用于构建猴子BCR文库的成套试剂与方法技术

本发明专利技术公开了用于构建猴子BCR文库的成套试剂与方法。本发明专利技术公开的构建猴子BCR文库的成套试剂为成套试剂A或成套试剂B；成套试剂A由成套试剂A1与成套试剂A2组成，成套试剂A1为序列表中序列1‑7所示的七条单链DNA，成套试剂A2为在序列表中序列8‑17的5′端均标记生物素的十条单链DNA；成套试剂B由成套试剂B1与成套试剂B2组成，成套试剂B1为序列表中序列18‑24所示的七条单链DNA，成套试剂B2为在序列表中序列25‑34的5′端均标记生物素的十条单链DNA。利用本发明专利技术的成套试剂构建的猴子BCR文库覆盖度高。

A set of reagents and methods for the construction of the monkey BCR Library

The present invention discloses a set of reagents and methods for building a monkey BCR library. The invention discloses a reagent set to construct the monkey BCR library was A reagent or B reagent; A reagent by A1 reagent and A2 reagent, A1 reagent is seven monocatenarian DNA sequence 1 in the sequence table shown in Figure 7, A2 reagent for biological ten monocatenarian DNA pigment were mark in the sequence 8 in the sequence table 17 5 'end; B reagent by B1 reagent and B2 reagent, B1 reagent is seven monocatenarian DNA sequence 18 in the sequence table shown in Figure 24, B2 reagent in the sequence 25 in the sequence table 34 5' end is marked biotin ten monocatenarian DNA. The monkey BCR library, constructed by the complete reagents of the invention, has high coverage.

【技术实现步骤摘要】
用于构建猴子BCR文库的成套试剂与方法
本专利技术涉及生物
中，用于构建猴子BCR文库的成套试剂与方法。
技术介绍
获得性免疫又称为特异性免疫，是在抗原刺激下，机体产生的自我保护系统。这个系统主要由淋巴细胞构成，在抗原刺激下，淋巴细胞发生特异性的扩增，进而发挥生理作用。其中，淋巴细胞参与抗原识别的分子，在T、B淋巴细胞上分别是T细胞抗原识别分子(TCR)、B细胞抗原识别分子(BCR)。在人体内，TCR是由异源二聚体分子构成的，主要有αβ型和γδ型，其中，外周循环系统中，超过95％的TCR是属于αβ型。与此同时，这种二聚体组合也具有多样性，目前，已知的种类约2X107。而上述的多样性由其基因决定，主要是染色体V\D\J基因区域存在复等位基因以及缺失和插入现象。在这一复杂基因区域中，有一段基因位置是高可变区，是主要的抗原决定区域，它由部分V\J区和全部的D区构成，被称为互补决定区3(CDR3)。B细胞受体是表达在B细胞表面的抗原识别分子，同时，它也能够被释放入外周系统，是主要的体液免疫分子。BCR的单体结构，主要是有两条轻链和两条重链所构成。与TCR类似，它也存在一段可变区，分别被本文档来自技高网...

【技术保护点】
成套试剂，为名称分别为成套试剂A或成套试剂B的成套试剂；所述成套试剂A包括名称为成套试剂A1的成套试剂；所述成套试剂A1由名称分别为成套试剂A11和成套试剂A12的成套试剂组成；所述成套试剂A11由名称分别为IGHG‑A1、IGHD‑A2、IGHA‑A3、IGHM‑A4和IGHE‑A5的单链DNA组成；所述IGHG‑A1是如下a11)至a14)中的任一种单链DNA：a11)序列表中序列1的所示的单链DNA；a12)在a11)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a13)与a11)或a12)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a14)在严格条件下与a11)或a...

