一种人参皂苷Rh2的提取方法技术

本发明专利技术提供了人参皂苷Rh2的提取方法，其将有人参皂苷类成分的药材在乙酸乙酯及无机酸作用下水解后，使用印迹聚合物柱分离纯化，以洗脱出人参皂苷Rh2。本发明专利技术所揭示的一种人参皂苷Rh2的提取方法，实现了从价格便宜的药材中高效分离并提取人参皂苷Rh2，并降低人参皂苷Rh2的制备成本，分离后得到最终的人参皂苷Rh2的纯度可达到98％以上。

A method for extracting ginsenoside Rh2

The invention provides a method for the extraction of ginsenoside Rh2. After it is hydrolyzed by ethyl acetate and inorganic acid, it is separated and purified by using imprinted polymer column, and the ginsenoside Rh2 is washed out. The method of extracting ginsenoside Rh2 from the present invention achieves the effective separation and extraction of ginsenoside Rh2 from the cheap medicinal materials, and reduces the preparation cost of ginsenoside Rh2. After separation, the purity of the ginsenoside Rh2 is over 98%.

【技术实现步骤摘要】
一种人参皂苷Rh2的提取方法
本专利技术涉及人参加工
，尤其涉及一种人参皂苷Rh2的提取方法。
技术介绍
人参皂苷(Ginsenoside)是一种固醇类化合物。人参皂苷Rh2作为人参皂苷的一种重要单体化合物，人参皂苷Rh2具有抑制癌细胞向其它器官转移，增强机体免疫力，快速恢复体质的作用。对癌细胞具有明显的抗转移作用，可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复。人参皂苷Rh2单体化合物对癌细胞的生长有抑制作用，能诱导肿瘤细胞凋亡，逆转肿瘤细胞异常分化，抗肿瘤转移，与化疗药物联用能起到增效减毒的作用。此外，人参皂苷Rh2还具有提高机体免疫力、抗菌、改善心脑血管供血不足、调节中枢神经系统、抗疲劳、延缓衰老等功效。然而，天然的人参皂苷Rh2单体化合物仅存在于野外环境生长的人参中。由于野生的人参价格昂贵，因此从野山人参中提取人参皂苷Rh2单体的成本就非常高昂，不适于普通患者使用。西洋参、三七茎叶等价格便宜的药材中也含有人参皂苷Rh2单体化合物，但是现有技术中的提取方法的提取效果不甚理想。同时，由于西洋参或者三七中的二醇类皂苷和人参皂苷Rh2单体化合物的分子结构相同(仅糖链不同)，因此传统的从西洋参、三七茎叶等价格便宜的药材提取人参皂苷Rh2单体化合物的通常纯度不高。公告号为CN101463061B的中国专利技术专利公开了“三七人参皂苷Rg1、Rb1及其总皂苷的制备方法”，其采用溶剂萃取+大孔树脂吸附+结晶的方式进行提取有效成分，但是该现有技术中无法实现单一提取特定单体化合物的缺陷，尤其是无法单一地提取人参皂苷Rh2单体化合物，因此存在一定的局限性，且存在难以富集，体系复杂，分离纯化难度大的缺陷。同时，由于，人参皂苷Rh2具有热敏、易水解的特性，从而导致采用上述方法存在对人参皂苷Rh2提取效果不理想。公开号为CN1648133A的中国专利技术专利公开了“人参皂苷Rh2的制备方法”，其采用乙醇浸提---分离纯化萃取---分离纯化---水解提取---酶转化---低温干燥的工艺路线。该现有技术仍然存在提取工艺路线较长的缺陷且工艺繁琐的缺陷。有鉴于此，有必要对现有技术中的人参皂苷Rh2的提取方法予以改进，以解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于公开一种人参皂苷Rh2的提取方法，以实现从价格便宜的药材中高效分离并提取人参皂苷Rh2，并降低人参皂苷Rh2的制备成本及分离后得到最终的人参皂苷Rh2的纯度。为实现上述专利技术目的，本专利技术提供了一种人参皂苷Rh2的提取方法，包括以下步骤：S1：将呈粉状并含有人参皂苷类成分的药材加入乙酸乙酯，常温条件下，以1500～2000rpm的转速搅拌过夜，抽滤，滤饼干燥得淡黄色粉末；S2：取步骤S1所得的淡黄色粉末与纯化水混合，加热至100～120℃，搅拌反应半小时，滴加体积比为10～15％无机酸溶液，并在90～110℃条件下加入乙酸乙酯与水混合溶液，以1500～2000rpm的转速搅拌30分钟，抽滤得母液，母液使用饱和碳酸钠水溶液洗涤1～3次后，使用无水碳酸钠在60℃条件下干燥4～5小时，得固体，然后将固体加入乙酸乙酯及石油醚打浆，抽滤干燥后，得皂苷粗品；S3：取醋酸纤维素酞酸酯、十二醇、苯和4-乙烯基吡啶混合均匀，超声处理4～6h后，加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和偶氮二异丁腈后再经超声处理5～10分钟后得混合溶液，使用进样针移取所述混合溶液至甲醇处理过的一端封口的移液枪枪头内，移液枪枪头用保鲜膜及硅胶封口后于60℃反应24小时后取出，除去保鲜膜及硅胶，用甲醇洗脱，过滤，得固体，固体研磨至直径20～25微米的范围内，装入不锈钢柱内，以制得印迹聚合物柱；S4：将步骤S2所得的皂苷粗品配置浓度为20wt％的水溶液，使用步骤S3中的印迹聚合物柱进行分离纯化，TLC检测反应完全，以洗脱出人参皂苷Rh2。