嵌合抗ROR1抗体Fab分子及其制备方法和应用技术

嵌合抗ROR1抗体Fab分子及其制备方法和应用，包括通过链间二硫键连接的重组轻链L和重组重链Fd，所述重组轻链L的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重组重链Fd的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术大大降低了抗ROR1抗体的鼠源性成分，仍保存人鼠交叉反应的特点，有利于进一步开展体内试验。保留了鼠源性抗体的模拟抗原特性，可潜在用于高表达ROR1的肿瘤的靶向诊疗。原核表达载体易于构建，可大量表达，生产快速且便于纯化。有利于制备嵌合全分子抗体或抗体的人源化改造，进一步降低抗ROR1抗体中的鼠源成分，以开展高表达ROR1的肿瘤的靶向诊疗研究。

Chimeric anti ROR1 antibody Fab and its preparation and Application

Chimeric anti ROR1 antibody of Fab molecule and its preparation method and application, including through the chain connection between the two disulfide bonds of recombinant L and recombinant light chain heavy chain Fd, the recombinant light chain L amino acid sequence of SEQ ID NO.1 shows, the amino acid sequence of recombinant Fd heavy chain is shown as SEQ ID NO.2. The invention greatly reduces the mouse - derived components of anti ROR1 antibody, and still maintains the characteristics of cross reaction of human mice, which is beneficial to further carrying out in vivo test. It has retained the mimic antigen characteristics of the mouse - derived antibody and could potentially be used for targeting the tumor with high expression of ROR1. The prokaryotic expression vector is easy to construct, and can be expressed in large quantities. It is fast and easy to purify. It is beneficial to humanized transformation of chimeric whole molecular antibodies or antibodies, and further reduce the murine components in anti ROR1 antibodies, so as to carry out targeted diagnosis and treatment of tumors with high expression of ROR1.

【技术实现步骤摘要】
嵌合抗ROR1抗体Fab分子及其制备方法和应用
：本专利技术属于基因工程技术和免疫靶向诊疗领域，具体涉及一种嵌合抗ROR1抗体Fab分子及其制备方法和应用。
技术介绍
：自1986年美国FDA首次批准单克隆抗体药物—莫罗单抗(Muromomab-CD3)应用于临床治疗以来，已有数十种靶向制剂用于肿瘤治疗，均展现出良好的肿瘤特异性和低毒性，成为肿瘤生物治疗的一大亮点。靶向治疗具有较好的选择性，通过抗体对靶分子的识别，可特异性结合肿瘤细胞膜受体，阻断信号传递过程，进而抑制肿瘤细胞的生长和扩散。近年来，抗体介导的肿瘤靶向治疗技术已在大肠癌、乳腺癌、肺癌等多种肿瘤的临床治疗中取得了令人瞩目的成就。然而在卵巢癌领域，大多数单抗介导的靶向治疗还处于临床前试验阶段，尽管针对肿瘤血管生成的单克隆抗体(Bevacizumab等)已用于卵巢癌的治疗，但由于组织特异性差，会在不同程度上与正常组织结合，而其所针对的靶分子在卵巢癌组织中的平均表达量和表达率较低，故临床治疗应用前景不明。因此，积极寻找卵巢癌组织中合适的靶分子已成为妇科肿瘤防治的当务之急。多项研究表明ROR1在慢性淋巴细胞白血病、乳腺癌、神经母细本文档来自技高网...

【技术保护点】
嵌合抗ROR1抗体Fab分子，其特征在于包括通过链间二硫键连接的重组轻链L和重组重链Fd，所述重组轻链L的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重组重链Fd的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

【技术特征摘要】
1.嵌合抗ROR1抗体Fab分子，其特征在于包括通过链间二硫键连接的重组轻链L和重组重链Fd，所述重组轻链L的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，重组重链Fd的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。2.根据权利要求1所述嵌合抗ROR1抗体Fab分子，其特征在于编码重组轻链L的核酸序列如SEQIDNO.3所示，编码重组重链Fd的核酸序列如SEQIDNO.4所示。3.权利要求1或2所述嵌合抗ROR1抗体Fab分子的制备方法，其特征在于将鼠源性单克隆抗体的重链可变区VH、轻链可变区VL通过重叠延伸PCR技术分别和人IgG1抗体的重链恒定区CH1和轻链恒定区CL片段连接，获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：张慧林，殷郑娜，童华，朱进，
申请(专利权)人：张慧林，朱进，
类型：发明
国别省市：江苏,32