一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂和检测试剂盒与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)酶联免疫检测试剂，包括包被抗体和检测抗体，包被抗体与检测抗体为兔抗人PCSK9单克隆抗体，包被抗体与检测抗体分别连接待测蛋白样品，形成双抗体夹心；包被抗体经修饰后的修饰段氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。本发明专利技术采用重链修饰的PCSK9单克隆抗体，通过对兔单抗的重链恒定区CH3序列进行修饰提高了其与酶标板的亲和能力，亲和度更好的包被抗体在ELISA中使得待测样本的脱板游离概率大大降低，从而提高了检测结果的准确性与稳定性。该试剂盒采用的原料廉价易得且环境友好，高灵敏度、高准确度，适用于各种样本中的PCSK9检测，具有广泛的推广价值。

【技术实现步骤摘要】
一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂和检测试剂盒与应用
本专利技术涉及一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂和检测试剂盒与应用，属于生物医学领域，尤其是免疫诊断

技术介绍
一、前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK9)概述前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK9)是分泌型枯草杆菌蛋白酶家族的蛋白酶K亚家族成员。PCSK9主要来源于人体的肝脏、肾脏和小肠。PCSK9前体蛋白主要在内质网中合成可溶性PCSK9酶原，并在内质网或高尔基体中经过自身催化裂解产生成熟的蛋白酶并分泌到血液中。目前研究表明只有肝脏分泌的PCSK9可分泌进入血液中，并与肝细胞表面的低密度脂蛋白受体(LDLR)结合，介导LDLR的降解，从而调节血清胆固醇水平。作为LDLR的负调节剂，过量的PCSK9在肝细胞表面结合LDLR并导致其降解，从而导致LDLR对低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的结合和降解能力减弱，进而增加血清LDL-C水平，最终导致血液中胆固醇水平升高。因此，PCSK9抗体药成为治疗高胆固醇血症的最新方法。高胆固醇血症分为家族性和非家族性，均属于脂质代谢异常，是冠状动脉疾病发生的独立危险因素。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括包被抗体和检测抗体，其中：包被抗体和检测抗体为兔抗人PCSK9单克隆抗体，且分别连接待测蛋白样品成双抗体夹心结构；包被抗体经修饰后的修饰段氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
2017.08.23 CN 20171073018551.一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括包被抗体和检测抗体，其中：包被抗体和检测抗体为兔抗人PCSK9单克隆抗体，且分别连接待测蛋白样品成双抗体夹心结构；包被抗体经修饰后的修饰段氨基酸序列如序列表SEQIDNO：1所示。2.根据权利要求1所述的人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂，其特征在于：包被抗体与反应区域结合形成固相抗体。3.根据权利要求1所述的人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂，其特征在于：所述检测试剂还包括反应底物，反应底物为辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，检测抗体为生物素标记的兔抗人PCSK9单克隆抗体。4.根据权利要求1所述的人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂，其特征在于：所述检测试剂还包括显色液，显色液分别为过氧化氢溶液和TMB溶液，使用时等比例加入。5.一种人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如下试剂：包被抗体、酶标板、检测抗体、反应底物和显色液，其中：包被抗体预结合在酶标板上，检测抗体与反应底物结合，反应底物与显色液反应后显色，通过检测光密度值获得待测蛋白样品的检测结果，包被抗体经修饰后的修饰段氨基酸序列如序列表SEQIDNO：1所示。6.根据权利要求5所述的人前蛋白转化酶枯草溶菌素9酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：检测抗体为生物素标记的兔抗人PCSK9单克隆抗体。7.根据权利要求5所述的人前蛋白转化酶枯草溶菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈立波，张豹，
申请(专利权)人：武汉菲思特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42