DNA标签序列及测序文库构建方法和试剂盒技术

技术编号:12309320 阅读:166 留言:0更新日期:2015-11-11 18:11
本发明专利技术涉及一种DNA标签,以及来5’末端连接有该DNA标签的PCR引物对,本发明专利技术还提供了由所述DNA标签和PCR引物对组成的构建测序文库的方法和试剂盒。本发明专利技术所提供的DNA标签与扩增引物形成一个特异性、灵敏度和重复性之间达到优化、平衡的检测产品,一次可以检测1-20个不同来源的样品,能够准确区分各种样本来源的碱基序列,本发明专利技术所述的高通量测序与测序法的吻合率高达100%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域,涉及医学和生物技术,具体的是涉及一种DNA标签 序列及测序文库构建方法和试剂盒。 技术背景 DNA测序(DNA sequencing)作为一种重要的实验技术,在生物学研究中有着广泛 的应用。1977年Sanger专利技术了具有里程碑意义的末端终止测序法,Sanger法因为既简便 又快速,并经过后续的不断改良,成为了迄今为止DNA测序(即一代测序)的主流。一代测 序作为基因组研究的主要研究手段和金标准,在过去的几十年里取得了重大的成就,也使 得临床分子诊断成为了可能,但成本较高,耗时较长,通量低限制了其在临床的广泛应用。 随着人类基因组计划的完成,人们进入了后基因组时代,即功能基因组时代,传统的测序 方法已经不能满足深度测序和重复测序等大规模基因组测序的需求,对模式生物进行基 因组重测序以及对一些非模式生物的基因组测序,都需要费用更低、通量更高、速度更快的 测序技术,这促使了新一代DNA测序技术的诞生,第二代测序技术是相应于以Sanger测序 法为代表的第一代测序技术而得名。 第二代测序的基本原理是边合成边测序。在Sanger等测序方法的基础上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种DNA标签序列,其特征是,包含至少一条以上序列,每条序列由6‑8个碱基组成、且i)标签序列中不含有3个以上碱基的重复序列;ii)标签序列的GC含量在40%~60%之间;iii)标签序列与扩增引物组合成标签引物后,内部不存在发卡结构或二聚体等二级结构;iv)不同的标签序列之间不存在非特异性结合,v)标签序列中不含有与扩增引物相似度大于80%的序列;v i)标签引物之间不形成二聚体、不存在错配、与PCR产物之间均不存在非特异性结合。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘志明吴诗扬廖传荣
申请(专利权)人:益善生物技术股份有限公司
类型:发明
国别省市:广东;44

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