ZCCHC12在骨肉瘤中的应用制造技术

本发明专利技术公开了ZCCHC12在骨肉瘤中的应用。本发明专利技术公开了ZCCHC12在骨肉瘤诊断和治疗中的应用；本发明专利技术同时公开了一种诊断骨肉瘤的产品，所述产品包括检测ZCCHC12水平的试剂；本发明专利技术还公开了一种药物组合物，所述药物组合物包括ZCCHC12的抑制剂。

The application of ZCCHC12 in osteosarcoma

The invention discloses the application of ZCCHC12 in osteosarcoma. The present invention discloses the application of ZCCHC12 in the diagnosis and treatment of osteosarcoma; the invention also discloses a diagnosis of osteosarcoma products, the agent products include detection of ZCCHC12 level; the invention also discloses a pharmaceutical composition, pharmaceutical compositions comprising the inhibitors of ZCCHC12.

【技术实现步骤摘要】
ZCCHC12在骨肉瘤中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及ZCCHC12在骨肉瘤中的应用。
技术介绍
骨肉瘤(Osteosarcoma，OS)属于常见的原发性恶性骨肿瘤之一，多发于青少年(DurfeeRA,MohammedM,LuuHHetal.RheumatolTher.2016,3(2):221-243)。截肢手术是20世纪70年代前治疗骨肉瘤的标准方法，但该种手术对患者的肢体功能影响大，给患者带来较大的心理伤害。随着医疗技术的迅猛发展，外科手术、化疗药物、放化疗辅助治疗等手段均取得了长足的进步，保肢治疗逐渐成为骨肉瘤的主要治疗方法，尤其是新辅助化疗联合保肢手术在临床治疗骨肉瘤中取得了极大的成功，免除了患者截肢的痛苦，5年内生存率提高到80％以上[5]。在这之后分子靶向治疗、免疫治疗和基因治疗逐渐成为研究热点，为骨肉瘤治疗谱写了新的篇章。绝大多数骨肉瘤在诊断时已经成为高等级的恶性肿瘤，而且极易发生早期转移。最常见的远处转移部位是肺，约占90％(OsasanS,ZhangM,ShenFetal.AnticancerRes.201636(9):4391-4398)。因此，如何抑制骨肉瘤的转移，研究有效的治疗方法、提高患者的生存率是急需解决的问题。手术治疗、放疗、化疗、免疫治疗等骨肉瘤常用治疗方式之外，努力探索更有效的骨肉瘤早期诊断、早期抑制骨肉瘤转移、降低骨肉瘤患者死亡率的新的治疗方法。细胞因子及其受体在细胞信号转导、细胞的增殖和分化过程中起着重要作用，在骨肉瘤细胞的快速增殖过程中，必然引起细胞因子及其受体表达和分布的变化(SainiVl,HoseCD,MonksA,etal.PLoSOne.2012；7(8):e41401)。因此寻找特征性存在于骨肉瘤细胞，或由骨肉瘤细胞异常产生的物质，或是宿主对骨肉瘤的刺激反应而产生的物质，并据此反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的肿瘤标志物是当前的研究热点，如专利201510075917.2、201510075920.4、201510075918.7、201510075919.1就对与骨肉瘤发生、发展相关的基因进行了摸索。随着对骨肉瘤分子生物研究的深入，骨肉瘤的靶向治疗也越来越多的成为研究的重点，并代表着未来的发展方向，寻找新的有效的生物标志物，对于骨肉瘤的早期诊断以及靶向治疗具有重要的意义。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于，提供一种诊断骨肉瘤的产品。本专利技术的目的之二在于，提供一种治疗骨肉瘤的药物组合物。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种诊断骨肉瘤的产品，所述产品包括检测ZCCHC12水平的试剂。其中，ZCCHC12在骨肉瘤患者中表达上调，所述产品包括(但不限于)制剂、芯片、试剂盒。进一步，所述试剂选自：特异性识别ZCCHC12基因的探针；或特异性扩增ZCCHC12基因的引物；或特异性结合ZCCHC12编码的蛋白的抗体或配体。进一步，特异性扩增ZCCHC12基因的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。本专利技术提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括ZCCHC12的抑制剂。进一步，所述抑制剂选自：核酸抑制物，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子。进一步，所述抑制剂为核酸抑制物siRNA，优选的，siRNA的序列如SEQIDNO.9～10所示。本专利技术提供了ZCCHC12的如下任一项所述的应用：a.ZCCHC12在制备诊断骨肉瘤的产品中的应用；b.ZCCHC12在制备治疗骨肉瘤的药物组合物中的应用；c.ZCCHC12在制备治疗骨肉瘤转移的药物组合物中的应用；d.ZCCHC12在筛选治疗骨肉瘤的候选药物中的应用。