猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用，本发明专利技术经体外细胞实验研究发现，猴头菌提取物能显著增强PC12细胞的增殖，抑制Aβ25‑35对PC12细胞的损伤；经体内动物实验研究发现，猴头菌提取物能显著改善Aβ25‑35和D‑半乳糖致拟老年痴呆模型大鼠学习记忆能力；经细胞和动物急性毒性实验证实，猴头菌提取物安全剂量范围较大，可用于防治阿尔茨海默症药物、保健品和食品等领域。

Application of Hericium erinaceus extract in preparation of medicine, health food or food for prevention and treatment of Alzheimer's disease

The invention discloses the application of the extract of Hericium erinaceus in the preparation of drugs, health products or food for Alzheimer's disease. In vitro, the invention has found that the extract of Hericium erinaceus can significantly enhance the proliferation of PC12 cells and inhibit the damage of A beta 25 to PC12 cells; in vivo animal experiments, Hericium erinaceus is found. The extract can significantly improve the learning and memory ability of A beta 25, 35 and D galactose induced Alzheimer's dementia model rats. Through the acute toxicity test of cell and animal, the safe dose of Hericium erinaceus extract can be used in the prevention and control of Alzheimer's medicine, health products and food and other fields.

【技术实现步骤摘要】
猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用
本专利技术涉及猴头菌提取物的新用途，具体涉及猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用。
技术介绍
阿尔茨海默病（Alzheimer'sdisease，AD）是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病。临床上以记忆障碍、失语、失用、失认、视空间技能损害、执行功能障碍以及人格和行为改变等全面性痴呆表现为特征，病因迄今未明。老年痴呆病因及发病机制迄今尚不明确，可能有多因素参与，如老龄、遗传、代谢、头部外伤史、雌激素缺乏等。神经元损伤是阿尔茨海默症起病因素之一，现代研究发现引起神经细胞的死亡机理主要有氧化应激机理，线粒体机能障碍机理，兴奋性毒性机理，炎症机理及细胞凋亡(apoptosis)机理等。它们之间相互影响，最终导致神经功能失调和细胞死亡。神经退行性疾病病变机理研究新的发现，为该类疾病病变机理的阐明提供了有用的资料，同时也为寻找相应的新型药物提供了新的思路和作用靶点。近年有人提出神经细胞保护（Neuroprotection）的概念。人们试图通过以下3种途径来保护神经细胞，防止其退行性改变：（1）抑制神经细胞退行性改变的启动因子：导致神经元变性的因素主要包括线粒体功能障碍、异常蛋白沉积、炎症、自由基损伤和氧化应激反应和兴奋性氨基酸毒性等。目前研究的许多药物都是为了通过清除上述致病因素，发挥神经元的保护作用，用于防治神经退行性疾病。（2）阻断神经细胞退行性改变的信号传导过程：神经退行性病变的共同病理机制之一就是神经细胞的凋亡。现代研究证明，在兴奋性氨基酸作用、线粒体功能损伤和氧化应激可能是这些神经退行性疾病发病机制中最后的通路中，NF-κB、Caspase-3、JNK和STAT等均有可能参与。（3）激活内源性神经保护机制（如神经营养因子等）：近年发现NGF（神经生长因子）对成熟神经元有营养作用，NGF能保护神经元对抗有毒物质，机械性损伤或脑缺血等。因此寻找可影响神经营养因子生成或作用的小分子药物，用于神经退行性疾病的治疗是一新途径。猴头菌（Hericiumerinaceus）是一种药食两用的真菌，性平，味甘。研究报道猴头菌活性物质主要有多糖、甾醇（麦角甾醇类）、萜类（二萜类、杂萜类）、脂肪酸（饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸等）、酚类、蛋白质等化合物，具有利五脏，助消化，滋补，抗癌，抗神经衰弱等功效。目前国内外对猴头菌的研究主要集中在猴头菌多糖的提取、化学成分测定等方面，但对猴头菌提取物在防治阿尔茨海默症中的应用的研究还较少。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用。优选的，所述猴头菌提取物的安全剂量范围为80mg/kg-320mg/kg。优选的，所述猴头菌提取物为猴头菌的乙醇提取物。