The present invention relates to a method for purifying polypeptide drugs, in particular to a method for purification of SAE Rick. Includes the following steps: Processing: resin anion exchange resin into acetate type anion exchange resin; salt: Xi Qu Rick crude dissolved in water, adding acetate type anion exchange resin, stirring at the temperature of 25~30 DEG C under the condition of controlling the pH of solution was 2.5 ~ 3.5, filtering and collecting filtrate; purification: salt after the filtrate after reversed-phase chromatography column for purification, collected eluent, elution concentration and freeze-drying or freeze-dried powder obtained directly, pure acetic acid Xi Qu Rick. The present invention is combined with anion exchange resin of acetic acid type and purified by reversed-phase high performance liquid chromatography, and it can get Rick's acetic acid which is over 99% and yield over 40%.
【技术实现步骤摘要】
一种纯化醋酸西曲瑞克的方法
本专利技术属于多肽纯化的
,特别是涉及一种可规模化纯化醋酸西曲瑞克的方法。
技术介绍
醋酸西曲瑞克是一种合成的十肽,主要应用于辅助生育技术,对控制性卵巢刺激的患者,防止提前排卵,醋酸西曲瑞克又常称为西曲瑞克,西曲瑞克是促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂,能与内源性LHRH竞争性地结合垂体细胞膜上的受体,从而抑制垂体分泌黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)呈剂量依赖性。西曲瑞克无起始刺激效应,用药后即产生抑制,持续治疗可持续此抑制作用。西曲瑞克用于女性,可延迟LH峰从而推迟排卵。对于卵巢刺激的妇女,本品的作用时间呈剂量依赖性,单剂量给予西曲瑞克3mg,对其抑制作用进行了为期至少4天的评估,在第4天,抑制作用约为70%,每24小时重复给予0.25mg西曲瑞克,也可维持其作用。动物试验及人体试验均显示,停止注射后,内源性的LH及FSH的分泌可迅速恢复。Fmoc法固相合成是目前多肽合成的常用手段,合成后的全保护多肽需采用三氟乙酸(TFA)进行切割并脱侧链保护,以获得多肽粗品,如此粗品中会含有游离的TFA和TFA盐,游离的TFA和TFA盐会影响多肽的理化性质,通常TFA盐转成其他盐,如醋酸盐,虽然游离的TFA通过冻干容易除去,但与肽形成的TFA盐,因存在强的离子键,难以通过冻干除去。专利CN101863960B采用固相Boc法合成西曲瑞克,氨水进行切割,H2/钯除去侧链保护基以获得粗肽。该粗肽通过反相C18色谱柱纯化,得到西曲瑞克,此法由于需使用大量的三氟醋酸除去Boc保护基以及氨水用于氨解切割,对环境污染大。另外,使用H2/ ...
【技术保护点】
一种纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、树脂处理:阴离子树脂处理成醋酸根型的阴离子树脂;步骤2、转盐:西曲瑞克粗品加水溶解,加入步骤1所得的醋酸根型的阴离子树脂,在温度为25~30℃的条件下搅拌,控制溶液的pH为2.5~3.5,过滤收集滤液;步骤3、纯化:反相色谱柱用流动相平衡,所述流动相由流动相A和流动相B组成,所述流动相A为水溶液,所述流动相B为乙腈溶液,所述流动相A和所述流动相B均加入质量百分数为0.1%~1%的醋酸溶液,将步骤2所得的滤液上样、洗脱,并分段收集洗脱液,洗脱液浓缩后冻干或直接冻干,获得粉末状醋酸西曲瑞克纯品。
【技术特征摘要】
1.一种纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、树脂处理:阴离子树脂处理成醋酸根型的阴离子树脂;步骤2、转盐:西曲瑞克粗品加水溶解,加入步骤1所得的醋酸根型的阴离子树脂,在温度为25~30℃的条件下搅拌,控制溶液的pH为2.5~3.5,过滤收集滤液;步骤3、纯化:反相色谱柱用流动相平衡,所述流动相由流动相A和流动相B组成,所述流动相A为水溶液,所述流动相B为乙腈溶液,所述流动相A和所述流动相B均加入质量百分数为0.1%~1%的醋酸溶液,将步骤2所得的滤液上样、洗脱,并分段收集洗脱液,洗脱液浓缩后冻干或直接冻干,获得粉末状醋酸西曲瑞克纯品。2.根据权利要求1所述的纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,所述步骤1中的阴离子树脂用氢氧化钠溶液或醋酸溶液交替处理,转成醋酸根型阴离子树脂。3.根据权利要求1所述的纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,所述步骤2中西曲瑞克粗品:水:醋酸根型的阴离子树脂的重量比为1:100~400:10~200。4.根据权利要求1所述的纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,所述步骤3中的反相色谱柱为烷基键合硅胶填料,粒径为3-10μm,孔径为80-200A°。5.根据权利要求1所述的纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,所述步骤3中的反相色谱柱为C18填料,粒径为10μm,孔径为100A°。6.根据权利要求1所述的纯化醋酸西曲瑞克的方法,其特征在于,所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:符友伟,滕景斌,王卫国,林健勇,叶燕军,张娜,张会会,谢治平,张旭,
申请(专利权)人:福州博中技术开发有限公司,
类型:发明
国别省市:福建,35
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