进一步，a中所述产品包括用RT-PCR、实时定量PCR、新一代测序、原位杂交、芯片或免疫测定技术检测ZCCHC12的试剂。进一步，b或c中所述药物组合物包括ZCCHC12抑制剂，和/或与所述抑制剂配伍的其他药类以及药学上可接受的载体和/或辅料。药学上可接受的载体和/或辅料包括(但不限于)稀释剂、赋形剂、粘合剂、湿润剂、吸收促进剂、表面活性剂、致湿剂、吸附载体、润滑剂、缓冲剂、稳定剂、抑菌剂、等渗剂、螯合剂、pH控制剂。所述抑制剂选自：以ZCCHC12或其转录本为靶序列、且能够抑制ZCCHC12基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(siRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物；或特异性与ZCCHC12编码的蛋白结合的结合分子(如能够抑制ZCCHC12蛋白活性的抗体或配体)。进一步，d中筛选治疗骨肉瘤的候选药物的步骤包括：用候选物质处理表达或含有ZCCHC12基因或其编码的蛋白的体系；和检测所述体系中ZCCHC12基因或其编码的蛋白的表达或活性。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了ZCCHC12的表达水平与骨肉瘤的发生发展相关，通过检测ZCCHC12的水平，可以判断患者是否患有骨肉瘤或者患骨肉瘤的风险。本专利技术提供了一种诊断骨肉瘤的产品，该产品能够在骨肉瘤发病早期进行诊断，指导医生进行早期干预，提高患者的生存率和生活质量。本专利技术提供了一种治疗骨肉瘤的药物组合物和药物靶标，通过靶向治疗可以实现精准化治疗。附图说明图1是利用QPCR检测ZCCHC12基因在骨肉瘤组织中的表达情况图；图2是利用Westernblot检测ZCCHC12蛋白在骨肉瘤组织中的表达情况图；图3是ZCCHC12在骨肉瘤细胞中的转染情况图；其中，图A是利用QPCR检测转染对骨肉瘤细胞中ZCCHC12mRNA表达的影响图；图B是利用Westernblot检测转染对骨肉瘤细胞中ZCCHC12蛋白的影响图；图4是检测ZCCHC12基因对骨肉瘤细胞增殖的影响图；图5是检测ZCCHC12对骨肉瘤细胞迁移的影响图；图6是检测ZCCHC12对骨肉瘤细胞侵袭的影响图。具体实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，通过高通量测序方法，检测骨肉瘤标本中基因在肿瘤组织和癌旁组织的表达，发现差异表达基因，探讨其与骨肉瘤的发生之间的关系，从而为骨肉瘤的早期检测及靶向治疗寻找更好的途径和方法。通过筛选，本专利技术首次发现了骨肉瘤中ZCCHC12显著性上调。实验证明，通过降低ZCCHC12的表达水平，能够有效地抑制骨肉瘤细胞的生长和侵袭，提示检测ZCCHC12基因的表达水平可成为骨肉瘤早期诊断的辅助诊断指标之一，干扰ZCCHC12基因表达可成为预防或治疗骨肉瘤或骨肉瘤转移的新途径。(生物)标志物标志物(单独使用或与其他定性术语组合例如骨肉瘤标志物、骨肉瘤特异性标志物、对照标志物、外源标志物、内源标志物)指可测量、可计算或可以其他方式获得的，与任何分子或分子组合相关，可用作生物和/或化学状态的指示物的参数。在本专利技术中，“标志物”指与一个或多个生物分子相关的参数(即“生物标志物”)，例如天然或人工合成产生的核酸(即个体基因，以及编码和非编码DNA和RNA)和蛋白(例如肽、多肽)。本专利技术中的“标志物”还包括指可通过考虑来自两个或多个不同标志物的表达数据计算或以其他方式获得的单个参数。骨肉瘤标志物指可以用作(单独或与其他标志物组合)受试者中骨肉瘤指示物的特定类型的标本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诊断骨肉瘤的产品，其特征在于，所述产品包括检测ZCCHC12水平的试剂。

【技术特征摘要】
1.一种诊断骨肉瘤的产品，其特征在于，所述产品包括检测ZCCHC12水平的试剂。2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于，所述试剂选自：特异性识别ZCCHC12基因的探针；或特异性扩增ZCCHC12基因的引物；或特异性结合ZCCHC12编码的蛋白的抗体或配体。3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，特异性扩增ZCCHC12基因的引物序列如SEQIDNO.1～2所示。4.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括ZCCHC12的抑制剂。5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述抑制剂选自：核酸抑制物，蛋白抑制剂，蛋白水解酶，蛋白结合分子。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述抑制剂为核酸抑制物siRNA，优选的，siRNA的序列如SEQIDNO.9～10所示。7.ZCCHC12的如下任一项所述的应用：a...

【专利技术属性】
技术研发人员：常鹏，孙耀兰，肖枫，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11