氯膦酸二钠脂质体在肿瘤阿霉素化疗辅助治疗方面的用途制造技术

本发明专利技术公开了氯膦酸二钠脂质体在肿瘤阿霉素化疗辅助治疗方面的用途，本发明专利技术通过将适量的胆固醇、卵磷脂置于混合后，加入氯仿‑甲醇混合液，采用旋转薄膜蒸发法制备均匀的脂质干膜，再加入氯膦酸二钠的磷酸缓冲液即得。本发明专利技术的技术效果在于发现制备稳定高效的氯膦酸二钠脂质可减弱阿霉素引起的心肌毒性且增加阿霉素对乳腺癌的治疗效果。

The use of phosphonium two liposome in adjuvant chemotherapy of doxorubicin for tumor

The present invention discloses clodronic acid two sodium liposome used in cancer chemotherapy in the treatment of adriamycin, the amount of cholesterol and lecithin in mixing, adding chloroform methanol mixture, using lipid rotary film evaporation prepared uniform dry film, phosphate buffer with two sodium chloride phosphonic acid that was. The technical effect of the invention is that it is found that the preparation of stable and efficient sodium phosphonium chloride two sodium lipid can attenuate adriamycin induced myocardial toxicity and increase the therapeutic effect of adriamycin on breast cancer.

