在芽孢杆菌属细胞中生产多肽的方法技术

技术编号:1743903 阅读:218 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
制备多肽的方法,其包括:    (a)将芽孢杆菌属宿主细胞培养于有利于生产多肽的培养基中,其中该芽孢杆菌属细胞含有一具有串联启动子的核酸构建体,该串联启动子的每个启动子序列均可操作地与编码该多肽的核酸序列连接;和    (b)从培养基中分离该多肽。(*该技术在2019年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
专利
本专利技术涉及在细菌细胞中生产多肽的方法。相关技术的描述芽孢杆菌已被建成生产天然和重组蛋白的良好宿主细胞系统。然而,具有增加蛋白表达的期望性状的芽孢杆菌属(Bacillus)宿主细胞可能并不一定具有用于商业用途的最期望的特性。传统上,芽孢杆菌属细胞中基因的最大表达通过在染色体上扩增含有与目标基因可操作连接的单个启动子的表达盒以及一个可扩增的筛选标记基因如抗生素抗性标记基因来实现。扩增将导致在染色体上产生多拷贝的表达盒和筛选标记基因。然而,该方法有一些缺点。例如,通过扩增由单个启动子驱动的基因不可能获得饱和水平的mRNA。而且,在细胞的染色体上产生多拷贝的表达盒和筛选标记基因可能不稳定。此外,除去筛选标记基因而同时不丢失表达盒在技术上并非切实可行。Ichikawa等(1993,FEMS微生物学通讯(FEMS MicrobiologicalLetters)111219-224)公开了在含有分泌型表达载体的短芽孢杆菌(Bacillus brevis)中进行霍乱毒素B的细胞外生产,该载体携带介导成熟霍乱毒素B编码基因表达的多启动子。Agaisse和Lereclus(1994本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员:W·威德内A·斯罗马M·D·托马斯
申请(专利权)人:诺沃奇梅兹生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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