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S1中，含有人参皂苷类成分的药材选自人参、人参茎叶、西洋参、西洋参茎叶、三七或者三七茎叶中的一种或两种以上任意比例的混合物。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S2中的无机酸溶液的浓度为1～1.2mol/L，作为本专利技术的进一步改进，述步骤S2中的无机酸溶液选自盐酸溶液、硫酸溶液、硝酸溶液、硼酸溶液、偏铝酸溶液、高氯酸溶液、次氯酸溶液或者磷酸溶液。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S3中，超声处理中的超声频率为40赫兹。作为本专利技术的进一步改进，所述步骤S4中，不锈钢柱中所使用的洗脱剂为由纯化水与乙醇所形成的乙醇溶液，所述洗脱剂中乙醇的浓度为50wt％。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术所揭示的一种人参皂苷Rh2的提取方法，实现了从价格便宜的药材中高效分离并提取人参皂苷Rh2，并降低人参皂苷Rh2的制备成本，分离后得到最终的人参皂苷Rh2的纯度可达到98％以上。附图说明图1为通过本专利技术制备得到的人参皂苷Rh2的核磁共振氢谱图；图2为通过本专利技术制备得到的人参皂苷Rh2的核磁共振碳谱图；图3为通过本专利技术制备得到的人参皂苷Rh2的HPLC图。具体实施方式下面结合附图所示的各实施方式对本专利技术进行详细说明，但应当说明的是，这些实施方式并非对本专利技术的限制，本领域普通技术人员根据这些实施方式所作的功能、方法、或者结构上的等效变换或替代，均属于本专利技术的保护范围之内。除非说明书中有特殊说明，本专利技术中的各个实施例中的组分、原料均采用分析纯级别。另外，各实施例中的“g”为重量单位“克”；“h”为时间单位“小时”；“ml”为体积单位“毫升”；“室温”为23℃。“rmp”为每分钟的转速。“wt％”为浓度单位“质量比百分比”。“mol/L”为浓度单位“摩尔每升”。本实施方式具体载明了一种人参皂苷Rh2的提取方法，包括以下步骤：步骤S1：在2000ml单口烧瓶中，称取放入呈粉状并含有人参皂苷类成分的药材200g。含有人参皂苷类成分的药材选自人参、人参茎叶、西洋参、西洋参茎叶、三七或者三七茎叶中的一种或两种以上任意比例的混合物。在本实施方式中，所选用的含有人参皂苷类成分的药材选自三七茎叶。加入600ml乙酸乙酯。常温条件下，以1500～2000rpm的转速搅拌过夜，抽滤，滤饼干燥得170g淡黄色粉末。步骤S2：另取一个2000ml单口瓶，取步骤S1所得的淡黄色粉末20g与300ml纯化水混合，加热至100～120℃，搅拌反应半小时，滴加体积比为10～15％无机酸溶液320ml，并在15分钟内滴加完毕，并在90～110℃条件下加入600ml乙酸乙酯与60ml水。在1500～2000rpm的转速搅拌30分钟，抽滤得母液，母液使用饱和碳酸钠水溶液洗涤3次后，使用无水碳酸钠在60℃条件下干燥4～5小时，得固体，然后将固体加入200ml乙酸乙酯及600ml石油醚打浆，抽滤干燥后，得皂苷粗品。该皂苷粗品约含7.5％的人生皂苷Rh2。在本实施方式中，该步骤S2中的无机酸溶液的浓度为1～1.2mol/L。无机酸溶液选自盐酸溶液、硫酸溶液、硝酸溶液、硼酸溶液、偏铝酸溶液、高氯酸溶液、次氯酸溶液或者磷酸溶液，并具体选用1.2mol/L的盐酸溶液，并通过盐酸溶液对总皂苷进行酸解。步骤S2所涉及的化学反应方程式如下式(1)所示：步骤S3：取0.05ml醋酸纤维素酞酸酯、0.2950g十二醇、46ml苯和0.1ml4-乙本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人参皂苷Rh2的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将呈粉状并含有人参皂苷类成分的药材加入乙酸乙酯，常温条件下，以1500～2000rpm的转速搅拌过夜，抽滤，滤饼干燥得淡黄色粉末；S2：取步骤S1所得的淡黄色粉末与纯化水混合，加热至100～120℃，搅拌反应半小时，滴加体积比为10～15％无机酸溶液，并在90～110℃条件下加入乙酸乙酯与水混合溶液，以1500～2000rpm的转速搅拌30分钟，抽滤得母液，母液使用饱和碳酸钠水溶液洗涤1～3次后，使用无水碳酸钠在60℃条件下干燥4～5小时，得固体，然后将固体加入乙酸乙酯及石油醚打浆，抽滤干燥后，得皂苷粗品；S3：取醋酸纤维素酞酸酯、十二醇、苯和4‑乙烯基吡啶混合均匀，超声处理4～6h后，加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和偶氮二异丁腈后再经超声处理5～10分钟后得混合溶液，使用进样针移取所述混合溶液至甲醇处理过的一端封口的移液枪枪头内，移液枪枪头用保鲜膜及硅胶封口后于60℃反应24小时后取出，除去保鲜膜及硅胶，用甲醇洗脱，过滤，得固体，固体研磨至直径20～25微米的范围内，装入不锈钢柱内，以制得印迹聚合物柱；S4：将步骤S2所得的皂苷粗品配置浓度为20wt％的水溶液，使用步骤S3中的印迹聚合物柱进行分离纯化，TLC检测反应完全，以洗脱出人参皂苷Rh2。...

