一种联合抑制肿瘤的组合物制造技术

本发明专利技术公开了一种联合抑制肿瘤的组合物。所述组合物包括AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂。发明专利技术人通过研究发现AURKA能够促进乳腺癌干细胞自我更新，而细胞核内AURKA与经典转录因子FOXM1结合激活FOXM1转录从而促进乳腺癌干细胞。此外，发明专利技术人发现FOXM1可以激活AURKA的转录从而上调AURKA蛋白的水平。这些发现表明AURKA和FOXM1形成正反馈通路促进乳腺癌肿瘤干细胞。通过上述研究，发明专利技术人提供了一种新的癌症治疗策略，联合应用AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂治疗肿瘤，能够有效的清除乳腺癌肿瘤干细胞，以克服乳腺癌耐药的发生。

A combination of a combination of tumor suppressor

The present invention discloses a combination of combined inhibition of tumor. The composition includes a AURKA kinase activity inhibitor and a FOXM1 transcriptional activity inhibitor. The inventors discovered that AURKA can promote breast cancer stem cell self-renewal, while AURKA in nucleus and classical transcription factor FOXM1 bind to activate FOXM1 transcription, thereby promoting breast cancer stem cells. In addition, the inventor found that FOXM1 could activate the transcription of AURKA and increase the level of AURKA protein. These findings suggest that AURKA and FOXM1 form positive feedback pathways to promote cancer stem cells in breast cancer. Through the above research, the inventor provided a new cancer treatment strategy. Combined application of AURKA kinase inhibitor and FOXM1 transcriptional activity inhibitor can effectively remove breast cancer stem cells and overcome the drug resistance of breast cancer.

