口蹄疫病毒多重RT-PCR检测试剂盒、其制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种口蹄疫病毒多重ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，其制备方法及应用，属于动物疫病检测领域。本发明专利技术试剂盒的正链扩增引物由引物１、引物２和引物３所示的核苷酸序列组成；所述的负链扩增引物由引物４、引物５和引物６所示的核苷酸序列组成。多重ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒具有较高的敏感性，较常规ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒的灵敏度高１０～１００倍，且具有很好的特异性，即使由于临床样品保存不当或采集时不新鲜时，口蹄疫病毒ＲＮＡ因各种原因降解断裂，仍可以得到正确的结果，有效解决了病毒含量低微样品不易检出的问题，提高了诊断的可靠性，缩短了检测时间，减少了样品之间交叉污染的机会，检测结果更为准确、可靠。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种口蹄疫病毒多重ＲＴ－ＰＣＲ检测试剂盒，包括彼此独立分装的以下各组分，各组分的用量至少不低于进行一次ＲＴ－ＰＣＲ反应的用量：ＲＴ－ＰＣＲ反应缓冲液，ｄＮＴＰ混合物，２５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＭｇＣｌ↓［２］，反转录酶，ＲＮａｓｅ抑制子，Ｔａｑ酶，无ＲＮＡ酶的双蒸水，正链扩增引物和负链扩增引物，其特征在于：所述的正链扩增引物由以下三种引物组成：引物１：ＧＡＣＴＣＧ／ＡＡＣＧＴＣＴＣＣＣ／ＴＧＣＣＡＡＣＴ，　引物２：ＡＣＧＡＣＧ／ＣＧＧＧＧＣＴＴＴＴＧＣＴＴＴＣＡＣ，　引物 ３：ＣＧ／ＴＧＧＡＡＡＣＧＣＡＣ／ＴＧＡＧＣＡＧＴＡＴＣ；　所述的负链扩增引物由以下三种引物组成：　引物４：ＴＧＣＧＧ／ＴＡＣＧＧＣＣＡＣＣ／ＧＴＡＣＴＡＣＴＴＣ，　引物５：ＡＧＣＴＣＣＡＣＧＡＡ／ＧＡＡＡ／ＧＧＴＧＴＣＧ ＡＧ，　引物６：ＣＧＴＧＡＴＧＴＧ／ＡＧＣＧ／ＡＡＧＡＡＴＧＡＡＧＡＡ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘在新，包慧芳，郭建宏，卢曾军，谢庆阁，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：62[中国|甘肃]