【技术特征摘要】
1.一种人参皂苷Rh2的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将呈粉状并含有人参皂苷类成分的药材加入乙酸乙酯，常温条件下，以1500～2000rpm的转速搅拌过夜，抽滤，滤饼干燥得淡黄色粉末；S2：取步骤S1所得的淡黄色粉末与纯化水混合，加热至100～120℃，搅拌反应半小时，滴加体积比为10～15％无机酸溶液，并在90～110℃条件下加入乙酸乙酯与水混合溶液，以1500～2000rpm的转速搅拌30分钟，抽滤得母液，母液使用饱和碳酸钠水溶液洗涤1～3次后，使用无水碳酸钠在60℃条件下干燥4～5小时，得固体，然后将固体加入乙酸乙酯及石油醚打浆，抽滤干燥后，得皂苷粗品；S3：取醋酸纤维素酞酸酯、十二醇、苯和4-乙烯基吡啶混合均匀，超声处理4～6h后，加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和偶氮二异丁腈后再经超声处理5～10分钟后得混合溶液，使用进样针移取所述混合溶液至甲醇处理过的一端封口的移液枪枪头内，移液枪枪头用保鲜膜及硅胶封口后于60℃反应24小时后取出，除去保鲜膜及硅胶，用甲醇洗脱，过滤，得固体，固体研磨至直径20～25微米的范围内，装入不...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨闰，仇文俊，丁健，
申请(专利权)人：江苏吉生源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32