一种检测猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术属于动物疫病检测领域，具体涉及一种检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括：包被有猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒3B多肽的抗原检测板、含有酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体和酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的混合液、猪伪狂犬病毒gE蛋白酶标单抗显色体系、口蹄疫病毒3ABC蛋白酶标单抗显色体系、阴性/阳性对照、样品稀释液和洗涤液。本发明专利技术使两个独立的ELISA反应在前两个步骤同时进行，再使用独特的显色体系，使前一个酶的显色与终止不影响下一个酶的反应，实现了一份血清，一次样品孵育，一次二抗孵育，得到两个ELISA结果。

A two blocking ELISA antibody detection kit for detection of porcine pseudorabies virus and foot-and-mouth disease virus and its application

The invention belongs to the field of animal epidemic detection, in particular to a two joint blocking ELISA antibody detection kit for detecting the gE protein antibody of porcine pseudorabies virus and 3ABC protein antibody of foot-and-mouth disease virus and its application. The kit includes: antigen detection board containing 3B polypeptide of pig pseudorabies virus and foot-and-mouth virus, monoclonal antibody against pseudorabies virus gE protein and monoclonal antibody against FMD 3ABC protein monoclonal antibody, porcine pseudorabies virus gE protease marker anti chromophore system, and FMD 3ABC protease Labeled monoclonal antibody, negative / positive control, sample diluent and washing solution. The invention makes two independent ELISA reactions carried out at the same time in the first two steps, and uses a unique color rendering system to make the color and termination of the previous enzyme do not affect the reaction of the next enzyme. It realizes a sera, a sample incubation, a two anti incubation, and two ELISA results.

【技术实现步骤摘要】
一种检测猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用
本专利技术属于动物疫病检测领域，具体涉及一种检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒及其应用。
技术介绍
伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病毒(PseudorabiesVirus，PrV)引起的包括家畜和多种野生动物的一种以发热、奇痒及脑脊髓炎为症状的重要传染病。该病给养猪业造成了巨大的经济损失，猪是本病的天然宿主和储存者。预防、控制和最终根除该病是我国当前面临的一项艰巨任务。在伪狂犬病的防控工作中，普遍采用gE基因缺失活疫苗进行免疫，这些疫苗免疫后都不产生针对gE蛋白的抗体，但是猪伪狂犬病毒野毒感染则可以产生该蛋白的抗体，因此检测gE蛋白可以进行鉴别诊断，以判定猪是否被野毒感染，在临床上有重要意义。猪O型口蹄疫(FMD)是由O型口蹄疫病毒(FMDV)引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病。除感染猪外，还可感染牛、羊等偶蹄动物。在口蹄疫病毒的防控工作中，当前均采用口蹄疫病毒的灭活疫苗或亚单位疫苗，免疫后会产生针对口蹄疫病毒结构蛋白的抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，包括：包被有猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒3B多肽的抗原检测板、含有酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体和酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的混合液、猪伪狂犬病毒gE蛋白酶标单抗显色体系、口蹄疫病毒3ABC蛋白酶标单抗显色体系、阴性对照、阳性对照、样品稀释液和洗涤液。

【技术特征摘要】
1.一种检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，包括：包被有猪伪狂犬病毒和口蹄疫病毒3B多肽的抗原检测板、含有酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体和酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的混合液、猪伪狂犬病毒gE蛋白酶标单抗显色体系、口蹄疫病毒3ABC蛋白酶标单抗显色体系、阴性对照、阳性对照、样品稀释液和洗涤液。2.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述混合液中酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体和酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的浓度均为1mg~5mg/L。3.根据权利要求2所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体与酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体的比率为1:1。4.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述酶标抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体为辣根过氧化物酶标记的抗伪狂犬病毒gE蛋白单克隆抗体；所述酶标抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体为α-半乳糖苷酶标记的抗口蹄疫病毒3ABC蛋白单克隆抗体。5.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述猪伪狂犬病毒gE蛋白酶标单抗显色体系包括底物液与终止液，所述底物液包含过氧化氢脲、四甲基联苯胺和柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液，所述终止液为体积浓度为0.25%的氢氟酸溶液。6.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述口蹄疫病毒3ABC蛋白酶标单抗显色体系包含底物液与终止液，所述底物液包含硝基酚-α-D-吡喃半乳糖和磷酸缓冲液，所述终止液包含0.2mol/LpH9.5~10.0硼酸缓冲液和2mg/mLBSA保护剂。7.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为含2.5mg/mL明胶的DMEM培养基。8.根据权利要求1所述的检测猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体和口蹄疫病毒3ABC蛋白抗体的二联阻断ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈斌，但汉并，徐高原，尹争艳，陈关平，
申请(专利权)人：武汉科前生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42