用于检测白粉病的方法和试剂盒技术

本发明专利技术涉及用于特异性检测葡萄上的白粉病的致病原——真菌葡萄白粉菌(Erysiphe necator)的工具、方法和试剂盒。更具体而言，本发明专利技术的方法是基于定量聚合酶链式反应的定量方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测白粉病的方法和试剂盒
本专利技术涉及用于检测葡萄上的白粉病的致病原——真菌葡萄白粉菌(Erysiphenecator)的方法和试剂盒。更具体而言，本专利技术的方法是基于定量聚合酶链式反应的定量方法。
技术介绍
由葡萄白粉菌(也称为葡萄钩丝壳菌(Uncinulanecator))引起的葡萄藤白粉病是全世界传播范围最广的葡萄藤(葡萄(VitisviniferaL.))病害之一。葡萄白粉菌属于子囊菌纲(ascomycetes)并且是专性的生体营养性真菌，即其生长和繁殖完全依赖于其活的葡萄藤宿主(葡萄和叶)。因此，葡萄藤白粉菌无法在体外培养，难以低温保藏，并且尚未建立可靠的转化方案，对于在实验室的实验中使用它而言造成严重的挑战(Spanuetal.,2012,NewPhytologist195:20-22)。尽管它们很重要，葡萄园白粉菌的分子表征和遗传数据库信息仍然很少。除了小麦白粉菌(Blumeriagraminis)，白粉菌目(Erysiphales)仅有23种表达的序列标签(EST)保藏在GenBank(国家生物技术信息中心，2009)。白粉菌的这种表达数据的缺少的主要促成因素本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种寡核苷酸引物，其选自：(i)具有核苷酸序列SEQ ID NO:1、3、4或5的寡核苷酸；(ii)具有与核苷酸序列SEQ ID NO:1、3、4或5互补的核苷酸序列的寡核苷酸；(iii)具有寡核苷酸SEQ ID NO:1、2、3、4、5或它们的互补核苷酸序列的至少10个连续核苷酸的核苷酸序列的寡核苷酸，但排除(a)具有核苷酸序列SEQ ID NO:2的特定寡核苷酸，和(b)具有核苷酸序列tcactctgtc的特定寡核苷酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.10 EP 15290182.31.一种寡核苷酸引物，其选自：(i)具有核苷酸序列SEQIDNO:1、3、4或5的寡核苷酸；(ii)具有与核苷酸序列SEQIDNO:1、3、4或5互补的核苷酸序列的寡核苷酸；(iii)具有寡核苷酸SEQIDNO:1、2、3、4、5或它们的互补核苷酸序列的至少10个连续核苷酸的核苷酸序列的寡核苷酸，但排除(a)具有核苷酸序列SEQIDNO:2的特定寡核苷酸，和(b)具有核苷酸序列tcactctgtc的特定寡核苷酸。2.一个寡核苷酸引物对，其由选自以下的一个正向寡核苷酸引物和一个反向寡核苷酸引物组成：(i)寡核苷酸对，其正向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:1，且反向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:2；正向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:3，且反向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:4；正向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:3，且反向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:5；(ii)寡核苷酸对，其反向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:1互补，且正向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:2互补；反向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:3互补，且正向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:4互补；反向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:3互补，且正向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:5互补；(iii)任何寡核苷酸对，其核苷酸序列为(i)和(ii)的寡核苷酸对的至少10个连续核苷酸的核苷酸序列。3.权利要求2的寡核苷酸引物对，其中所述对由以下组成：(i)寡核苷酸对，其正向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:1，且反向引物的核苷酸序列为SEQIDNO:2；(ii)寡核苷酸对，其反向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:1互补，且正向引物的核苷酸序列与核苷酸序列SEQIDNO:2互补；(iii)任何寡核苷酸对，其核苷酸序列为(i)和(ii)中的寡核苷酸对的至少10个连续核苷酸的核苷酸序列。4.一种寡核苷酸探针，其选自：(i)具有核苷酸序列SEQIDNO:6和SEQIDNO:7的寡核苷酸；(ii)具有与核苷酸序列SEQIDNO:6和SEQIDNO:7互补的核苷酸序列的寡核苷酸；(iii)具有(i)和(ii)中的寡核苷酸的至...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·迪布尔内，S·谢拉，S·瓦舍，
申请(专利权)人：拜耳简易股份有限公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR