一种腺苷含量的测定方法及其应用技术

本发明专利技术属于分析化学检测领域，尤其涉及一种腺苷含量的测定方法及其应用。本发明专利技术提供了一种腺苷含量的测定方法，所述测定方法为：溶解、提纯、过滤以及高效液相测定。本发明专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在绿原酸含量检测中的应用。本发明专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在芦丁含量检测中的应用。经实验测定可得，本发明专利技术提供的技术方案，可对待测样品中腺苷、绿原酸以及芦丁含量实现准确测定，进一步地，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。

A method for the determination of adenosine content and its application

The invention belongs to the field of analytical chemistry detection, in particular to a method for determining the content of adenosine and its application. The present invention provides a method for the determination of adenosine content, which is: dissolution, purification, filtration, and high performance liquid phase determination. The invention also provides an application of a method of measuring the content of chlorogenic acid in the determination of chlorogenic acid, including any of the above. The invention also provides an application of the determination method of the content of Rutin in the determination of rutin by any of the above. It is found that the technical scheme provided by the invention can accurately measure the content of adenosine, chlorogenic acid and rutin in the sample, and further improve the detection efficiency and accuracy of the adenosine, chlorogenic acid and rutin content in the soft capsule.

【技术实现步骤摘要】
一种腺苷含量的测定方法及其应用
本专利技术属于分析化学检测领域，尤其涉及一种腺苷含量的测定方法及其应用。
技术介绍
轻络素(Fruitflow)为一种水溶性番茄浓缩物，是首个经过科学证明、可促进血流健康的天然解决方案。轻络素是一种突破性的抗血栓成分，可保持血小板凝集，从而有助于维持心血管系统健康。轻络素作为一种安全天然的配料，不会破坏受伤后必需的凝血过程；已发表的临床研究表明，轻络素可使97％的受试者在摄入后1.5小时内血小板凝集减小，功效可保持长达18小时；同时，在10项临床研究中发现，轻络素长期使用未见副作用、过敏反应或与其他药物不配伍的现象。其中，腺苷、绿原酸和芦丁是轻络素的标志性功能成分，测定腺苷、绿原酸和芦丁的含量为含轻络素类制剂的质量标准提供依据。现有技术中已公开的的文献检测方法中，无法同时检测腺苷、绿原酸和芦丁三个成分；而且，文献对于样品的前处理方法，也无法达到同时提取腺苷、绿原酸和芦丁的作用。因此，研发出一种腺苷含量的测定方法及其应用，用于解决现有技术中，无法同时准确检测软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的技术缺陷，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种腺苷含量的测定方法及其应用，用于解决现有技术中，无法同时准确检测软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的技术缺陷，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。本专利技术提供了一种腺苷含量的测定方法，所述测定方法为：步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液；得第二产物；步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％的甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。优选地，步骤一中，第一溶剂和第二溶剂的体积比为1：(2～3)。优选地，步骤二中，所述离心的转速为5000～8000r/min，所述离心的时间为1～3min。优选地，步骤三中，所述第二产物与所述第二溶剂的体积比为1：(1～3)。优选地，步骤三中，所述有机相滤膜的孔径为0.22μm。优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，流动相A为三氟乙酸溶液，流动相B为甲醇，采用梯度洗脱的方式进行测定。优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，流速为0.8～1.2ml/min，柱温为25～40℃。优选地，步骤四中，高效液相色谱的测定中，检测波长为254nm。