【技术特征摘要】
1.成套试剂，为名称分别为成套试剂A或成套试剂B的成套试剂；所述成套试剂A包括名称为成套试剂A1的成套试剂；所述成套试剂A1由名称分别为成套试剂A11和成套试剂A12的成套试剂组成；所述成套试剂A11由名称分别为IGHG-A1、IGHD-A2、IGHA-A3、IGHM-A4和IGHE-A5的单链DNA组成；所述IGHG-A1是如下a11)至a14)中的任一种单链DNA：a11)序列表中序列1的所示的单链DNA；a12)在a11)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a13)与a11)或a12)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a14)在严格条件下与a11)或a12)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHD-A2是如下a21)至a24)中的任一种单链DNA：a21)序列表中序列2的所示的单链DNA；a22)在a21)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a23)与a21)或a22)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a24)在严格条件下与a21)或a22)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHA-A3是如下a31)至a34)中的任一种单链DNA：a31)序列表中序列3的所示的单链DNA；a32)在a31)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a33)与a31)或a32)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a34)在严格条件下与a31)或a32)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHM-A4是如下a41)至a44)中的任一种单链DNA：a41)序列表中序列4的所示的单链DNA；a42)在a41)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a43)与a41)或a42)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a44)在严格条件下与a41)或a42)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHE-A5是如下a51)至a54)中的任一种单链DNA：a51)序列表中序列5的所示的单链DNA；a52)在a51)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a53)与a51)或a52)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a54)在严格条件下与a51)或a52)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂A12由名称分别为IGKC-A6和IGLC-A7的单链DNA组成；所述IGKC-A6是如下a61)至a64)中的任一种单链DNA：a61)序列表中序列6的所示的单链DNA；a62)在a61)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a63)与a61)或a62)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a64)在严格条件下与a61)或a62)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGLC-A7是如下a71)至a74)中的任一种单链DNA：a71)序列表中序列7的所示的单链DNA；a72)在a71)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；a73)与a71)或a72)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；a74)在严格条件下与a71)或a72)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂B包括名称为成套试剂B1的成套试剂；所述成套试剂B1由名称分别为成套试剂B11和成套试剂B12的成套试剂组成；所述成套试剂B11由名称分别为IGHG-B1、IGHD-B2、IGHA-B3、IGHM-B4和IGHE-B5的单链DNA组成；所述IGHG-B1是如下b11)至b14)中的任一种单链DNA：b11)序列表中序列18的所示的单链DNA；b12)在b11)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b13)与b11)或b12)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b14)在严格条件下与b11)或b12)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHD-B2是如下b21)至b24)中的任一种单链DNA：b21)序列表中序列19的所示的单链DNA；b22)在b21)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b23)与b21)或b22)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b24)在严格条件下与b21)或b22)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHA-B3是如下b31)至b34)中的任一种单链DNA：b31)序列表中序列20的所示的单链DNA；b32)在b31)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b33)与b31)或b32)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b34)在严格条件下与b31)或b32)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHM-B4是如下b41)至b44)中的任一种单链DNA：b41)序列表中序列21的所示的单链DNA；b42)在b41)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b43)与b41)或b42)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b44)在严格条件下与b41)或b42)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGHE-B5是如下b51)至b54)中的任一种单链DNA：b51)序列表中序列22的所示的单链DNA；b52)在b51)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b53)与b51)或b52)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b54)在严格条件下与b51)或b52)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述成套试剂B12由名称分别为IGKC-B6和IGLC-B7的单链DNA组成；所述IGKC-B6是如下b61)至b64)中的任一种单链DNA：b61)序列表中序列23的所示的单链DNA；b62)在b61)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b63)与b61)或b62)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b64)在严格条件下与b61)或b62)限定的单链DNA杂交的单链DNA；所述IGLC-B7是如下b71)至b74)中的任一种单链DNA：b71)序列表中序列24的所示的单链DNA；b72)在b71)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的单链DNA；b73)与b71)或b72)限定的单链DNA具有70％以上的同一性的单链DNA；b74)在严格条件下与b71)或b72)限定的单链DNA杂交的单链DNA。2.根据权利要求1所述的成套试剂，其特征在于：所述成套试剂A还包括名称为成套试剂A2的成套试剂；所述成套试剂A2由名称分别为成套试剂A21和成套试剂A22的成套试剂组成；所述成套试剂A21由名称分别为IGHG-PCR-A1、IGHD-PCR-A2、IGHA-PCR-A3、IGHM-PCR-A4和IGHE-PCR-A5的引物组成；所述IGHG-PCR-A1的序列为如下a81)至a84)中的任一种：a81)序列表中序列8的第14-31位；a82)在a81)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列；a83)与a81)或a82)限定的序列具有70％以上的同一性的序列；a84)在严格条件下与a81)或a82)限定的序列杂交的序列；所述IGHD-PCR-A2的序列为如下a91)至a94)中的任一种：a91)序列表中序列9的第14-32位；a92)在a91)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列；a93)与a91)或a92)限定的序列具有70％以上的同一性的序列；a94)在严格条件下与a91)或a92)限定的序列杂交的序列；所述IGHA-PCR-A3的序列为如下a101)至a104)中的任一种：a101)序列表中序列10的第14-32位；a102)在a101)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列；a103)与a101)或a102)限定的序列具有70％以上的同一性的序列；a104)在严格条件下与a101)或a102)限定的序列杂交的序列；所述IGHM-PCR-A4的序列为如下a111)至a114)中的任一种：a111)序列表中序列11的第14-31位；a112)在a111)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列；a113)与a111)或a112)限定的序列具有70％以上的同一性的序列；a114)在严格条件下与a111)或a112)限定的序列杂交的序列；所述IGHE-PCR-A5的序列为如下a121)至a124)中的任一种：a121)序列表中序列12的第14-31位；a122)在a121)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列；a123)与a121)或a122)限定的序列具有70％以上的同一性的序列；a124)在严格条件下与a121)或a122)限定的序列杂交的序列；所述成套试剂A22由名称分别为IGKC-PCR-A6、IGL1C-PCR-A7、IGL2C-PCR-A8、IGL3C-PCR-A9和IGL4C-PCR-A10的引物组成；所述IGKC-PCR-A6的序列为如下a131)至a134)中的任一种：a131)序列表中序列13的第14-33位；a132)在a131)的5′端和/或3′端添加一个...

【专利技术属性】
技术研发人员：林莉娅，张伟，王诗雨，
申请(专利权)人：深圳华大生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44