本发明专利技术涉及一种保藏编号为ＣＧＭＣＣ ＮＯ．２３２８的解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＹＮ－１和生防微生物制剂及其制备方法。以重量份计，该微生物制剂含芽孢杆菌发酵液８２～９５份、表面活性剂２～８份、防腐剂１～４份；其制备方法包括试管菌种、种子液、发酵培养基的制备及液体发酵生产、制剂制备等步骤。该解淀粉芽孢杆菌抑菌谱广、抑菌效果好；以该菌株制备的微生物制剂能有效防治苹果褐斑病、小麦纹枯病等真菌病害，防治效果显著、稳定，对苹果轮斑病、褐斑病等病害的防治效果可高达８１．４％；该制剂的生产方法简单、合理，筛选出了成本低廉的工业用培养基，工业化生产成本低，易于普及应用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物防治领域，尤其涉及一种新的解淀粉芽孢杆菌以及使用该 芽孢杆菌制备的微生物制剂和方法。
技术介绍
众所周知，由于微生物农药的技术特征和发展方向与人类未来的生产方式、 食品安全、营养健康、生态平衡和生物多样性都具有良好的相融性，加上以现 代发酵工程和生物技术为基础的微生物工业化生产技术体系日趋完善，微生物 农药的研究开发已引起了研究人员广泛的关注和重视。利用植株上附生的或根际土壤中的拮抗细菌或其代谢产物调控有害微生物 的平衡可达到控病保产的目的，也是植物病害生物防治的重要而有效的途径， 而筛选高效和活性稳定的拮抗菌株则是保证生物防治获得成功的先决条件。芽孢杆菌(Ba"7/"s^p.)是自然界广泛存在的一类细菌，其中的一些菌株可以产 生杆菌肽、大环脂、环脂和类噬菌体颗粒等十几种抗菌物质，在植物病害生物 防治中有着广泛的应用前景。同时，芽孢杆菌为革兰氏阳性细菌，可以形成芽 孢，细胞壁不含内毒素，除个别种外绝大多数对人畜无毒，因此具有很强的环 境适应性和环境友好性。微生物农药与化学农药市场相比是个新兴的产业，发 展微生物农药在我国具有巨大的潜在市场，新型微生物农药的研究成果转让市 场潜力相当可观，并将推进传统农药产业结构调整和技术提升，获得巨大的规 模效益，为现代农业生产和生态环境的可持续发展，为农业等相关产业结构的 调整提供重要的技术保障。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种新的抑菌谱广、抑菌效果好的芽孢杆菌菌种(30"7/1 0附>^0//^^/^^";0，还提供了一种高效、无毒、安全的防治植 物病害的微生物制剂及其低成本的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是一种解淀粉芽孢杆菌(5acz7/ws awy/o/z々we/ac/era) YN-l，其保藏编号为 CGMCC NO. 2328。一种以上述解淀粉芽孢杆菌制备的微生物制剂，以重量份计，该微生物制 剂含有解淀粉芽孢杆菌YN-l CGMCC NO. 2328发酵液82 95份，表面活性剂2 8份，防腐剂1 4份。所述微生物制剂还含有抗冻剂2 6份。所述解淀粉芽孢杆菌发酵液是通过如下方法制得将所述解淀粉芽孢杆菌YN-1接种于培养液，发酵培养至少36小时，将发 酵液过滤，灭菌，再将其浓縮至原来体积的40 60%后即成；所述培养液中含 有葡萄糖8 12g/L、玉米粉10 16g/L、黄豆饼粉10 16g/L。上述生物制剂可以通过常规的灌根、浸种、喷雾等方法施用。可单独使用， 也可以与对本生防菌株无副作用的其它杀菌剂、植物调节剂混合使用。 一般在作物播种期或病害始发期施用，方法是播种前，采用发酵制剂与种子拌种；或 在病害始发期，通过灌根施入作物根际或喷雾施用。 一种微生物制剂的制备方法，包括以下步骤(1) 试管菌种制备将解淀粉芽孢杆菌YN-l CGMCC NO. 2328接种到试管 NYDA斜面培养基上，26 3(TC下培养24 48小时获得试管菌种；(2) 种子液制备将上述试管菌种接入NYD培养液内，在26 30。C下培养12 16小时制成一级种子液，然后以l: 100 150的体积比将一级种子液接入 NYD培养液内，在26 3(TC下进行发酵培养12 14小时，获得二级种子液；(3)发酵培养基制备取葡萄糖、玉米粉、黄豆饼粉加水配制成含葡萄糖 8 12g/L、玉米粉10 16g/L、黄豆饼粉10 16g/L的培养基；(4 )液体发酵生产对发酵设备及培养基灭菌后，将二级种子液按1: 20 30的体积比接种于培养液，在26 3(TC下发酵培养至少36小时后，将发酵液 过滤，灭菌，再将其浓縮至原来体积的40 60%即得YN-1菌株发酵液；(5)制剂制备取上步所得YN-1菌株发酵液82 95份、表面活性剂2 8份、防腐剂1 4份，充分混匀即成。