【技术实现步骤摘要】
氯膦酸二钠脂质体在肿瘤阿霉素化疗辅助治疗方面的用途
本专利技术涉及一种药物的用途，具体涉及氯膦酸二钠脂质体的新用途。
技术介绍
心衰已经日益成为心血管病中最常见、对患者危害最大的疾病，而导致心衰的原因又十分复杂多样，因此心衰已成为心血管病研究领域的重点和难点。而在肿瘤治疗过程中心脏毒副作用也会引起病人的心衰，从而严重影响肿瘤患者的生存质量，更重要的是，毒性的发展可能导致抗肿瘤治疗方案的调整甚至停止，影响患者的生存(BinaschiM,etal.,2001)。抗肿瘤药物引起的心脏毒性表现复杂多样，常见的表现包括心律失常、心肌缺血、冠状动脉疾病、高血压和心肌功能障碍。常见的引起心脏毒性的抗肿瘤药物主要有两大类：一类是化疗药物，包括蒽环类(多柔比星、表柔比星、柔红霉素等)、烷化剂(环磷酰胺、异环磷酰胺等)、抗细胞微管剂(紫杉醇)、抗代谢类(氟尿嘧啶)等，另一类是靶向药物，如曲妥珠单抗和拉帕替尼等。阿霉素，属广谱高效抗肿瘤药，是临床上最为常用的一种蒽环类抗肿瘤药物，但其心脏毒性严重。阿霉素对心肌细胞具有独特的亲和力，易在心脏中特异性蓄积，并且在代谢过程中产生活性氧，过量的攻击心肌细胞，引起心肌氧化损伤(KimSY,etal.,2006)。研究表明，可增加心肌细胞内的产生和降低心肌细胞内抗氧化物酶的活性，使心肌细胞处于氧化应激状态，从而引起心肌病和充血性心力衰竭。同时研究显示，阿霉素心脏毒性涉及众多作用因素，如引起细胞凋亡、自噬、氧化应激、直接破坏核酸和蛋白合成、线粒体损伤、血管活性胺释放等(KwokJC,etal.,2003)。因此，多年来关于有效防治心脏毒性的研究一直备受研究者们的关注。氯膦酸二钠(clodronicacid)为第一代双膦酸盐药，临床上主要用于癌症引起的溶骨性骨转移及骨质疏松症、高钙血症(PeterSeiler,etal.,1997)。可避免或延迟由癌症引起的溶骨性骨转移、延迟或防止溶骨性骨转移恶变的继续发展，也可以减少溶骨性骨转移导致的病理性骨折变化，并且不影响正常骨矿化作用，防止高钙血症及保持血清钙浓度的正常水平。研究发现，静脉注射含有氯膦酸二钠的脂质体可以选择性地清除体内巨噬细胞(SMZeisberger,etal.,2006)。运用其这一特性，可将氯膦酸二钠的脂质体用于一些炎症疾病的治疗。因此，对于肿瘤患者而言，在用阿霉素进行抗肿瘤治疗时，需要使用心肌保护剂。好的心肌保护剂应该是在不影响阿霉素抗肿瘤的作用下又能保护心肌细胞不受损害。
技术实现思路
为了解决现有技术中用阿霉素进行抗肿瘤治疗时可诱导心肌细胞凋亡、坏死，心肌纤维化增多，心肌收缩力降低，并最终导致心室重塑和充血性心力衰竭的问题，本专利技术提供氯膦酸二钠脂质体在制备具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用药物中的应用，氯膦酸二钠脂质体性质稳定，进入体内后，降解周期较长，药效持久，具有较好的生物相容性，且已有报道氯膦酸二钠脂质体能抑制肿瘤的生长。因此，氯膦酸二钠脂质体对降低阿霉素引起的心肌毒性作用高效低毒。为了实现以上目的，本专利技术的技术方案如下：本专利技术提供氯膦酸二钠脂质体在制备具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用药物中的应用。所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指对肿瘤阿霉素化疗具有增效减毒的作用。所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指氯膦酸二钠脂质体对阿霉素引起的心肌毒性有减弱作用。所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指氯膦酸二钠脂质体可增加阿霉素抗肿瘤的效果。优选地，所述氯膦酸二钠脂质体的制备方法为：称取胆固醇、卵磷脂置于容器中，加入氯仿-甲醇混合液，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇体积比＝2:1，在50-60℃条件下，采用旋转薄膜蒸发法制备厚度为0.1-0.2mm的脂质干膜，以氮气吹干残余溶剂，再加入溶有纯度为98％的氯膦酸二钠的磷酸缓冲液，使脂质膜充分溶胀水化，在超声功率400W的条件下按照超声5秒，停5秒的频率超声5min，随后22000rpm，10℃条件下离心1小时，下层脂质体用ph＝7.2的磷酸缓冲盐溶液重悬即得；所述胆固醇与卵磷脂质量比为胆固醇：卵磷脂＝1:10；所述氯膦酸二钠与卵磷脂摩尔比为氯膦酸二钠：卵磷脂＝1:10。优选地，上述应用中氯膦酸二钠脂质体治疗方式为局部给药或口服。本专利技术通过以下实验证明氯膦酸二钠脂质体减轻阿霉素心脏毒性及增加阿霉素抗肿瘤的效果的作用：①氯膦酸二钠脂质体预处理C57BL/6小鼠后注射阿霉素，心肌酶谱水平降低；②氯膦酸二钠脂质体预处理C57BL/6小鼠后注射阿霉素，小鼠体重降低趋势变缓；③氯膦酸二钠脂质体预处理过的荷瘤Balb/c小鼠后注射阿霉素，心肌酶谱水平降低，肿瘤体积随氯膦酸二钠脂质体的浓度增高而减少。本专利技术具有以下优点：1)本专利技术制备氯膦酸二钠脂质体工艺成熟可靠，原料来源广泛且质量优良。2)现有的降低心衰的药会导致诸如骨髓抑制、肝、肾功能异常等，同时该药会降低蒽环类药物的抗癌药效且其价格昂贵。氯膦酸二钠脂质体性质稳定，具有较好的生物相容性，且已有报道氯膦酸二钠能抑制肿瘤的生长。因此，氯膦酸二钠脂质体对降低阿霉素引起的心肌毒性作用高效低毒。3)氯膦酸二钠脂质体在发挥降低心肌毒性的同时,还可以降低肿瘤细胞的骨转移。4)氯膦酸二钠脂质体性质稳定进入体内后，降解周期较长，药效持久。5)将氯膦酸二钠脂质体作为药物，可避免连接配基带来的免疫原性问题，同时大幅度降低制药成本。6)本专利技术采用常规给药剂型，技术成熟，生产工艺简单易行。7)本专利技术采用常规给药方式，给药方便，无痛苦。附图说明图1氯膦酸二钠脂质体减缓小鼠体重降低趋势；图2氯膦酸二钠脂质体降低心肌酶谱水平；图3氯膦酸二钠脂质体与阿霉素联用减小乳腺癌小鼠肿瘤体积和质量；图4氯膦酸二钠脂质体与阿霉素联用降低乳腺癌小鼠心肌酶谱水平；具体实施方式通过以下详细说明结合附图可以进一步理解本专利技术的特点和优点。所提供的实施例仅是对本专利技术方法的说明，而不以任何方式限制本专利技术揭示的其余内容。【实施例1】氯膦酸二钠脂质体制备及表征检测(一)氯膦酸二钠脂质体制备1.制备方法：称取胆固醇、卵磷脂和氯膦酸二钠置于容器中，加入氯仿-甲醇混合液，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇体积比＝2:1，在50-60℃条件下旋转薄膜蒸发法旋转制膜20-50min，制成均匀的脂质干膜；所述脂质干膜厚度为0.1-0.2mm；以氮气吹干残余溶剂，再加入溶有氯膦酸二钠的膦酸缓冲液，使脂质膜充分溶胀水化，在超声功率400W的条件下超声5min，随后22000rpm，10℃条件下离心1小时，下层脂质体用ph＝7.2的磷酸缓冲盐溶液重悬即得；所述胆固醇与卵磷脂质量比为胆固醇：卵磷脂＝1:10；所述氯膦酸二钠与卵磷脂摩尔比为氯膦酸二钠：卵磷脂＝1:10。上述制备得到的氯膦酸二钠脂质体的粒径为224.8±4.5nm,其包封率＞55％。2.处方设计与优化参照文献和单因素试验预试分析，确定正交实验的因素及水平。以药物包封率为评价指标，采用正交实验进行处方筛选和优化。(二)氯膦酸二钠脂质体表征1.形态学观察和粒径大小测定采用普通光学显微镜和透射电镜磷钨酸负染法观察脂质体。采用激光粒径测量仪测定平均粒径。2.脂质体包封率测定1)紫外光谱扫描将药物、含药脂质体和空白脂质体分别用甲醇-蒸馏水(1:1，V/V)混合液溶解稀本文档来自技高网...

【技术保护点】
氯膦酸二钠脂质体在制备具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.氯膦酸二钠脂质体在制备具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指对肿瘤阿霉素化疗具有增效减毒的作用。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指氯膦酸二钠脂质体对阿霉素引起的心肌毒性有减弱作用。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述具有肿瘤阿霉素化疗辅助治疗作用是指氯膦酸二钠脂质体可增加阿霉素抗肿瘤的效果。5.权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述氯膦酸二钠脂质体的制备方法为：称取胆固醇、卵磷脂置于容器中，加入氯仿-甲醇混合液，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晓阳，黄可晴，杨静，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42