【技术实现步骤摘要】
一种联合抑制肿瘤的组合物
本专利技术具体涉及一种联合抑制肿瘤的组合物。
技术介绍
乳腺癌是全球女性死亡的主要原因之一。虽然手术加上辅助化疗在很大程度上提高了生存率，有仍然有相当部分的患者较短时间内即发生复发和转移，预后极差。因此，迫切需要开发更加有效的治疗和预后恢复的靶点药物。Aurora激酶属于苏氨酸/丝氨酸激酶家族，包括AuroraA(AURKA)，AuroraB(AURKB)及AuroraC(AURKC)三个成员。其中AURKA激酶调节复杂的生物学过程，涉及到磷酸化/去磷酸化、降解与转录调控，并在细胞分裂期发挥重要的生理功能，还对维持细胞增殖与稳定细胞周期发挥着关键作用。AURKA激酶在许多癌细胞(如肺癌、乳腺癌、直肠癌、胰腺癌)中过度表达。AURKA激酶的过度表达易导致细胞有丝分裂异常，与肿瘤的发生、发展及原发耐药有着密切的关系。抑制AURKA激酶的活性可以导致肿瘤细胞多倍体的聚集、促进细胞凋亡、阻断细胞增殖。随着对AURKA激酶活性位点晶体结构的阐明，一些世界顶尖的抗癌药物生产商纷纷致力于AURKA激酶小分子靶向药物的研发。其中，AURKA激酶特异性抑制剂MK-5108(Merck公司)及MLN8054(Takeda公司)在I期临床试验后即宣告失败；alisertib(又名MLN8237，Takeda公司)在白血病的治疗中取得了较好的疗效，目前正在进行Ⅲ期临床试验。AURKA激酶小分子靶向药物的研发正在如火如荼的进行。但是真正获得成功的是少数。很多在I期实验后就宣告失败，表明我们对AURKA在生命活动中的功能和机制的认识尚需进一步完善。单独靶向AURKA激酶活性可能不能达到抑制肿瘤的目的。本课题组2016年初在《自然-通讯(NatureCommunications)》发表论文(题目为NuclearAURKAacquireskinase-independenttransactivatingfunctiontoenhancebreastcancerstemcellphenotype，NatCommun.2016Jan19；7:10180.doi:10.1038/ncomms10180.)首次揭示AURKA在肿瘤中的异常细胞定位，产生非激酶活性(转录激活活性)依赖的促癌功能，即可作为核转录因子促进乳腺癌干细胞自我更新，使其对激酶抑制剂(靶向药物)产生抵抗，导致耐药。文章指出通过纠正该靶标激酶的异常细胞定位，抑制其核转录功能，就有可能克服耐药性。但是对于如何靶向AURKA转录激活活性或者AURKA转录激活活性与哪些细胞信号通道相关，文章中没有任何提示。本专利技术是在前面发现AURKA有转录激活活性的基础上，发现AURKA能够与FOXM1结合，靶向FOXM1就能够抑制AURKA转录激活活性。因此，专利技术人提供了一种新的潜在的针对细胞质和细胞核中的AURKA功能的治疗策略，也就是联合应用AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂治疗肿瘤，能够有效的清除乳腺癌肿瘤干细胞，以克服乳腺癌耐药的发生。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种联合抑制肿瘤的组合物。本专利技术所采取的技术方案是：一种联合抑制肿瘤的组合物，包括AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂。优选的，AURKA激酶抑制剂为AURKA蛋白激酶活性小分子抑制剂。优选的，AURKA蛋白激酶活性小分子抑制剂包括AKI603，是一个含有嘧啶环的小分子化合物，为本课题组自主设计合成。专利技术人研究证明AKI603可以有效抑制AURKA的激酶活性。相应文章已经发表在MolCanTher上(题目为Anovelsmallmoleculeaurorakinaseinhibitorattenuatesbreasttumor-initiatingcellsandovercomesdrugresistance，MolCancerTher.2014Aug；13(8):1991-2003.doi:10.1158/1535-7163.MCT-13-1029.)。AKI603分子结构如下所示：优选的，FOXM1抑制剂为FOXM1蛋白转录激活活性小分子抑制剂。优选的，FOXM1蛋白转录激活活性小分子抑制剂包括硫链丝菌肽(thiostrepton,TST)，购自Sigma-Aldrich公司。Thiostrepton简称TST的分子结构如下所示：硫链丝菌肽(thiostrepton,TST)是一种提取于链霉菌的天然噻唑类抗生素，具有广谱的抗革兰阴性、阳性细菌的作用，在兽医中常用来治疗乳腺炎。2011年发表在《自然-化学(NatureChemistry)》上的文章(NatChem.2011Aug21；3(9):725-31.doi:10.1038/nchem.1114.)表明，TST可以直接抑制FOXM1与DNA双螺旋的结合，从而抑制FOXM1的转录活性。优选的，所述肿瘤为腺上皮性肿瘤。优选的，所述腺上皮性肿瘤包括乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胰腺癌。其中结直肠癌包括结肠癌和直肠癌。优选的，所述腺上皮性肿瘤为乳腺癌。AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂的联合应用在制备治疗肿瘤药物中的应用。优选的，AURKA激酶抑制剂为AURKA蛋白激酶活性的小分子抑制剂。优选的，FOXM1抑制剂为FOXM1蛋白转录激活活性的小分子抑制剂。优选的，所述肿瘤为腺上皮性肿瘤。优选的，所述腺上皮性肿瘤包括乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胰腺癌。其中结直肠癌包括结肠癌和直肠癌。优选的，所述腺上皮性肿瘤为乳腺癌。在体内同时抑制AURKA激酶活性以及FOXM1转录活性的试剂在制备治疗肿瘤药物中的应用。优选的，所述肿瘤为腺上皮性肿瘤，包括乳腺癌、结直肠癌。优选的，所述腺上皮性肿瘤为乳腺癌。本专利技术的有益效果是：本专利技术是在前面发现AURKA有转录激活活性的基础上，发现AURKA能够与FOXM1结合，靶向FOXM1就能够抑制AURKA转录激活活性。因此，专利技术人提供了一种新的潜在的针对细胞质和细胞核中的AURKA功能的治疗策略，也就是联合应用AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂治疗肿瘤，能够有效的清除乳腺癌肿瘤干细胞，以克服乳腺癌耐药的发生。专利技术人通过WesternBlot实验、肿瘤干细胞体外微球悬浮培养实验和裸鼠体内成瘤实验发现AURKA能够促进乳腺癌干细胞自我更新(图1)。进一步研究表明细胞核内AURKA与经典转录因子FOXM1结合激活FOXM1转录从而促进乳腺癌干细胞(图2和图3)。此外，专利技术人发现FOXM1可以激活AURKA的转录从而上调AURKA蛋白的水平(图4)。这些研究表明AURKA和FOXM1形成正反馈通路促进乳腺癌肿瘤干细胞。进一步，专利技术人研究表明，AURKA激酶抑制剂AKI603和FOXM1抑制剂thiostrepton(TST)联合应用可以协同抑制乳腺癌肿瘤干细胞(图5)。所述正反馈通路的意思是：1)FOXM1可以直接转录激活AURKA；2)AURKA可以通过与FOXM1形成二聚体激活FOXM1转录。即AURKA与FOXM1二者互相激活转录，形成正反馈。而FOXM1是否是AURKA的转录激活活性所必需的唯一的共作用因子，本专利技术研究中暂时没有确定的答案。附图说明图1.AURKA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种联合抑制肿瘤的组合物，其特征在于：包括AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂。

【技术特征摘要】
2016.11.21 CN 20161102148431.一种联合抑制肿瘤的组合物，其特征在于：包括AURKA激酶活性抑制剂和FOXM1转录活性抑制剂。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：AURKA激酶抑制剂为AURKA蛋白激酶活性小分子抑制剂。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：FOXM1抑制剂为FOXM1蛋白转录激活活性小分子抑制剂。4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述肿瘤为腺上皮性肿瘤。5.根据权利要求4所述的组合物，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘强，王自峰，杨娜，王昶，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心，
类型：发明
国别省市：广东,44