在上述步骤(5)中，还可进一步混入抗冻剂2 6份。上述抗冻剂为乙二醇、尿素、氯化钙、氯化钠中的至少一种。 上述表面活性剂0204、 SilwetL-77、 Mon 0818、 0P-10中的至少一种。上述防腐剂为水杨酸钠、氯化钠中的至少一种。 本专利技术具有积极有益的效果1. 所筛选出的及"附;^//^^/^&^，-1抑菌谱广、抑菌效果好，其对苹果 轮纹病菌(尸/2ysa/asp0rap/r/co/a Nose.)、苹果树腐j;兰病菌(f^Zs"附g// Miyabe et Yamada)、苹果褐斑病菌(Marasom'"a ma// (R Henn.)Tto.)、黄瓜灰霉病菌(Bo^y他 c/"e阳")禾口辣椒枯萎病菌(Fw5W7'w/w o:9^ponw f.sp.ca;w/cw附)有较强的抑审lj作 用，室内YN-1菌株对褐斑病菌的抑菌效果达90% (参见实施例3)，说明该菌 及其代谢产物可用于制备广谱、高效生物制剂，具有极为广阔的工业化生产前 景。2. 本专利技术的微生物制剂主要防治对象为苹果褐斑病、苹果腐烂病等。除此 之外，以该菌株制备的生物制剂对黄瓜、辣椒、西瓜、棉花、小麦等农作物以及地黄、山药等药用植物的轮纹病菌、腐烂病菌、褐斑病菌、灰霉病菌、枯萎 病菌、炭疽病等真菌病害也有较好的防治效果；在济源市王屋山林场、温县等 地的田间小区进行的防效试验表明该生防制剂效果显著、稳定性好，能够有 效的防治苹果褐斑病、小麦纹枯病等真菌病害，对苹果轮斑病、褐斑病等病害 的防治效果可高达81.4% (见实施例IO)。3.本专利技术生物制剂的制备方法简单、合理，筛选出了成本低廉的工业用培 养基，大大降低了工业化生产成本，有利该生物制剂的应用普及。本专利技术所述解淀粉芽孢杆菌(&cz7/ws am_y/o/zXac/ms) YN-1,已于2008 年1月9日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其简称为 CGMCC,保藏编号为CGMCC NO. 2328。具体实施例方式实施例l菌种筛选指示菌以苹果轮纹病菌(尸/2;wz/o^orapWco/a Nose.)、苹果腐烂病菌(Fa/s" 附a// Miyabe et Yamada)、苹果褐孩王病菌(Aforaso"/"a w"// (P. Henn.)Tto.)、西瓜 枯菱病菌(i^s"Ww附ax^s/ on/附(Schl.)f.sp.w/ve"m(Smith)Snyder)、黄瓜枯菱病菌 CFwsan'ww2 ax^s/ orww (Schl.)f.sp. C^/cw/wen'www Owen.)、辣椒枯妻病(Fusan'w附 ojjQ^porwm f.sp.cajM7'cM/w)、棉花枯菱病 (T^wsan'ww o;^^spon'wm Schl. f.sp. vos7一"謂入小麦纹枯病Wz"o"ia cereals van der Hoeven apud. Boerema & Verhoeven)作为指示菌。培养基NYDA培养基(牛肉膏8g，蛋白胨8g，葡萄糖10g，琼脂15g，补水 至1000ml)、 NYD培养基(牛肉膏8g，蛋白胨8g，葡萄糖10g，补水至1000ml)及 PDA培养基(去皮马铃薯200g，葡萄糖10g，琼脂粉15g，补水至1000ml)、两用 培养基(去皮马铃薯200g、牛肉膏本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种解淀粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）ＹＮ－１，其保藏编号为ＣＧＭＣＣ ＮＯ．２３２８。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘玉霞，杨丽荣，倪云霞，刘新涛，刘红彦，任应党，王飞，薛保国，
申请(专利权)人：河南省农业科学院，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]
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