一种检测多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测多种维生素制剂中维生素B2有关物质的方法，所述方法包括如下步骤，色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填充剂；以己烷磺酸钠溶液为流动相；检测波长：240～300nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200μl；运行时间：70～120分钟。将供试品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图测定。本发明专利技术全面研究了维生素B2的已知杂质、未知杂质和总杂，填补了多种维生素组成的复方制剂中维生素B2有关物质检测方法的空白。该方法灵敏度高、专属性强、操作方便，可快速高效的检测出含维生素B2的多种维生素制剂中维生素B的有关物质，有效控制了多种维生素制剂的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种检测多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质的方法
本专利技术涉及药物分析领域中一种检测多种维生素制剂中维生素B2有关物质的方法。
技术介绍
维生素B2又名维他命B2、核黄素，其分子量为376.37，化学式为C17H20N4O6，维生素B2是水溶性维生素，但微溶于水，其可被光破坏，在碱溶液中加热亦可被破坏，但在中性或酸性溶液中加热是稳定的。维生素B2为体内多种辅酶的重要组成部分，如黄酶类辅基，黄酶在生物氧化还原中发挥递氢作用。当缺乏时，就影响机体的生物氧化，使代谢发生障碍。临床用于治疗口角炎、唇炎、舌炎、眼结膜炎、脂溢性皮炎以及阴囊炎等。维生素B2可用于上述疾病的防治，但体内维生素B2的储存有限，需要从食物中获取。光黄素为维生素B2的主要降解产物，除光黄素外，可能还会有其他杂质，为保证用药安全，有效控制维生素B2的杂质尤为重要。经查阅国内外药典及文献，USP36-NF31原料及制剂采用紫外-可见分光光度法检查光黄素，JP16原料采用比色法检查光黄素，均无用高效液相色谱法(HPLC法)对光黄素的测定，HPLC法比上述两种方法更加准确定量。单方制剂中仅控制了单杂和总杂，目前尚未有对多种维生素制剂中维生素B2有关物质如已知杂质、未知杂质和总杂全面检查方法的报道，本专利技术全面研究了维生素B2的已知杂质、未知杂质和总杂，填补了多种维生素组成的复方制剂中维生素B2有关物质检测方法的空白。本方法专属性、重现性良好，能够快速有效的分离测定出多种维生素制剂中维生素B2的有关物质，可有效控制多种维生素制剂的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种简便易行、灵敏度高、重现性好的多种维生素制剂中维生素B2有关物质的检测方法。所述方法包括：将含维生素B2的多种维生素胶囊剂经过前处理配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱，采用己烷磺酸钠溶液流动相，记录HPLC图。优选的，取本品内容物适量，加三氯甲烷5～50ml振摇分散，用0.2～5mol/L盐酸溶液萃取1～6次，合并水层溶液，加水稀释至每毫升溶液中约含维生素B2为10～100μg的溶液，离心，上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，加水稀释100倍后作为对照溶液。阴性样品溶液：取阴性样品适量，同供试品溶液方法制备。优选的，所述供试品溶液制备中的萃取溶剂为盐酸溶液；对照品溶液制备中的稀释剂为水。优选的，所述流动相为己烷磺酸钠溶液，制备方法：取己烷磺酸钠0.7g，加适量水溶解，加冰醋酸10ml、二乙胺0.3ml，摇匀，加甲醇200ml，加水稀释至1000ml。优选的，所述柱温为20～50℃。优选的，所述流动相的流速为0.5～2.0mL/min。优选的，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶。优选的，所述检测波长为240～300nm。本专利技术的要点在于我们采用HPLC法高效快速测定多种维生素胶囊剂中维生素B2的有关物质。本方法专属性强，重现性好、灵敏度高，且检测成本低、可广泛地应用于药物分析领域中，从而更好地确保含维生素B2的多种维生素制剂的质量及有效性。附图说明图1：实施例1中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定的阴性样品图谱图2：实施例1中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定的对照溶液图谱图3：实施例1中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定的供试品图谱图4：实施例2中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定的系统适用性图谱图5：实施例3中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定图谱图6：实施例4中多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质测定图谱具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行详尽地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例11、色谱条件仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：AQ-C18柱(型号：Ultimate，250×4.6mm，5μm)；流动相：己烷磺酸钠溶液；检测波长：267nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；运行时间：约90分钟2、样品制备(1)流动相的制备取己烷磺酸钠0.7g，加适量水溶解，加冰醋酸10ml、二乙胺0.3ml，摇匀，加甲醇200ml，加水稀释至1000ml。