本专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在绿原酸含量检测中的应用。本专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在芦丁含量检测中的应用。综上所述，本专利技术提供了一种腺苷含量的测定方法，所述测定方法为：步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液，得第二产物；步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％的甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。本专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在绿原酸含量检测中的应用。本专利技术还提供了一种包括以上任意一项所述的测定方法在芦丁含量检测中的应用。经实验测定可得，本专利技术提供的技术方案，可对待测样品中腺苷、绿原酸以及芦丁含量实现准确测定，进一步地，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1为腺苷的标准工作曲线；图2为绿原酸的标准工作曲线；图3为芦丁的标准工作曲线。具体实施方式本专利技术实施例提供了一种腺苷含量的测定方法及其应用，用于解决现有技术中，无法同时准确检测软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的技术缺陷，有效提高了软胶囊中腺苷、绿原酸以及芦丁含量的检测效率和检测精确度。下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。为了更详细说明本专利技术，下面结合实施例对本专利技术提供的一种腺苷含量的测定方法及其应用，进行具体地描述。实施例1本实施例为配制待测液的具体实施例。本实施例中，所选用的待测样品为某市售轻络素辅助降血脂软胶囊。0.25g待测样品与10ml第一溶剂1、25ml第二溶剂1混合后，以37Hz的频率超声1min，得第一产物1。第一产物1在8000r/min的转速下离心2min后，弃去上层液，得第二产物1。25ml第二产物1溶于25ml第二溶剂1中，定容至50ml后摇匀，经0.22μm的有机相滤膜过滤，得待测液1。本次配制中，第一溶剂1为石油醚，第二溶剂1为20％甲醇溶液。0.25g待测样品与17ml第一溶剂2、17ml第二溶剂2混合后，以37Hz的频率超声1min，得第一产物2。第一产物2在6000r/min的转速下离心3min后，弃去上层液，得第二产物2。20ml第二产物2溶于30ml第二溶剂2中，定容至50ml后摇匀，经0.22μm的有机相滤膜过滤，得待测液2。本次配制中，第一溶剂2为正己烷，第二溶剂2为10％乙腈溶液。0.25g待测样品与9ml第一溶剂3、27ml第二溶剂3混合后，以37Hz的频率超声1min，得第一产物3。第一产物3在5000r/min的转速下离心1min后，弃去上层液，得第二产物3。12.5ml第二产物3溶于37.5ml第二溶剂3中，定容至50ml后摇匀，经0.22μm的有机相滤膜过滤，得待测液3。本次配制中，第一溶剂3为乙醚，第二溶剂3为10％乙醇溶液。实施例2本实施例为配制标准品溶液的具体实施例。本实施例中，腺苷标准品购自SIGMA，其批号为WXBC1570V，纯度为99％；绿原酸标准品购自中国食品药品检定研究院，其批号为110753-201415，纯度为96.2％；芦丁标准品购自中国食品药品检定研究院，其批号为100080-201409，纯度为91.9％。精密称取绿原酸标准品5.92mg，置于10ml棕色容量瓶中，加入50％V/V的甲醇溶解后，定容，摇匀，得绿原酸储备液，于4℃冰箱中储存备用。精密称取绿原酸对照品5.92mg，置于10ml棕色容量瓶中，加入50％甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得绿原酸储备液。储备液放在4℃的冰箱中储存备用。精密称取腺苷对照品8.44mg，芦丁对照品4.49mg，置于100ml棕色容量瓶中，加入20ml甲醇短暂超声，再加入50ml水短暂超声溶解，精密加入1.00ml绿原酸储备液，加水定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种腺苷含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法为：步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液；得第二产物；步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。

【技术特征摘要】
1.一种腺苷含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法为：步骤一、溶解：待测样品与第一溶剂、第二溶剂混合后，超声得第一产物；步骤二、提纯：所述第一产物离心后，弃去上层液；得第二产物；步骤三、过滤：所述第二产物溶于第二溶剂中，有机相滤膜过滤得待测液；步骤四、高效液相测定：待测液经高效液相色谱测定峰面积，与标准曲线对照，得待测物含量；所述第一溶剂选自：石油醚、正己烷以及乙醚中的一种或多种，所述第二溶剂选自：体积浓度为20％甲醇溶液、10％乙腈溶液以及10％乙醇溶液中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的腺苷含量的测定方法，其特征在于，步骤一中，第一溶剂和第二溶剂的体积比为1：(2～3)。3.根据权利要求1所述的腺苷含量的测定方法，其特征在于，步骤二中，所述离心的转速为5000～8000r/min，所述离心的时间为1～3min。4.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏昭仑，叶少文，李珍，
申请(专利权)人：汤臣倍健股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44