【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种高效液相色谱法分离纯化植物内生细菌菌株抗菌肽的方法,其特征在于,该方法步骤如下:A、以短短芽孢杆菌B?011为基础菌株,该菌株于2013年04月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC?No.7466,制备短短芽孢杆菌CGMCC?No.7466的发酵滤液;B、取发酵滤液加入乙腈,使乙腈体积浓度为80%,充分混匀后静置20?25min,离心,上清液经旋转蒸发并浓缩,得抗菌粗提物;C、将抗菌粗提物采用高效液相色谱进行初步分离:SinoChrom?ODS?BP柱,上样量为10mL,流速为20mL/min,检测波长为270nm,0.2%甲酸水和乙腈的混合洗脱液进行梯度洗脱,根据色谱峰收集对应的洗脱液,旋转蒸发除去有机溶剂,冷冻干燥,制得活性组分;D、将制得的活性组分采用XAqua?C18柱进行高效液相再次分离:上样量为100μl,流速为3mL/min,检测波长为270nm,0.2%甲酸水和乙腈的混合洗脱液进行梯度洗脱,根据色谱峰收集每个峰所对应的洗脱液,旋转蒸发除去有机溶剂,冷冻干燥,得到抗菌肽活性单峰组分。
【技术特征摘要】
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