(2)供试品溶液制备避光操作。精密称取本品内容物适量(约相当于维生素B21mg)，置分液漏斗中，加三氯甲烷15ml振摇使分散，用2mol/L盐酸溶液萃取3次，第一次20ml，以后每次10ml，合并水层溶液，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，离心(每分钟3000转)10分钟，上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液。(3)阴性样品溶液制备取阴性样品适量，同供试品溶液方法制备。(4)对照溶液制备精密量取1ml上述供试品溶液，置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。(5)实验结果精密量取供试品溶液、阴性样品溶液和对照溶液各100μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，理论板数按维生素B2峰计算不低于2000。该方法能有效检出含维生素B2的多种维生素制剂中维生素B2有关物质，图谱见说明书附图的图1、2、3。实施例2系统适用性溶液：分别取维生素B2和光黄素对照品适量，精密称定，用2mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含维生素B20.4μg和光黄素0.25μg的混合溶液。精密量取上述溶液100μl，注入液相色谱仪，重复进样6次，计算保留时间和峰面积的RSD％。表——系统适用性试验结果结果显示：维生素B2和光黄素的分离度均符合规定；连续6次进样维生素B2的理论板数均不低于2000，光黄素的拖尾因子均小于2.0，维生素B2和光黄素保留时间的RSD％均小于1％，峰面积的RSD％均小于2％；均符合规定；表明本方法的系统适用性良好。图谱见说明书附图的图4。实施例3仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：AQ-C18柱(型号：Ultimate，250×4.6mm，5μm)；流动相：己烷磺酸钠溶液；检测波长：275nm；柱温：30℃；流速：1.2ml/min；运行时间：约90分钟供试品溶液制备方法照实施例1中“供试品溶液制备”的方法进行，图谱见说明书附图的图5。实施例4仪器：高效液相色谱仪；色谱柱：AQ-C18柱(型号：Ultimate，250×4.6mm，5μm)；流动相：己烷磺酸钠溶液；检测波长：260nm；柱温：35℃；流速：0.8ml/min；运行时间：约90分钟供试品溶液制备方法照实施例1中“供试品溶液制备”的方法进行，图谱见说明书附图的图6。实施例5①供试品溶液：取本品内容物约1.0g，照实施例1“样品配制”项下的供试品溶液制备方法制备，即得。②阴性样品溶液：取阴性样品约1.0g，同供试品溶液配制，即得。③空白辅料溶液：取空白辅料约1.0g，同供试品溶液配制，即得。④对照溶液：精密量取1ml供试品溶液，置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。表——专属性试验过程分别精密量取上述供试品、相应的阴性样品溶液和空白辅料溶液各100μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。表——样品专属性试验结果表——原料破坏试验结果表——样品峰纯度试验结果保留时间峰纯度指数单点阈值最小峰纯度指本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：色谱条件：以AQ‑C18为色谱柱；以己烷磺酸钠溶液为流动相；检测波长：240～300nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200μl，运行时间70～120分钟。样品溶液的配制：取本品内容物适量，加有机溶剂5～50ml振摇分散，用盐酸溶液萃取1～6次，合并水层溶液，加水稀释至每毫升溶液中约含维生素B2为10～200μg的溶液，离心滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，蒸馏水稀释后作为对照溶液。测定：将供试品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图测定。

【技术特征摘要】
1.一种检测多种维生素胶囊剂中维生素B2有关物质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：色谱条件：以AQ-C18为色谱柱；以己烷磺酸钠溶液为流动相；检测波长：240～300nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：10～200μl，运行时间70～120分钟。样品溶液的配制：取本品内容物适量，加有机溶剂5～50ml振摇分散，用盐酸溶液萃取1～6次，合并水层溶液，加水稀释至每毫升溶液中约含维生素B2为10～200μg的溶液，离心滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，蒸馏水稀释后作为对照溶液。测定：将供试品溶液和对照品溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图测定。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱以十八烷基硅烷键合硅...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵爱霞，解洪福，王晓伟，
申请(专利权)人：济南维瑞医药科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37