优选的，所述猴头菌的乙醇提取物的制备方法包括以下步骤：（1）将猴头菌子实体60-70℃烘干，粉碎至10-50目；（2）室温条件下，取猴头菌子实体粉末加入装有预先处理后的大孔树脂的玻璃层析柱中，使径高比在1:3~1:10之间；（3）加入5-10倍量质量浓度为50-80%的乙醇，浸泡1-2h，然后以1.0-1.5BV/h流速连续洗脱，收集乙醇洗脱液，50-70℃减压浓缩至相对密度为1.0-1.2的稠膏，减压干燥，即得猴头菌提取物。采用本专利技术上述制备方法得到的猴头菌提取物，经结合化学鉴别、HPLC、LC-MS等技术检测，结果显示其主要含有Cyathane型骨架的ErinacineA、B、C、D、E、F、G以及HericenoneA、B、C、D、E、F、G等萜类化合物；同时还含有少量的麦角甾醇、不饱和脂肪酸和寡糖等化合物。本专利技术还提供一种防治阿尔茨海默症的药物，包含上述猴头菌提取物和药学上可接受的载体。本专利技术所述药物的剂型可以为片剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂或口服液等，其制备方法采用常规的方法制备即可。本专利技术与现有技术相比，具有如下有益效果：本专利技术经体外细胞实验研究发现，猴头菌提取物能显著增强PC12细胞的增殖，抑制Aβ25-35对PC12细胞的损伤；同时经体内动物实验研究发现，猴头菌提取物能显著改善Aβ25-35和D-半乳糖致拟老年痴呆模型大鼠学习记忆能力；经细胞和动物急性毒性实验证实，其安全剂量范围大，可用于防治阿尔茨海默症药物、保健品和食品等领域。附图说明图1A为猴头菌提取物对NaN3致PC12细胞损伤模型线粒体的普通光学显微镜图。图1B为猴头菌提取物对NaN3致PC12细胞损伤模型线粒体的荧光显微镜图。图1C为猴头菌提取物对NaN3致PC12细胞损伤模型线粒体的透射电镜扫描图（1K和5K）。具体实施方式下面通过具体实施方式来进一步说明本专利技术，以下实施例为本专利技术具体的实施方式，但本专利技术的实施方式并不受下述实施例的限制。本专利技术所述的猴头菌（Hericiumerinaceus）由广东粤微食用菌技术有限公司提供。子实体呈块状，扁半球形或头形，肉质，直径5-15cm，不分枝。新鲜时呈白色，干燥时变成褐色或淡棕色。实施例1：猴头菌提取物的制备具体包括以下步骤：（1）将猴头菌子实体65℃烘干，粉碎至50目；（2）室温条件下，取猴头菌子实体粉末加入装有预先处理后的大孔树脂的玻璃层析柱中，使径高比在1:5之间；（3）加入5倍量质量浓度为80%的乙醇，浸泡2h，然后以1.0BV/h流速连续洗脱，收集乙醇洗脱液，60℃减压浓缩至相对密度为1.2的稠膏，转至真空干燥箱中，70℃减压干燥，即得猴头菌提取物。经结合化学鉴别、HPLC、LC-MS等技术检测，结果显示其主含有Cyathane型骨架的ErinacineA、B、C、D、E、F、G以及HericenoneA、B、C、D、E、F、G等萜类化合物；同时还含有少量麦角甾醇、不饱和脂肪酸和寡糖等化合物。将上述猴头菌提取物进行药效试验：试验例一：猴头菌提取物（DHE）对NaN3致PC12细胞损伤模型的保护作用按照细胞培养法，体外培养PC12细胞，采用NaN3共孵育，制备损伤模型，给予猴头菌提取物处理24h后，观察细胞形态、细胞线粒体功能、凋亡等，结果见表1-4和图1。表1PC12细胞给予DHE和NaN3处理后的存活率表2造模细胞给予DHE处理后的存活率及活性氧水平表3造模细胞经DHE处理后ATP酶含量的变化表4造模细胞经DHE处理后ATP含量的变化通过表1可以看出，PC12细胞经DHE和NaN3分别处理后，细胞存活率分别显著上升和下降，说明DHE能够提高细胞的存活率，促进细胞增殖，而NaN3能够用于制备细胞损伤模型。表2中，NaN3所致损伤细胞经DNE处理后，细胞存活率显著上升，同时细胞内活性氧的含量明显下降。表3、表4中，NaN3所致损伤细胞经DHE处理一定时间后，细胞内ATP酶和ATP含量都有明显增加，说明细胞的活力在增强。通过图1A可以看出，给予了猴头菌提取物DHE的细胞相对于模型组细胞，形态更加光滑，数量上也有增加。图1B中，通过荧光照片，同样可以看出，给予了猴头菌提取物DHE的细胞数量有增加。图1C可以看出，给药组相对模型组，细胞核与细胞质的间隙更加清晰，线粒体的形态同样清晰可见，数量上也有增加。结果表明，猴头菌提取物能显著改善NaN3致PC12细胞的损伤。试验例本文档来自技高网...

【技术保护点】
猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用。

【技术特征摘要】
1.猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用。2.根据权利要求1所述的猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用，其特征在于，所述猴头菌提取物的安全剂量范围为80mg/kg-320mg/kg。3.根据权利要求1所述的猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用，其特征在于，所述猴头菌提取物为猴头菌的乙醇提取物。4.根据权利要求3所述的猴头菌提取物在制备防治阿尔茨海默症药物、保健品或食品中的应用，其特征在于，所述猴头菌的乙醇提取物的制备方法包括以下步骤：（1）将猴头菌子实体60-70℃烘...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈地灵，杨俭，帅欧，谢意珍，吴清平，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：广东,44