGPR还能 诱导植物产生系统抗性(Induced systemic resistance, ISR)，从而提高植物整体的抗病能 力。故PGPR的深入研究和发展，将为解决植物土传病害防治这一难题展现诱人的前 景。番茄早疫病(Tomato Early Blight)又称为"轮纹病"或"夏疫病"，在番茄的整个生 长期间可随时随地普遍发生，是危害较严重的真菌病害之一。此病原的寄主范围广泛， 除危害番茄外，还可危害茄子、辣椒和马铃薯等茄科蔬菜作物。目前番茄早疫病害的防治主要依赖于化学药剂。国外虽然获得了一些有较好防治效果的拮抗菌，但没有专 门进行以番茄早疫病菌为防治对象的拮抗微生物的筛选工作，国内目前也仅仅局限于 简单的实验室筛选工作，拮抗微生物以酵母为主。
技术实现思路
技术问题本专利技术的目的正是为了克服上述现有技术的不足，提供一株能有效防 治番茄早疫病害、能有效促进植物生长、能有效定殖于植物根际、具有拮抗广谱性的、 有益的植物根际促生细菌菌株。技术方案本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的。本专利技术新型植物根际促生细菌菌株为枯草芽孢杆菌(5ac///^ ^"fc) QM34， 保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其单位简称为CGMCC， 保藏日2008年09月22日，保藏编号CGMCC No.2669。(下面简称及>s"^7& QM34)。本专利技术的及wZ^'fo QM34菌株是首次从青海牦牛粪中分离得到了广谱拮抗微生 物。寻找不同地理环境的微生物群落，从青海牦牛粪中开发和利用有益微生物资源， 在生防领域将是一个重大的突破。本专利技术及ra6"fcQM34菌株的形态特征为QM34菌落不透明，表面有皱褶，边 缘缺刻状；菌体形态杆状、革兰氏阳性，产生中生芽孢，芽孢椭圆。与已有的枯草芽 孢生防菌株相比，孢囊稍有膨大。本专利技术及w^/fc QM34菌株，对12种土传性植物真菌病原菌均有拮抗作用，特 别是对番茄早疫病菌有明显的抑制效果。因此，是一株具有广谱拮抗性的生防菌株。本专利技术5.犯6"&QM34菌株，对番茄早疫病害有明显的防治效果；对番茄植株的 生长有明显的促进作用；可在番茄植株根际大量定殖。因此是一株有潜在应用价值的 植物根际促生细菌。本专利技术5. w^/fo QM34菌株，是首次选育的番茄早疫病害的广谱拮抗性生防菌 株，是首次选育的以番茄早疫病害为主要防治对象，且兼有促生、防病等多功能的一 株植物根际促生细菌菌株。 附图说明图1为经不同稀释度的QM34菌株发酵液处理后，3个品种的番茄植株根际土壤 总芽孢杆菌数量的变化趋势。具体实施方式实施例l QM34菌株的分离筛选试验经梯度稀释法从青海牦牛粪中分离，经平板对峙生长法筛选得到一株植物根际促 生细菌，5. w&船QM34菌株。具体实施过程包括称青海牦牛粪样品10.0g，研碎， 于无菌条件下加入到90ml无菌水中摇动均匀，取其上清液稀释成合适(l(T5、 l(T6、 10'7)的浓度梯度，将梯度液在IO(TC水浴加热IO分钟，用常规稀释法涂布接种于牛 肉膏蛋白胨培养基，37'C培养1天,挑选细菌菌落形态差异比较明显的菌落，重复划线 接种于相应的琼脂平板上，纯化得到单菌落；采用PDA平板对峙生长法初筛以12种 病原真菌为指示菌，在平板中央点接病原菌，待病原菌生长到菌落直径约l-1.5cm时， 将接入初筛的菌株，接种点距平板中央2.5ctn处，点接6角点上，以不点接初筛菌株 为对照，置于28'C培养箱培养3-5天，观察记录病原真菌的生长情况。选出对病原菌 生长有相对较强抑制作用的菌株进入复筛。复筛的具体操作同初筛，以12种病原菌分 别为指示菌，拮抗平板培养5天或10天后，分别测量相关数据，并记录R值(R^病 原菌与拮抗菌的菌丝边缘距/拮抗菌中心到病原菌菌丝边缘的距离)，根据R值的大小， 筛选得到具有广谱拮抗作用的、抑菌效果好的、拮抗作用持久的丑w^/toQM34菌株 (见表l)，每处理3个观察值，试验重复2次。QM34菌落不透明，表面有皱褶，边 缘缺刻状；菌体形态杆状、革兰氏阳性，产生中生芽孢，孢囊有膨大，芽孢椭圆。表1 5. w6"'fc QM34菌株对12种土传植物真菌病菌的拮抗作用病原菌名学名抑菌效果R'番茄早疫病菌so/an/0.921灰霉病菌0週番茄叶霉病菌0.446赤霉病菌0.891刺盘孢菌0.596黄瓜枯萎病菌i^"r/zw o平; or/w附f邻，w've,0.778未鉴定病原真菌Unidentification0扁棉枯萎病菌0.890小麦白粉病菌grflw/w/s DC. f. sp. 7>zY/c/0.672苹果白粉病菌/Was/ /zaera /ewc^Wcte (Ell.et Ev.) Salm.0.459苹果干腐菌0.721烟草赤星菌0.5卯R':病原菌与拮抗菌的菌丝边缘距/拮抗菌中心到病原菌菌丝边缘的距离实施例2 QM34菌株对番茄早疫病的盆栽防效试验试验分别用QM34菌株的发酵液和无菌液防治番茄早疫病，每一种防治液各设2 个处理，即在接种番茄早疫病病原菌的前一天和后一天分别进行防治液的接种(分别 记为前、后)。以接种无菌水为对照。所有处理同时在三个番茄品种中实施。整个试验设2次重复，随机排列。5.犯6"fcQM34菌株，接种于YPF-Ca液体培养基，35°C，摇瓶培养4d，浓度约为 109 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株植物根际促生细菌，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其单位简称为ＣＧＭＣＣ，保藏名：枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＱＭ３４，保藏日：２００８年０９月２２日，保藏编号：ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．２６６９。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡青平，徐建国，
申请(专利权)人：山西师范大学，
类型：发明
国别省市：14[中国|山西]
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