The invention discloses a method for detecting gene mutation of ARMS convex ring primer and its application method, features of the convex ring ARMS primers, a convex ring structure in the ARMS primer, thus forming a convex ring primer ARMS. Because the bonding force between the convex ring structure and the template is weak, the primers can be extended only when the 3 'end region (i.e. the region of the gene mutation point) is complementary to the template, that is to complete the PCR amplification. The primers can be applied to the fluorescence PCR technique. The application of this detection method reduces the difficulty of probe design, effectively detects gene mutation in biological samples, and has high accuracy, sensitivity and specificity.
【技术实现步骤摘要】
一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法
本专利技术公开了一种用于检测基因突变的引物及其应用方法,特别涉及一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法。
技术介绍
基因突变是指,由于DNA分子中发生碱基对的增添、缺失或替换,而引起的基因结构的改变,基因突变在自然界各物种中普遍存在。不论是真核生物还是原核生物的突变,也不论是什么类型的突变,基因突变都具有随机性、低频性和可逆性等共同的特性。一般情况下,基因突变是有害的。比如,乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)是一种属于嗜肝DNA病毒科的DNA病毒,其核心颗粒直径28纳米,呈二十面体立体对称。它的基因组总长度约为3.2kb,为部分双链DNA结构,其中其负链包含完整的HBV基因组,而与之互补的正链的长度是不固定的。目前临床上用于抗病毒治疗乙肝的两类主要药物是核苷(酸)类似物和干扰素类药物(如a-IFN)。其中核苷(酸)类药物的治疗原理是核苷(酸)类药物竞争性地跟HBVDNA聚合酶的自然底物(三磷酸脱氧核苷)结合,从而使HBVDNA合成终止,达到抑制HBV复制的目的,最终起到治疗乙肝的效果。虽然这类药物对乙肝的治疗有显著的疗效,但若长期用药会产生耐药性问题。而阿德福韦酯(adefovirdipivoxil,ADV)是目前在我国上市应用于临床抗HBV药物的核苷(酸)类似物,也是我国临床治疗中应用最多的抗HBV药物之一。患者长期服用ADV会有较高耐药率的发生,在接受阿德福韦酯治疗1、2、3、4、5年HBV累积耐药率分别为0%、3%、11%、18%、29%。其中最经典的ADV耐药突 ...
【技术保护点】
一种用于检测基因突变的凸环‑ARMS引物及其应用方法,所述基因突变区域与突变区域后的核酸序列与模板序列完全互补配对,其特征在于:在所述引物的突变区域与突变区域后的核酸序列之间,存在若干个碱基,其与模板序列并不互补配对,从而凸起形成一个凸环结构。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,所述基因突变区域与突变区域后的核酸序列与模板序列完全互补配对,其特征在于:在所述引物的突变区域与突变区域后的核酸序列之间,存在若干个碱基,其与模板序列并不互补配对,从而凸起形成一个凸环结构。2.根据权利要求1所述的一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,其特征在于:所述凸环-ARMS引物的设计中,引入碱基数量为3-8个。3.根据权利要求2所述的一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,其特征在于:所述凸环-ARMS引物的设计中,引入碱基数量为4-5个。4.根据权利要求1所述的一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,其特征在于:所述凸环-ARMS引物的设计中,插入的碱基类型可包括A、T、C、G中的任一个。5.根据权利要求1所述的一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,其特征在于:所述凸环-ARMS引物的设计中,插入的若干碱基是连续排列的。6.根据权利要求1所述的一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,其特征在于:可将所述凸环-ARMS引物扩增后的产物直接电泳,可根据电泳是否有相应大小的条带直观...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘淑园,陈华云,张天海,
申请(专利权)人:广州和实生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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